АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Тема 27. ХЛАМИДИИ

Возбудителей хламидиозов относят к порядку Chlamydiales, се­мейству Chlamydiaceae, включающему в себя один род Chlamydia с двумя видами С. trachomatis и С. psittaci. Это грамотрицательные не­подвижные облигатные паразиты с выраженным полиморфизмом, чаще кокковидной формы. С. trachomatis патогенен для человека и мышей. C.psittaci вызывает ряд инфекционных заболеваний у жи­вотных и птиц. Развитие патологического процесса зависит от мес­та локализации возбудителя. Хламидии чаще поражают респира­торные органы и кишечный тракт у птиц, ягнят, телят, поросят; ге­ниталии у крупного и мелкого рогатого скота; синовиальные ткани телят, поросят, ягнят, жеребят; слизистые оболочки глаз крупного рогатого скота, свиней, овец, кошек и др. Клинические проявления хламидиоза разнообразны: диарея, пневмонии, конъюнктивиты, полиартриты, перикардиты, энцефалиты, аборты, мертворождение, бесплодие, вагиниты, эндометриты и др. К С. psittaci восприимчивы дикие и домашние птицы (свыше 130 видов). Из домашних птиц чаще болеют утки, индейки, гуси, реже — куры, голуби (орнитоз).

Бактериологическое исследование. Включа­ет в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методом световой и люминесцентной микроскопии, выделение чистой культуры методом биопробы и идентификацию возбудителя по морфологическим свойствам.

От павших или вынужденно убитых животных в лабораторию направляют кусочки паренхиматозных органов; при аборте — плод целиком или паренхиматозные органы и сычуг; для прижиз­ненной диагностики — пробы эякулята или замороженной спер­мы, кровь для серологических исследований. Материал берут в те­чение 2 ч после гибели, убоя или аборта, помещают в термос со льдом.

Микроскопия. Для световой микроскопии мазки из па­тологического материала окрашивают по Романовскому— Гимза (хламидии в зависимости от стадии развития окрашены в красно-или сине-фиолетовый цвет), Стемпу. При окраске по Стемпу препараты фиксируют нагреванием, окрашивают 15 мин фуксином Циля (рН 7,4), разведенным дистиллированной водой в соотно­шении 1: 5, промывают дистиллированной водой. Затем обраба­тывают 1 мин 0,05 %-м раствором серной кислоты, вновь промы­вают дистиллированной водой, докрашивают 30 с 1 %-м водным раствором малахитовой зелени, после чего промывают водой и микроскопируют: хламидии ярко-красные на зеленоватом фоне клеток. При иммунофлуоресцентном выявлении хламидии в мате­риале используют прямой и непрямой варианты; в зависимости от этапа морфогенеза размеры хламидии варьируют от 0,2...0,4 до 0,6...1,5мкм.

Культурально-биохимические свойства. Для выделения хламидии используют 6...7-суточные куриные эмб­рионы или лабораторных животных. Из материала готовят суспен­зию на физиологическом растворе (1:10), центрифугируют, надо-садочную жидкость обрабатывают антибиотиками (100 ЕД/мл пе­нициллина, 500ЕД/мл стрептомицина) при 4°С в течение 24 ч, одновременно контролируя на стерильность. Затем исследуемый материал в объеме 0,2 мл вводят в желточный мешок. Эмбрионы инкубируют в термостате при 37 °С и относительной влажности 75 %. Эмбрионы, погибшие на 4...12-е сутки, вскрывают, аллантоисную жидкость контролируют на бактериальную контаминацию. Из желточных мешков готовят мазки-отпечатки и исследуют на нали­чие хламидии методом микроскопии. При отсутствии специфи­ческой гибели эмбрионы на 12-е сутки вскрывают и проводят вто­рой пассаж, при необходимости — и третий.

Биопроба. Для выделения хламидии заражают пять белых мышей или двух-трех морских свинок. Материал, подготовлен­ный ранее описанным способом, вводят внутрибрюшинио или интраторакально мышам в дозе 0,3 мл, морским свинкам — 0,5 мл. Наблюдение ведут в течение 3 сут. В положительных случаях жи­вотные погибают на 7...10-е сутки. При вскрытии обнаруживают большое количество серозно-фибринозного экссудата в грудной и брюшной полостях, очаговую пневмонию, кровоизлияния под ле­гочной плеврой. При отсутствии гибели животных проводят сле­пые пассажи. Обнаружение и идентификацию хламидии прово­дят, как описано ранее.

