ХИМИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ МОЧИ
Реакция мочи. Определение реакции мочи имеет большое клиническое значение, так как при различных заболеваниях она показывает существенные изменения, которые рассматриваются как признак болезни.
Среди выбрасываемых почкой многочисленных соединений одни обладают кислыми, другие — щелочными свойствами. Источником образования кислот являются различные органические вещества (белки, лецитины), при окислении которых образуются серная, фосфорная, а также различные органические кислоты — мочевая, щавелевая, гиппуровая. Соли органических кислот и основания, которыми богата пища травоядных, сгорая в процессе обмена в углекислоту, являются главным источником щелочно реагирующих продуктов. В тех случаях, когда сумма щелочных эквивалентов меньше эквивалента кислот, реакция мочи кислая и наоборот.
У травоядных моча чаще щелочной, реже нейтральной реакции, у плотоядных она обычно кислая, у свиней — то щелочная, то кислая. Однако при интенсивном кормлении концентрированными кормами, а также при голодании моча получает явно кислую реакцию, а у плотоядных, при кормлении углеводами «с общего стола», она чаще нейтральная и даже становится щелочной.
Определение кислотности производится титрованием мочи по способу Фолина, который устанавливает так называемую титруемую кислотность, т. е. количество находящегося в моче водорода, замещаемого металлами. Техника определения крайне несложна. К 25 куб. см мочи прибавляют I—2 капли 1% раствора фенолфталеина и 15—20 г щавелевокислого калия в порошке, тщательно взбалтывают и титруют n/10 едким натром до слабого синевато-красного окрашивания. Кислотность, определяемую титрованием, перечисляют обычно на соляную кислоту и высчитывают по суточному количеству мочи.
Истинная, или активная (ионная), кислотность определяется по колориметрическому методу Зоренсена. У плотоядных рН мочи колеблется от 5 до 7, у лошади — около 7,8, а у крупного рогатого скота — около 8,7.
Среди патологических изменений заслуживает внимания кислая реакция мочи у лошади при катарах тонкого отдела кишечника. При этом вместе с реакцией изменяются и физические свойства мочи: она становится совершенно прозрачной, слабо окрашена, свободна от осадка и делается водянистой, теряя свои слизистые свойства.
Высокая щёлочность мочи нередко является результатом её разложения в мочевом пузыре -аммиачного брожения мочевины с образованием углекислого аммония. Моча, вследствие выпадения при этом фосфатов, делается мутной, при отстаивании быстро покрывается состоящей из углекальциевой соли плёнкой, издаёт аммиачный запах и опалесцирует.
Белок в моче. Моча должна быть прозрачной и свободной от содержащих белок посторонних примесей (истечение из влагалища, фекалии и т. д.).
Для просветления мочи пользуются различными приёмами — отстаиванием, фильтрованием, центрифугированием или адсорбцией.
При незначительном помутнении мочи достаточно отстаивания в течение часа.
Сильно мутную мочу крупного рогатого скота, свиней и плотоядных просветляют фильтрованием через бумажный фильтр. При аммиачном брожении, чтобы сделать прозрачной, мочу взбалтывают с животным углём, углекислым барием, инфузорной землёй. Однако при подобной обработке часть белка адсорбируется, что делает невозможным точное определение содержания белка, а при малых альбуминуриях препятствует даже его обнаружению. В таких случаях пользуются способом Шпета, по предложению которого при чтении результатов той или иной пробы обработанную соответствующим образом мочу сравнивают с нативной. Это позволяет установить обусловленное выпадением белковых тел помутнение даже при небольшом содержании белка.
