12.1. Почему нельзя ожидать, что внутригенные взаимно супрессирующие мутации сдвига рамки могут происходить в любых положениях внутри данного гена? 12.2. Синтетическая РНК получена сополимеризацией смеси UDP и CDP в молярном соотношении 1: 4. С какими относительными частотами в этом сополимере будут встречаться различные кодоны? Какие аминокислоты будут включаться в состав полипептидов, образующихся в бесклеточной системе синтеза белка, с использованием этой синтетической матрицы? 12.3. Нуклеотидный состав ДНК различных организмов, в особенности микроорганизмов; варьирует в очень широких пределах. Так, в ДНК Micrococcus lysodeikticus относительное содержание (G + С) достигает 72%, а в ДНК Bacillus cereus - 35%. Для простейших, типа Tetrahymena pyriformis, сумма (G + С) составляет лишь 25% от общего числа оснований в ДНК. И в то же время белки организмов, существенно различающихся по нуклеотидному составу ДНК, характеризуются очень сходным аминокислотным составом. Как можно объяснить это наблюдение? Предложите способ проверки вашей гипотезы. 12.4. Внегенная супрессия некоторых мутаций сдвига рамки осуществляется за счет мутации, картируемой в структурном гене тРНКG1у. Как вы считаете, с какими изменениями структуры тРНК Gly может быть связана эта супрессорная мутация? Как можно было бы проверить вашу гипотезу, не определяя непосредственно нуклеотидную последовательность нормальной и мутантной тРНК? 12.5. Для гена, кодирующего ß-галактозидазу E. coli, была обнаружена новая мутация, NG813, вызывающая преждевременную терминацию полипептидного синтеза. Эта мутация не супрессируется в присутствии факторов F', несущих amber- или осhrе -супрессорные гены. Мутация картируется в непосредственной близости от известной ранее amber -мута-
ции, вызывающей терминацию трансляции на том же аминокислотном остатке, что и NG813. Дополнительная мутация, связанная с заменой одного основания, приводит к тому, что вместо NG813 появляется мутантный кодон UAA, подверженный ochre -супрессии. В то же время замена единичного основания в том же кодоне в гене дикого типа может сопровождаться возникновением или amber -мутаций, или мутаций типа NG813. Какова природа мутации NG8134 12.6. Все ochre -супрессорные гены служат одновременно и amber-супрессорами, но не все amber-супрессоры могут играть роль ochre -супрессоров. Объясните почему. 12.7. Как определить, может ли одноцепочечная РНК, выделенная из РНК-содержащего вируса, выполнять непосредственно роль мРНК или служить только в качестве комплементарной цепи, направляющей процесс образования мРНК после инфекции соответствующего хозяина? 12.8. Известны температурочувствительные мутации гена su3 +E. coli. Предложите метод обнаружения таких мутаций. По аналогии с известными температурочувствительными белками предложите интерпретацию феномена чувствительности к повышенной температуре этих тРНКTyг-мутантов. 12.9. Определенная amber -мутация (Аат18) фага фХ174 приводит к потере функции цистрона А при развитии на Su– -хозяине. Размножение мутантного (Аат18) штамма на Su + -хозяине с последующей инфекцией Su –-хозяина и выращиванием при 30° С позволяет отобрать спонтанные ревертанты и псевдоревертанты этого amber -мутанта. Некоторые из отобранных штаммов оказываются неспособными к росту на Su ~ -хозяине при повышенной температуре (42° С). Комплементация фенотипа температурочувствительности этих штаммов может наблюдаться при совместной инфекции Su–хозяина ревертантом и исходным Аат18 мутантом. Предложите интерпретацию этих наблюдений.