Серологическая диагностика. Основана на по­становке РСК или РДСК. Сыворотки исследуют в разведении 1: 5 и 1: 10; положительным результатом считают задержку гемолиза на два—четыре креста в разведении 1:10, сомнительным — на один крест в разведении 1: 10 и на один—четыре креста — в разве­дении 1:5.

Биопрепараты. Инактивированная эмульгированная вакцина против хламидиозного аборта овец.

Набор антигенов и сывороток для серологической диагностики хламидиозов сельскохозяйственных животных.

Тема 28. ПАТОГЕННЫЕ ГРИБЫ

Возбудители дерматомикозов (стригущего лишая и парши). Отно­сят к несовершенным грибам к порядку Hyphomycetales, родам Trichophyton, Microsporum и Achorioti.

Возбудитель трихофитии рода Trichophyton (tricho — волос, phytum — растение). Основные виды трихофитона Т. faviforme, Г. verrucosum вызывают заболевание преимущественно у молодня­ка крупного рогатого скота и овец, реже у лошадей, собак, верб­людов; Т. equinum — возбудитель лишая лошадей (1...2 % случаев); Т. gypseum, T. mentagrophytes — основные возбудители трихофитии у мышей, крыс, собак, кроликов, кошек, морских свинок, пушных зверей, редко лошадей, крупного рогатого скота.

Трихофития характеризуется появлением облысевших участ­ков кожи, в первую очередь в области головы, затем поражение может распространиться дальше по поверхности тела животного. В зоне пораженных участков волос хрупкий, ломкий, отторгаю­щиеся чешуйки эпидермиса иногда слипаются в виде корочек. На концах оставшихся волос заметны серовато-белые «чехлы» (споры гриба).

Для лабораторного исследования делают соскоб пораженного эпидермиса с захватом волос на границе со здоровой тканью. Го­товые препараты из патологического материала микроскопируют. При сомнительном результате делают посев на плотную среду Со-буро. Предварительно соскобы обрабатывают 10 %-м раствором щелочи (КОН или NaOH) в течение 15...30 мин. Препаровальной иглой (или бактериологической петлей) несколько волосков пере­носят на предметное стекло, накрывают покровным стеклом. Иглу (или петлю) следует сразу хорошо прокалить на пламени горелки. Приготовленный препарат («раздавленная капля») микроскопиру­ют под объективом сухой системы средней степени увеличения. На пораженном волосе внутри и снаружи его отчетливо видны расположенные рядами круглые, хорошо преломляющие свет ко­роткие гифы мицелия гриба (споры).

Для выделения чистых культур материал после десятиминут­ной обработки 5...10%-м раствором шелочи промывают стериль­ным физиологическим раствором при центрифугировании. Об­ломки волосков длиной 1...2см переносят на агар Сабуро в 8...10 пробирок и располагают их на расстоянии 1 см друг от друга. Культивируют при 26...28 °С в аэробных условиях. Из-за сильной загрязненности патологического материала в питательную среду добавляют пенициллин и стрептомицин по 100...200 ЕД/мл.

Время появления и характер роста колоний зависят от вида гриба — возбудителя дерматомикоза.

Возбудитель микроспории — Microsporum. Различают три вида данного рода гриба: Microsporum lanosum, M. equinum и М. gypseum. Стригущий лишай, вызванный грибом рода микроспорум, по клиническому проявлению не отличается от трихофитии, за исключе­нием того, что волосы на пораженных участках кожи головы, ног обламываются ближе к поверхности кожи. К микроспории вос­приимчивы кошки, собаки, лошади, пушные звери, обезьяны, тигры, а также человек (особенно дети). Взятие патологического материала, порядок его исследования такие же, как при трихофи­тии.

В культурах гриб микроспорум имеет мицелиальную форму. Мицелий септирован, многоклеточный, почти такой же, как и мицелий трихофитона, отличие только в пораженном волосе: гриб располагается не рядами, а беспорядочно разбросан, обычно в виде «сотообразных» скоплений.

Необходимо проводить дифференциацию трихофитона и мик-роспорума ввиду различного их антигенного строения.

Люминесцентная диагностика микроспо­рии. Осуществляют с помощью ПРК-4 с фильтром Вуда в тем­ном помещении. При наличии возбудителя последний обнаружи­вают по характерному зеленоватому свечению под действием уль­трафиолетового излучения (возбудители трихофитии не флуорес­цируют). Возможна идентификация видов и родов возбудителей трихофитии и микроспории методом флуоресцирующих антител.