Для просветления обычно сильно мутной и слизистой мочи лошади очень удобен способ, недавно предложенный Кулаковым. Определённое количество мочи наливают в узкий стеклянный цилиндр, закрывают плотной ватной пробкой и при помощи стеклянной палочки или специальных щипцов пробку медленно продавливают через слой мочи почти до дна цилиндра. Собирающаяся над пробкой совершенно прозрачная моча вполне пригодна для исследования. Из других способов применяют просветление мочи лошади центрифугированием. Подлежащую исследованию мочу отстаивают в течение 2—3 часов, верхний слой жидкости (20—30 куб. см) снимают при помощи пипетки и затем центрифугируют при 1000—15000 оборотов в течение 2—3 минут. После такой обработки моча становится обычно совершенно прозрачной, в иных случаях лишь слегка опалесцирует.
| Из различных белковых тел в моче домашних животных, встречаются: 1) белки сыворотки крови — альбумин и глобулин; 2) альбумозы; 3) глюкопротеины — муцин, муциноподобные вещества; 4) нуклеоальбумины; 5) из хромопротеинов — гемоглобин.
Практическое значение имеет лишь ткрытие сывороточных белков, альбумоз и гемоглобина. Среди многочисленных способов обнаружения белка в ветеринарной практике особо широкое применение нашли следующие. Проба с кипячением. 5 куб. см нейтральной или слабо кислой мочи нагревают до кипения. Щелочную мочу следует подкислить несколькими каплями 10% азотной или уксусной кислоты. Более или менее резко выраженное помутнение, а при большом содержании белка выпадение рыхлого, хлопьевидного осадка указывает на присутствие белка. При отрицательном результате к горячей ещё моче сейчас же приливают равный объём насыщенного раствора поваренной соли. В присутствии белка наступает моментальное характерное помутнение всей жидкости. В комбинации с реакцией на высаливание эта проба оказывается достаточно чувствительной и очень удобной для ветеринарной практики.
Проба Геллера. На 5 куб. см концентрированной азотной кислоты при помощи пипетки наслаивают 3—5 куб. см исследуемой мочи. В присутствии белка по линии соприкосновения слоев получается мутнобелое кольцо. При незначительных альбуминуриях кольцо образуется не сразу, а спустя 2—3 минуты после наслаивания. Проба Геллера даёт положительны результаты при содержании 0,033% белка. При оценке результатов не следует забывать, что, кроме сывороточных белков, белое кольцо в пробе Геллера дают альбумозы, бальзамические вещества, выделяющиеся с мочой, и нуклеоальбумины. В присутствии мочекислых солей и красящих веществ мочи получаются цветные кольца.
Проба Роча. К моче прибавляют по каплям 20% раствор сульфо-салициловой кислоты. В присутствии белка каждая капля оставляет облачко мути, быстро оседающей на дно пробирки. Проба Роча обладает большой чувствительностью (положительные результаты при содержании 0,015% белка). Особенно удобна она для исследования мочи лошади. Кроме белков, сульфосалициловая кислота даёт помутнение в присутствии альбумоз и бальзамических веществ.
Проба Танрета. К моче прибавляют по каплям реактив Танрета. В присутствии белка и альбумоз получается помутнение. В состав реактива Танрета входят 1,35 сулемы, 3,32 йодистого калия, 20,0 уксусной кислоты и 60,0 дестиллированной воды.
Самым простым способом количественного определения белка, получившим широкое распространение в ветеринарной практике, является с п о с об Э с б а х а. Определение производят в толстостенной, градуированной, с закруглённым или коническим дном пробирке, получившей название альбуминометра Эсбаха. В качестве реактива применяют жидкость следующего состава: 1,0 пикриновой кислоты, 2,0 лимонной кислоты, 100,0 дестиллированной воды.
Мочу высокого удельного веса (выше 1,010), а также с большим количеством белка, следует разбавить дестиллированной водой, щелочную мочу— шодкислить раствором виннокаменной кислоты.
Альбуминометр наполняют до метки М обработанной мочой, доливают до метки Р реактивом, закрывают затем резиновой пробочкой и осторожно, не встряхивая, переворачивают в течение 2—3 минут. В присутствии белка получается равномерное помутнение, а иногда рыхлый, хлопьевидный, взвешенный в жидкости осадок. Заряжённый альбуминометр помещают в подставку; дают жидкости отстояться в течение 12—18 часов и определяют количество белка по нанесённой на стенке шкале.
Каждое деление нижнего конца альбуминометра соответствует разведению белка 1: 1 000. Если проба ставилась с разведённой мочой, показания альбуминометра следует умножить на степень разведения.
