АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Метод культивирования

В ряде случаев культивирование является эффективным дополнительным методом диагностики протозоозов. Для культивирования всех простейших кроме лямблий (жиардий) применяют следующие среды:

простая сывороточная среда, состоящая из 9 частей стерильного изотонического раствора (0,85%) и 1 части нормальной лошадиной (или бычьей) сыворотки;

- двухфазная сывороточная среда. К 19 частам бычьей сыворотки (сыворотки других животных или человека) добавляют 1 часть мясопептонного бульона с 2% раствором глюкозы. Смесь оставляют для свертывания при 80° С в течение 2 ч в косом положении, охлаждают, а затем заливают стерильным изотоническим раствором так, чтобы он покрывал на 1 см верхний край скоса;

- среда Павловой. 8,5 г хлорида натрия, 0,59 г двузамещенного фосфорно-кислого натрия и 0,45 г однозамещенного фосфорно-кислого калия растворяют в 1000 мл дистиллированной воды. Раствор стерилизуют в автоклаве 30 мин при давлении 1,5 атмосферы. После охлаждения в него добавляют стерильную лошадиную (бычью) сыворотку в соотношении 1:20 и разливают в стерильные пробирки по 5-7 мл;

- среда Райса. Одну часть мясопептонного бульона смешивают с 4 частями изотонического раствора и добавляют нативную лошадиную или бычью сыворотку в соотношении 1:10. Среду в стерильных условиях разливают в стерильные пробирки по 8-10 мл.

Для культивирования простейших могут использоваться и другие, более сложные по составу среды.

Пробирки со средой, для проверки на стерильность, помещают на одни сутки в термостат при температуре 37°С, или выдерживают при комнатной температуре 3 дня. Перед посевом в каждую пробирку добавляют 1-2 петли рисового или пшеничного крахмала, предварительно стерилизованного сухим жаром при температуре 90°С. Одной пробой одновременно засевают 2 – 3 пробирки. Посев осуществляется путем добавления в пробирку комочка оформленного кала величиной с горошину или 2-3 каплями жидких испражнений. Смесь гомогенизируют встряхиванием и помещают в термостат при температуре 37°С. Результаты посевов проверяют через каждые 24 ч в течение 5 суток. Для проверки со дна каждой пробирки с помощью стерильной пипетки забирают каплю осадка с небольшим количеством жидкости, помещают на предметное стекло, покрывают покровным стеклом и микроскопируют.

Дата добавления: 2015-05-19 | Просмотры: 646 | Нарушение авторских прав