Различие в антигенном строении разных видов дерматомице-тов имеет значение в создании профилактических специфических биопрепаратов. Биологическая промышленность выпускает вак­цину для иммунизации животных против стригущего лишая с ис­пользованием культуры гриба T.faviforme (вакцина ЛТФ-130).

Биопроба. Микроспорию можно воспроизвести у морских свинок, кроликов путем втирания культуры возбудителя или пато­логического материала в скарифицированную кожу.

Возбудитель парши. Парша как дерматомикоз клинически проявляется так же, как и стригущий лишай, но при парше пора­жения более глубокие. Возбудителей парши относят к роду Achorion. A. gallinae поражает кожу, перья птицы, реже вызывает заболевание у млекопитающих. A. schoenkini вызывает заболева­ние у человека; спорадически болеют собаки, кошки, обезьяны, редко телята.

Отбор и пересылка патологического ма­териала. Для лабораторного исследования материал берут так же, как при диагностике трихофитии. В культуре гриб Achorion имеет многоклеточный септированный мицелий, в препаратах из патологического материала находится в виде тонкого септирован-ного мицелия со спиралевидными «воздушными спорами» на кон­цах. Хорошо видны хламидоспоры с двухконтурной оболочкой. Хламидоспоры круглой или многогранной формы располагаются цепочками или группами. Диаметр споры 4...8 мкм. В пораженном волосе при микроскопировании видны темные образования — пу­зырьки воздуха.

Культивируют возбудитель парши на тех же питательных сре­дах, что и возбудителей стригущего лишая. На глюкозном агаре Сабуро колонии гриба белого цвета, бархатистые, гладкие, при старении складчатые, пигментированные (розового цвета).

Биопрепараты. Препарат ТФ-130 (ВИЭВ) и сухая вак­цина ЛТФ-130 (ВИЭВ) против трихофитии крупного рогатого скота содержат аттенуированный штамм Trichophyton verrucosum (Vaviforme).

Вакцина СП-! против трихофитии лошадей: из штамма Trichophyton equinum.

Вакцина Триховис (ВИЭВ) сухая против трихофитии овец: из штамма Trichophyton verrucosum (вариант автотрофикум).

Вакцина МЕНТАВАК против трихофитии пушных зверей и кроликов: готовят из культуры Trichophyton mentagrophytes.

Вакцина Камелвак-ТС против трихофитии верблюдов: содер­жит аттенуированный штамм гриба Trichophyton sarkisovi.

Вакцина МИКОЛАМ против трихофитии и микроспории пло­тоядных животных, нутрий и кроликов.

Поливак-ТМ: инактивированная вакцина против дерматофи-тозов собак, включает 8 видов и разновидностей грибов родов Trichophyton и Microsporum.

Вакцина ВАКДЕРМ против дерматофитозов: предназначена для борьбы с микроспорией и трихофитией собак, кошек, пушных зверей и кроликов. Готовят из высокоиммуногенных штаммов Microsporum canis, Microsporum gypseum и Trichophyton mentagrophytes.

Возбудитель кандидамнкоза. Принадлежит к роду Candida, включающему 7 видов. Наиболее частым возбудителем заболева­ния служит вид Candida albicans, реже С. tropicahs и др. Кандида-микоз (молочница) характеризуется воспалением с последующим некрозом слизистых оболочек пищеварительного тракта, начиная с ротовой полости, и образованием налета (пленок) на поверхнос­ти слизистой. Кандидамикозом болеют птицы (особенно молод­няк), телята и реже животные других видов. У взрослого крупного рогатого скота поражаются легкие, вымя; у поросят заболевание проявляется афтозным стоматитом и энтеритом. К кандидамикозу восприимчив человек, особенно грудные дети.

Патологический материал. Для микологического исследования у больной птицы и млекопитающих берут пинце­том пленки (налет) со слизистой оболочки ротовой полости; у коров исследуют дополнительно молоко (пробы из пораженной доли вымени). Посмертно делают соскобы со слизистой пищева­рительного тракта, а также отбирают кусочки пораженных орга­нов. Павшую птицу и трупы мелких животных направляют цели­ком.