Способ Робертса — Стольников а. В основе этого способа лежат наблюдения над предельной чувствительностью пробы Геллера: при содержании белка в количестве 0,033% кольцо в пробе Геллера появляется ровно через 3 минуты после наслаивания мочи. Задача исследования состоит в том, чтобы приготовить такое разведение мочи, которое давало бы кольцо;ровно через 3 минуты после наслаивания. С этой целью исследуемую мочу разводят водой до тех пор, пока не найдут нужную концентрацию.
Техника. Совершенно прозрачную кислую (по реакции) мочу разводят в 10 раз дестиллированной водой (1 куб. см мочи на 9 куб. см воды) и разливают по 2 куб. см в химические стаканчики. В каждом из стаканчиков готовят затем новое разведение, добавляя дестиллированной воды: в 1-й стакан — 4, во 2-й—13, в 3-й—28, в 4-й—43 и в 5-й — 58 куб. ем.
В 1-м стакане моча оказывается разведённой в 29, во 2-м — в 74, в 3-м— в 149, в 4-м—в 224, в 5-м — в 299 раз.
Приготовив разведения, устанавливают в штативе 10 пробирок и осторожно, не смачивая стенок, наливают в каждую из них по 2 куб. см разведённой азотной кислоты. Затем в первой пробирке наслаивают на кислоту 2 куб. см разведённой мочи, взятой из 1-го стаканчика, во второй — мочу из 2-го стаканчика и так далее и наблюдают с часами в руках за появлением кольца.
В той из пробирок, где кольцо появилось ровно через 3 минуты, содержание белка равно 0,033%. Помножив степень разведения на 0,033%, устанавливают процентное содержание белка в моче.
В тех случаях, когда белковое кольцо, например, в третьей пробирке, появляется раньше 3 минут, а в следующей за ней, четвёртой, позже—через 4 минуты, приходится готовить новое промежуточное разведение. Установив затем при помощи пробы Геллера то разведение, которое даёт кольцо ровно через 3 минуты, производят вычисление по указанному способу.
Очень удобна в практическом отношении следующая количественная проба: в специально градуированную до 15 куб. см центрифужную пробирку наливают 10 куб. см профильтрованной и подкисленной мочи и затем добавляют последовательно 1 куб. см уксусной кислоты, 1 куб. см воды и 3 куб. см 10% раствора жёлтой кровяной соли. После 3-минутного центрифугирования при 2 тысячах оборотов устанавливают объём осадка и определяют содержание белка из расчёта 0,5% белка на каждые 0,25. осадка.
В моче здоровых животных лишь при помощи очень чувствительных реактивов удаётся иногда открыть ничтожные следы белка, и поэтому мочу здоровых животных клинически считают свободной от белка. Однако под влиянием ряда моментов плотность почечного фильтра уменьшается, эпителий теряет способность задерживать белки крови, и они поступают в мочу в количествах, легко обнаруживаемых клинически. В зависимости от характера тех влияний, которые послужили причиной появления белка в моче, различают физиологическую и патологическую альбуминурию.
У домашних животных установлены следующие формы физиологической альбуминурии: 1) алиментарная альбуминурия, 2) альбуминурия новорождённых и 3) альбуминурия рожениц.
Патологическая альбуминурия наблюдается:
а) при острых воспалительных и дегенеративных заболеваниях почек; осо бенно высок процент белка при так называемых нефрозах; при хроническом заболевании почек альбуминурия выражена слабо, и во многих случаях белок вовсе отсутствует;
б) при заболеваниях сердца, связанных с застоями крови в венозной си стеме и понижением кровяного давления в артериях;
в) при заболеваниях крови: первичных и вторичных анемиях, лейкемии, паразитарных заболеваниях крови;
г) при всех тяжёлых лихорадочных и инфекционных заболеваниях, оче видно, вследствие понижения кровяного давления и последующей дегенерации почечного эпителия;
д) при тяжёлых заболеваниях кишечника, а именно: тяжёлых энтеритах и микозах кишечника, мембранозном воспалении кишок, кокцидиозном энтерите, паратуберкулёзе крупного рогатого скота, штутгартской болезни собак.