Исследование патологического материала включает в себя мик-роскопирование нативных препаратов методом «раздавленная капля» или фиксированных и окрашенных по Граму, посев патологического материала для получения культуры гриба, биопробу.

Материал для микроскопического исследования готовят так же, как при диагностике дерматомикозов.

Возбудитель кандидамикоза — дрожжеподобные круглые и овальные почкующиеся клетки, диаметром 2,5...6мкм. Мицелий септированный (многоклеточный), распадающийся на бластоспо-ры. По Граму окрашивается положительно, при этом четко видны структурные элементы клетки.

Выделение чистой культуры. Возбудитель выде­лить трудно, так как исследуемый материал загрязнен бактериаль­ной микрофлорой. Поэтому перед посевом на питательные среды материал обрабатывают 0,5 %-м раствором фенола или формали­ном, а в питательные среды добавляют пенициллин и стрептоми­цин. Культивируют на глюкозном агаре Сабуро с рН 6,0...6,5 (для очистки от бактериального загрязнения рекомендуют применять среды с рН 2,5...3,0) при 37 °С. Рост колоний Candida отмечают через 2...4сут в виде средней величины гладких образований на поверхности среды, иногда с радиально расположенными лучами, сливкоподобного кремового цвета. Колонии врастают и в глубь среды. Встречаются колонии S- и R-формы. В жидких питатель­ных средах гриб растет в виде густого крошковатого осадка; обра­зует пристеночное кольцо.

Дифференциация. Для дифференциации видов гриба используют посев на среды с глюкозой, фруктозой, маннозой, мальтозой, галактозой, сахарозой, раффинозой, левулезой и инди­катором Андрэдэ. Ферментативная способность по отношению к перечисленным углеводам у разных видов неодинаковая.

Патогенность. Определяют при заражении лаборатор­ных животных 1 мл взвеси 48-часовой культуры гриба, выращен­ной на среде Сабуро, содержащей 300...500 тыс. клеток. Кроликов заражают внутривенно, белых мышей внутрибрюшинно в дозе 0,5.мл. Животные погибают на 2...7-е сутки в результате генерали­зованного процесса с образованием белых гранулем в почках, пе­чени, сердце и других органах.

Возбудитель эпизоотического лимфангита (африканского сапа) (Histoplasma farciminosus, Cryptococcus farciminostis). Болезнь цель-нокопытных, характеризуется хроническим течением, поражени­ем лимфатических узлов и лимфатических сосудов кожи подкож­ной клетчатки. Клинически отмечают плотные узелки в толще кожи с последующим их размягчением и развитием абсцессов. После вскрытия абсцессов образуются язвы с гнойным экссуда­том. Края язв неровные.

Микологический диагноз. Лимфангит ставят на основании обнаружения возбудителя в микроскопируемых препа­ратах-мазках из гнойного экссудата язв, который обычно служит патологическим материалом для отправки в лабораторию. В со­мнительных случаях производят посев из гноя на питательные среды. Возбудитель — криптококк, трудно культивируется. Био­пробу на лабораторных животных не проводят, так как они нечув­ствительны к данному виду гриба. Имеются единичные сообще­ния об экспериментальном воспроизведении заболевания у лоша­ди в виде местного процесса; у лабораторных животных при внут-рибрюшинном заражении криптококком отмечалось поражение регионарных лимфатических узлов.

У возбудителя хорошо выражен полиморфизм, то есть мор­фология его в культуре и в патологическом материале {от больного животного) различна. Наиболее характерная форма его в организме (исследуемом материале)—яйцевидная, эллипсоидная, форма дрожжевой клетки с хорошо выраженной двухконтурной оболочкой. Длина клетки З...5мкм, ширина 2...3мкм. Чаше мик-роскопируют нативный неокрашенный материал — влажный пре­парат из гноя, покрытый покровным стеклом, как придавленная капля. Естественный цвет цитоплазмы светло-сине-зеленый,.на­поминающий цвет морской воды. Внутри клетки просматривают 3...4 гранулы, зернышки: особенно они хорошо видны в препара­тах, окрашенных по Граму или по Романовскому — Гимза. В маз­ках из культуры формы дрожжевых клеток не встречаются; вне животного организма гриб развивается в мицелиальной форме. Мицелий септированный, ветвящийся, многоклеточный.

Получить первичную культуру криптококка из патологическо­го материала очень трудно. Но если удается ее вырастить (при рН 6,8...7,0), то при дальнейших пересевах сравнительно легко удается поддерживать культуры на МППА, глюкозо-глицерино-вом МПА (углеводы по 2...2,5 %). Можно использовать агар Сабу-ро. Рост колоний появляется через 1О...12сут. Сначала они мел­кие, в последующем увеличиваются и возвышаются над поверхно­стью среды, складчатые, кремового цвета, сухие. Окраска посте­пенно темнеет, становится коричневой.

Для аллергической диагностики лимфангита можно использо­вать гистоплазмин (Королевой) — фильтрат 3...4-месячной куль­туры криптококка. При сомнительном результате лабораторного исследования применяют дифференциальную диагностику лим­фангита и сапа, используя глазную пробу с маллеином и подкож­ную пробу с гистоплазмином. Проводят также серологическое ис­следование — РСК с сапным антигеном.

Классификация криптококка неясна: одни исследователи при­числяют его к бластомицетам, другие, на основании некоторых биологических данных,— к несовершенным грибам.

Микотоксикозы (кормовые отравления). Заболевания, вызывае­мые грибами, продуцирующими токсины. Основные возбудители: грибы Stachybotrys alternans, Dendrochium toxicum, Fusarium sporotrichioides, Ciaviceps paspali, Aspergiltus jlavus, Aspergillus fumigatus, Penkillium rubrum, Claviseps purpurea, Myrothecium vericarria. Некоторые виды грибов, вызывающие микотоксикозы, могут быть причиной микозов, как, например, A. fumigatus. К ми-котоксикозам наиболее восприимчивы лошади, свиньи, овцы, до­машняя птица. Менее восприимчив крупный рогатый скот. Ми-котоксикозами болеет и человек. Основной источник возникнове­ния заболевания — корма, пораженные любым из перечисленных выше видов грибов. Путь инфицирования — алиментарный.

Материал для микологического исследо­вания. Отбирают пробы корма (из складских помещений, ос­татков корма из кормушек, содержимого желудочно-кишечного тракта). В зависимости от вида корма отбор проб производят в со­ответствии с имеющимися ГОСТами. Общая масса корма для ди­агностического исследования составляет 0,5... 1 кг. Пробу корма помещают в тканевые мешочки, бумажные пакеты. При отборе проб учитывают локальное расположение отдельных видов грибов в пораженном корме. При диагностике микотоксикозов предвари­тельно исключают инфекционные заболевания животных бакте­риальной и вирусной этиологии, протекающие с аналогичной клинической картиной, наличие в кормах ядовитых растений и их семян, а также ядохимикатов (удобрения, пестициды).

Диагностика микотоксикозов включает предварительное орга-нолептическое исследование, микроскопию, выделение чистой культуры и биопробу. Для микроскопировання в каплю дистилли­рованной воды или физраствора на предметном стекле вносят со-скоб видимых поражений с поверхности корма (налет), накрыва­ют покровным стеклом, просматривают при средней степени уве­личения без иммерсии. При сильном поражении корма грибом пробу измельчают, помещают в колбочку, заливают физиологи­ческим раствором и взбалтывают в течение 20 мин. Каплю полу­ченной взвеси наносят на предметное стекло, покрывают покров­ным стеклом и микроскопируют.

Токсичность. Определяют при скармливании корма или вытяжки из него лабораторным животным. Биопробу можно ста­вить и на куриных эмбрионах. В ветеринарных лабораториях часто применяют кожную пробу — РКТ (реакция кожной токсичности) на кроликах (рис. 67). Для этого измельченную навеску пробы кор­ма (50 г) помешают в патрон из фильтровальной бумаги и экстраги­руют в аппарате Соксклета в течение 6 ч, используя серный эфир (ацетон или хлороформ). Экстрагировать можно и в стеклянной банке с притертой пробкой в течение 24 ч. Экстракт сливают, выпа­ривают в вытяжном шкафу на водяной бане при 45...50 °С. На све­жевыбритый участок кожи (4...5 см²) кролика наносят и втирают полученный экстракт. Через сутки, если какие-либо изменения от­сутствуют, втирание повторяют. В положительных случаях через 1...3 сут развивается гиперемия, отечность, вплоть до некроза. От­сутствие реакции на месте введения в течение 3 сут свидетельствует о нетоксичности корма (гриба). При постановке данной пробы сле­дует исключить кислотность корма.

Рис. 67. Дерматоиекротическая проба:

А — отрицательная; Б— положительная

При некоторых микотоксикозах с целью идентификации воз­будителя разработана реакция иммунофлуоресценции.