Кроме истинной ренальной альбуминурии, отмечают ещё ложную альбуминурию, или случайную, которая является следствием примеси белка в ниж-. них мочевых путях—мочевом пузыре или в уретре.
Как симптом, альбуминурия наблюдается, таким образом, при очень многих заболеваниях. При оценке её всегда следует иметь в виду физиологические формы, ложную альбуминурию и целый ряд различных заболеваний, нарушающих нормальную функцию почки по отношению к белку. Лучший критерий при анализе альбуминурии, помимо количественного определения белка и микроскопического исследования осадка, —тщательное клиническое исследование. как самой почки, так и органов, связанных с нею функционально.
Альбуминурия — не критерий болезни, а только один из признаков, в некоторых комбинациях крайне ценный, но далеко ещё не определяющий собой *сей сущности страдания.
Альбумозурия. Кроме сывороточных белков, в мочу в иных случаях переходят различные продукты расщепления белковых тел, объединённые в одну группу на основании ряда общих им реакций под названием альбумоз. Незначительную примесь альбумоз обнаруживают очень часто вместе с альбуминами: и глобулинами при многих самого различного происхождения альбуминуриях. Однако этому не придают серьёзного значения. Лишь в тех случаях, когда coflepj. жание альбумоз довольно значительно, когда их находят в моче, свободной от белка, присутствие их связывают с некоторыми процессами, протекающими в тканях и органах. Особенное значение имеет обнаружение альбумоз при скрытых процессах нагноения и некроза; так часто наблюдающихся у лошади при атипически протекающем мыте, гнойной пневмонии, гнойных плевритах и перитонитах, гнойных воспалениях суставов.
Муть в пробах Геллера и Роча, образующаяся на холоду и исчезающая при подогревании мочи, даёт основание подозревать присутствие альбумоз. При альбуминуриях мочу после обработки уксусной кислотой (удаление белка) подогревают до кипения и фильтруют. С фильтратом, свободным от белка, проделывают пробу Пиотровского.
Проба Пиотровского. К 5 куб. см мочи прибавляют 10 капель 10% едкой щёлочи и после взбалтывания осторожно при помощи пипетки наслаивают 2 куб. см раствора (1:1 000) медного купороса. Для альбумоз характерно красно-фиолетовое кольцо по линии соприкосновения слоев.
Пигменты крови в моче. Присутствие крови в моче считается чрезвычайно важным в диагностическом отношении признаком. В зависимости от того, в какой форме кровяной пигмент примешивается к моче, различают гематурию и гемоглобинурию. То и другое состояния, являющиеся во многих случаях решающими при установлении диагноза, связаны с определёнными группами страданий и заслуживают особого внимания.
Гематурия. При некоторых заболеваниях почек и мочеиспускательного аппарата, вследствие нарушения целости сосудистой стенки, в мочу поступают красные кровяные тел >ца. В то время как отдельные эритроциты в ней быстро разрушаются, главная их масса вполне сохраняет своё строение, форму и окраску и может быть легко обнаружена в мочевом осадке при микроскопическом исследовании.
Конечно, размеры кровоизлияния могут быть весьма различны. В одних, случаях гематурия ограничивается лишь переходом в мочу единичных эритроцитов, в других кровоизлияние может быть настолько обильно, что создаёт угрозу жизни животного.