Для выделения чистой культуры (с учетом корма и предполагаемого вида гриба) смыв с поверхности пора­женного корма засевают на агар Сабуро, среду Чапека или на фильтровальную бумагу, пропитанную средой Ван-Итерсона в чашках Петри. Кроме того, можно произвести посев, непосред­ственно помещая пораженное зерно, соломины на плотные пита­тельные среды.

При определении степени поражения корма грубый корм из­мельчают и обрабатывают формалином в разведении 1: 300 в тече­ние 1 ч или денатурированным спиртом 6 мин, промывают 2...3 раза водопроводной водой и вносят на питательную среду. Культивиру­ют при 22.,.25 X, проверяя рост через 3, 5, 7 и 10 сут. С появлением роста колоний культуру микроскопируют, пересевают споры или мицелий, проверяют токсичность, используя для биопробы по 3...5 особей белых мышей, белых крыс, морских свинок, кроликов, цыплят, утят, гусят, голубей, кошек. Для определения токсичности корма допускается использовать также цыплят в возрасте 2...3 мес, а также молодых мышат, морских свинок, поросят в возрасте до 10 сут. В зависимости от степени токсичности гриба, дозы и спосо­ба введения животным клиническая и патологоанатомическая кар­тина заболевания проявляются неодинаково.

Определение афлатоксинов в корме, продуцируемых токсиген-ными грибами родов Aspergillus, Petiicillium и Rhizopus, производят на тонкослойных хроматографических пластинках по флуорес­ценции экстрактов в ультрафиолетовом свете (чувствительность 0,5 мкг в пробе корма массой 20 г).

При оценке корма, пораженного тем или иным токсигенным грибом, следует пользоваться специальными инструкциями и ме­тодическими указаниями.

Возбудитель стахиботриотоксшсоза (Stachybotrys alternans). За­болевание возникает при скармливании пораженного корма у ло­шадей, реже у крупного рогатого скота и свиней. К токсину гриба чувствителен и человек. Токсин в химическом отношении являет­ся стероидом. Клиническое проявление стахиботриотоксикоза у лошадей характеризуется поражением слизистой оболочки рото­вой полости и последующих отделов пищеварительного тракта, слюнотечением, образованием язвенных поражений. Возможны синдромы возбуждения или депрессии с летальным исходом. У крупного рогатого скота заболевание проявляется обильным слю­нотечением, нарушением функции пищеварительного тракта.

Возбудитель стахиботриотоксикоза — энергичный разрушитель целлюлозы, поэтому он хорошо растет на поверхности сена, соло­мы, образуя черный сажистый налет. Пораженный корм направ­ляют в лабораторию.

Морфология. У гриба септированный многоклеточный мицелий, на концах конидиеносцев заметны стеригмы (нечетное количество —5...7); сформированные конидиеспоры имеют есте­ственную коричневую окраску. Большое скопление конидий со­здает черный цвет.

Выделение чистой культуры. Производят посев пораженной пробы корма на среду Сабуро, среду Ван-Итерсона или обычный МПБ. Рост проявляется через 5...7 сут при 24...26 °С. Токсичность чистой культуры проверяют методом кожной пробы на кроликах или скармливанием культуры (выращенной на стери­лизованном овсе) белым мышам, морским свинкам, кроликам, птице. Заболевание может быть воспроизведено у лошадей, свиней, овец при скармливании им инфицированного корма или культуры.

Возбудитель дендродохиотоксикоза (Dendrodockium toxkuin). Вы­зывает нарушение функции центральной нервной системы у ло­шадей. Заболевание возникает вследствие поедания соломы или зерна, пораженного грибом, причем органолептически такой корм внешне выглядит доброкачественным. Характеризуется мол­ниеносным течением, летальным исходом.

D. toxicum имеет разветвленные септированные нити мицелия, конидии эллипсоидной формы с заостренными концами, темно-зеленого цвета, размером (2...4) х (6...8) мкм.

Культивирование. Производят на агаре Чапека. Через З...4сут рост гриба в виде плотного сплетения гиф мицелия, на котором проявляются зеленые, затем чернеющие спородохии.

Токсичность. Определяют методом кожной пробы на кроликах, а также скармливанием подсвинкам ячменя, специаль­но зараженного грибом. Культурой можно заразить кроликов и морских свинок.