Местом кровотечения чаще всего является почка, иногда почечная лоханка и нижние мочевые пути. Различные по степени гематурии часто наблюдают при заболеваниях геморрагического диатеза — сибирской язве, чуме свиней, паратифе телят и поросят, morbus maculosus, эпизоотической гемоглобинурии лошадей и т. д. В диагностическом отношении значительно важнее гематурии, являющиеся следствием спорадических заболеваний почки и мочевого пузыря. Небольшие кровоизлияния наблюдают при остром воспалении почек. Громадную потерю крови вызывают разрыв почки, геморрагический инфаркт почки и распадающиеся злокачественные новообразования. Кровотечения в почечную лоханку наблюдаются при пиэлитах, почечных камнях, а также животных паразитах в почечной лоханке. Моча при этом гнойного характера; кроме красных кровяных телец, в осадке много лейкоцитов и кристаллов солей. Кровоизлияния в полость мочевого пузыря наблюдаются при циститах. Они обычно очень незначительны, причём кровь обнаруживают только в последних порциях мочи. Обильными гематуриями характеризуются распадающиеся новообразования мочевого пузыря, поражения его стенок мочевыми камнями, разрывы сосудов мочевого пузыря и т. д. При уретральных кровоизлияниях кровь выделяется каплями через наружное отверстие уретры, а при мочеиспускании только первые порции, промывающие уретру, содержат кровь. Последняя порция мочи совершенно нормальна. Таким образом, гематурия, наблюдающаяся при очень многих заболеваниях, является лишь признаком, указывающим на кровоизлияние и его размеры. Прогноз и терапевтические мероприятия обусловливаются не только размером кровоизлияния, но, главным образом, его локализацией и причиной; основным моментом при оценке гематурии следует считать определение характера и места болезненного процесса. Указанные данные могут быть получены анализом добытых признаков болезни.
Г ем оглобинурия. При гемоглобинурии в мочу переходит красящее вещество распавшихся кровяных телец или мышечной ткани. Причиной массового разрушения в кровяном ложе эритроцитов служит действие каких-либо гемолитических ядов.
По происхождению различают три формы гемоглобинурии: симптоматическую, токсическую и пароксизмальную.
Симптоматическая гемоглобинурия является ценнейшим признаком ревматической и энзоотической гемоглобинемии лошадей, пироплазмоза и трипанозомоза. Иногда её наблюдают, кроме того, при септицемии, плевропневмонии и гангрене лёгких, инфлуэнце.
Токсическая гемоглобинурия может быть вызвана введением целого ряда биологических и фармакологических ядов, обладающих гемолитическим действием. Сильнейшими этого рода ядами являются: яд кобры, грибной яд сморчка, сыворотка другого вида животных. Фармакологические яды: бертолетова соль, фенолы и их производные, толлуилендиамин, мышьяковистый водород и др.
В основе пароксизмальной гемоглобинурии лежит, по всей вероятности, длительная латентная инфекция. Её наблюдали при инфекционной анемии, злокачественном мыте, гриппе. У дойных коров гемоглобинурию легко вызвать дачей холодной (ледяной) воды.
Среди многочисленных способов химического определения гемоглобина наиболее удобными для ветеринарной практики являются следующие.
Проба Геллера. К 5 куб. см мочи прибавляют 1/3 объёма 10% Раствора едкого калия, взбалтывают и кипятят. При нагревании выпадают фосфорнокислые соли кальция и магния, которые увлекают рыхлый кровяной пигмент, и в результате на дне пробирки получается красивый красный осадок.
Будучи сама по себе довольно чувствительной, проба Геллера неудобна для мочи лошади, бедной фосфатами. У всех других животных ею с успехом можно пользоваться.
Гваяковая проба (van-Dee п). В узенькой пробирке смешивают по 20 капель свежеприготовленного спиртового раствора гваяковой смолы (0,25: 50) и старого озонированного скипидара или 3% перекиси водорода и, слегка взболтав, наслаивают эту смесь на мочу. По линии соприкосновения слоев моментально получается белое смолистое кольцо, которое в присутствии крови постепенно делается тёмносиним.
Бенз иди новая проба Адлер-Цитрона. К 3 куб. см свежего 3% раствора перекиси водорода прибавляют 10—15 капель насыщенного раствора бензидина в ледяной уксусной кислоте. После взбалтывания наслаивают равное количество исследуемой мота. В присутствии крови появляется красивое зелёное кольцо по линии соприкосновения слоев.
Проба Колло (Collo). Реактивы: 1) 30% перекись водорода, 2) 2% раствор ледяной уксусной кислоты в 95° спирте, 3) щелочной раствор фенолфталеина. Для приготовления этого реактива 2 г фенолфталеина растворяют в 100 куб. см 20% раствора едкого кали, к которому при кипячении прибавляют Юг металлического цинка в порошке. Раствор кипятят до полного обесцвечивания, фильтруют и сохраняют в оранжевой склянке.
Для исследования берут 3 куб. см мочи, смешивают с равным объёмом уксуснокислого спирта, затем прибавляют 20—30 капель щелочного раствора фенолфталеина и 2—3 капли перекиси водорода. Моча, содержащая кровь, даёт при этом красивое малиновое окрашивание;
Углеводы в моче. Из различных видов Сахаров в моче домашних животных встречаются виноградный сахар, молочный сахар, пентоза и редко галактоза.
Виноградный сахар представляет собой нормальную составную часть крови, где содержание его колеблется в небольших пределах. В моче здоровых животных он встречается в настолько небольших количествах, что в клиническом отношении её считают свободной от глюкозы. Появление сахара в моче в виде легко обнаруживаемой примеси обычно связано с повышением процентного содержания его в крови, с гипергликемией, которая обычно является следствием тяжёлого нарушения углеводного обмена. Значительно реже причиной глюкозурии является уменьшение плотности почечного фильтра по отношению к глюкозе. В этих случаях, вследствие нарушения почечного порога, выделение сахара в мочу происходит и при нормальном содержании его в крови.
Симптоматическая глюкозурия является постоянным признаком сахарного диабета у лошади и собаки. Её далее рассматривают как один из самых постоянных и надёжных признаков бешенства травоядных. При бешенстве плотоядных глюкозурия наблюдается значительно реже, причём в паралитической стадии болезни сахар в моче чаще всего исчезает. Кроме того, небольшую глюкозурию наблюдают при нервной форме чумы собак, органических и функциональных заболеваниях головного мозга, болезнях печени, а также иногда при родильном парезе крупного рогатого скота.
Молочный сахар — постоянная составная часть мочи стельных коров. Обычно лактозурия исчезает к концу второй или третьей недели после отёла. В других случаях она держится дольше, до середины и даже в течение всего периода лактации. У молодняка лактоза появляется в моче при недостаточном усвоении её организмом, когда поступающий молочный сахар превышает ассимиляционную границу. Патологическая лактозурия наблюдается при всякого рода задержках отделения молока. При родильном парезе, воспалении вымени, закупорках сосков часть молочного сахара, выделяемого при обычных условиях молочной железой, выбрасывается почкой.
Пентозы иногда обнаруживаются в моче травоядных при обильном кормлении. Поступая в мочу, углеводы до некоторой степени изменяют её физические свойства: удельный вес, несмотря на бледную окраску, обычно повышен, реакция кислая, моча бедна осадком и при стоянии, вследствие размножения микроорганизмов, мутнеет и выделяет пузырьки угольной кислоты.
Для открытия виноградного сахара в моче чаще всего пользуются пробами, основанными на его редуцирующих свойствах. Однако способностью раскислять окисные соединения обладают и другие составные части мочи — индикан, мочевая кислота, мочевые пигменты, глюкуроновая кислота и ряд веществ, переходящих в мочу при заболеваниях, как-то: белок, альбумозы, слизь, жёлчные пигменты, пигменты крови, пентоза, лактоза.
Так, по Климмеру, восстанавливающие свойства нормальной мочи собак соответствуют содержанию 0,05—0,4% глюкозы, у свиней—0,03% глюкозы. В тех случаях, когда редукционные пробы дают положительные результаты, приходится, во избежание ошибок, обязательно ставить и пробу на брожение.
Проба Бенедикта. К 3—5 куб. см реактива Бенедикта прибавляют 5—10 капель мочи, взбалтывают и кипятят в течение 2 минут. В присутствии сахара получается зелёный, жёлтый или красный осадок.
Состав реактива Бенедикта
Медный купорос................ 17,3
Лимоннокислый натрий. 173,0
Углекислый. 100,0
Дестиллированная вода до 1 л
Проба Гейне а. В узенькую пробирку наливают 3 куб. см реактива и, осторожно подогрев его до кипения, пипеткой наслаивают на горячий реактив 1 куб. см предварительно подщелочённой и профильтрованной мочи. По линии соприкосновения слоев двух жидкостей в присутствии сахара сейчас же появляется золотистое кольцо, которое постепенно делается шире и резче, и через 2—3 минуты вся жидкость желтеет и делается мутной. Характерным для глюкозы считают полное обесцвечивание помутневшего реактива.