Возбудитель фузарцотоксикоза. Грибы рода Fusarium чаще раз­виваются на злаковых растениях. При фузариотоксикозе наблю­дают дермонекротические поражения, нарушение сердечной де­ятельности, лейкопению. Токсин гриба фузариум в химическом отношении является липотоксолом, сапонин и озарином и их производным. Наиболее часто заболевание животных (включая птиц) вызывают грибы Fusartum sporotrichioidus, F. graminarum, F, monikformae.

Зарегистрированы случаи алиментарного фузариотоксикоза у человека. Корм, пораженный фузарием, внешне не всегда отли­чим.

При микроскопировании в раздавленной капле соскоба вырос­шей культуры обнаруживают макроконидии и микроконидии гри­ба. Макроконидии — серповидно изогнутые с 3...5 перегородками внутри; микроконидии — шаровидной, грушевидной формы, без перегородок или с 1...2 перегородками, возможны хламидоспоры.

Культивирование. Производят на среде Чапека. Не­полноценные зерна светло-серого или розового цвета вносят на питательный субстрат. Через 3...5 сут инкубирования при 22...25 °С появляется рост пышных желтоватых колоний.

Для получения чистой культуры выросшие колонии пересева­ют на сусло-агар или картофельный агар. Выросшую культуру микроскопируют. По форме конидий, величине и числу в них пе­регородок, степени пигментации устанавливают родовую принад­лежность гриба.

Токсинообразование. Разные виды гриба фузариум нуждаются в особых температурных условиях — от 8 до 26 °С. Ток­сичность пробы корма, пораженного фузарием, проверяют на кроликах кожной реакцией (РКТ) или подкожным введением бе­лым мышам. У последних наблюдаются парезы и летальный ис­ход.

Возбудитель кяавицепстоксикоза (Claviceps paspali). Поражает траву, сено. Развиваясь на поверхности кормов, формирует кони­дии, округлые желто-бурые склероции размером 1,5...3,5 мм. Вы­зывает алиментарный токсикоз у лошадей, реже — у крупного ро­гатого скота, овец, в единичных случаях — у свиней и гусей.

Возбудители аспергиллотоксикозов (Aspergillus fumigatus, A. flams, Л. niger, A. clavatus). Известны около 30 видов и разновидностей рода аспергиллус, обладающих токсическими свойствами. Различа­ют 14 токсических фракций токсинов грибов данного рода. Наибо­лее токсичны фракции В_ь В₂, которые обладают канцерогенным действием. Эти токсины названы афлатоксинами. Заболевание обычно возникает у птиц, а также у других видов домашних живот­ных вследствие алиментарного инфицирования пораженным кор­мом. Аспергиллотоксикоэом поражается и человек при поедании недоброкачественных продуктов как животного происхождения (мясо, молоко), так и растительного (мука, арахис и др.).

Схема микологического исследования проб корма. Микроскопирование препаратов из смывов с пораженных участков корма, посевы на специальные питательные среды с целью выделения чистой культуры с последующим ее микроскопированием и определением афлатоксинов.

Морфологические и к ультуральные свойства. Типичны для всех представителей рода Aspergillus. Отличия имеет A. flavus, колонии которого на среде Чапека учиты­вают через З...4сут. Окончательно вид определяют через 1О...12сут культивирования, когда появляются характерные органы плодо­ношения. Колонии вначале белого, затем зеленоватого или темно-бурого цвета. При микроскопировании отмечают септированный мицелий; гифы 2...3 мкм в диаметре. Конидиеносцы несептирова-ны, с головками (булавовидные утолщения), слабо-зеленого цве­та, размером до 350 мкм. На концах располагаются продолговатые стеригмы в один ряд. От стеригм отшнуровываются конидии-спо­ры также зеленого цвета.

Для выделения чистой культуры других видов грибов данного рода производят посев проб корма на следующие питательные среды: агар Сабуро, сусло-агар. Исследуют в том же порядке.

Токсичность. Определяют при подкожном введении бе­лым мышам культуральной суспензии гриба и по реакции кожной токсичности (РКТ).

Для определения афлатоксинов применяют методику тонко­слойной хроматографии. Помимо грибов рода Aspergillus микоток-сикоз может быть обусловлен также грибами рода Penicillium, Mucor (головчатая плесень) и др. Исследования проводят по обще­принятой схеме.

ПРИЛОЖЕНИЕ

Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 768 | Нарушение авторских прав