Состав реактива. 2,5 медного купороса растворяют при нагревании в 250 куб. см смеси, приготовленной из равных количеств дестиллирован-ной воды и чистого глицерина. К полученной жидкости прибавляют 100 куб. см 10% раствора едкого кали и доливают водой до объёма в 500 куб. см.
Бродильная проба является наиболее надёжным способом определения виноградного сахара, позволяющим одновременно устанавливать и количество его в растворе. Из разнообразных приборов для проведения бродильной пробы наиболее удобными оказываются сахарометры Лассар-Кона. Это V-образные трубки на стеклянной подставке с колбообразным расширением на одном конце. Другой конец снабжён притёртой стеклянной пробкой с боковым отверстием, которому соответствует такое же отйерстие в стенке цилиндра. На боковой поверхности имеются две шкалы: цифры налево указывают содержание сахара в процентах, направо — объём образовавшейся в результате брожения угольной кислоты.
Техника пробы. В небольшой колбочке отмеривают 25 куб. см мочи, добавляют кусочек дрожжей величиной с горошину и тщательно размешивают стеклянной палочкой. Мутную жидкость наливают в сахарометр и затем конец его закрывают стеклянной пробкой так, чтобы отверстия их совпадали. Нагнув немного сахарометр, через отверстие выгоняют оставшийся
в верхнем конце прибора воздух и затем поворотом пробки разобщают отверстия. Градуированная часть прибора при этом оказывается сплошь занятой мочёй. Заряженный таким образом сахарометр помещают на сутки в термостат и затем определяют количество виноградного сахара в процентах по шкале. Перед постановкой пробы нужно определить активность дрожжей и убедиться в том, что они не содержат виноградного сахара.
| Ацетоновые тела (ацетон и ацетоуксусная кислота), по Кизелю, нормальная составная часть мочи здоровых животных; так, в моче лошади содержание их колеблется в пределах от 0,38 до 3,86 на литр, в моче коровы 0,2—2,4. При ацетонурии количество ацетоновых тел значительно повышается. Так, Ионк находил при ацетонемии крупного рогатого скота до 12,0 ацетона на литр мочи. В крови крупного рогатого скота при родильном парезе содержание ацетона поднималось до 69 мг на 100 куб. см сыворотки. Резкие ацетонурии наблюдают в тяжёлых случаях сахарного диабета. В значительно меньшем количестве ацетоновые тела обнаруживают при атониях преджелудков у коров и при продолжительных желудочно-кишечных расстройствах у всех видов домашних животных.
Проба Легаля на ацетон. К 5 куб. см мочи прибавляют 3—5 капель 10% раствора едкой щёлочи и (после взбалтывания) 5 капель свежеприготовленного насыщенного раствора нитропруссида натрия. В присутствии ацетона окрашенная в рубиново-красный цвет жидкость при перекислении несколькими каплями ледяной уксусной кислоты даёт пурпурно-красное или фиолетовое окрашивание. Таким же образом обработанная нормальная моча окрашивается в желтоватый цвет.
Проба Либена на ацетон. К 5 куб. см дестил-Лята мочи прибавляют 3—4 капли 10% едкой щёлочи и (после взбалтывания) несколько капель (4—6) луголевского раствора. Моча с примесью ацетона мутнеет и даёт характерный запах йодоформа.
Проба Герхардта на ацетоуксусную кислоту. К 10 куб. см подкисленной мочи добавляют 10—15 капель 10% раствора хлорного железа и, отфильтровав образовавшийся осадок, снова обрабатывают несколькими каплями того же реактива. В присутствии ацетоуксусной кислоты получается бордово-красное окрашивание, исчезающее после 2— 3-минутного кипячения.
Индикан. Индикан является нормальной составной частью мочи человека и домашних животных. Особенно много его у лошади. Исходным продуктом образования индикана служит триптофан, который, теряя под действием гнилостных бактерий кишечника свою боковую группу, превращается в индол. Последний, окисляясь в индоксил, связывается с серной или глюкуроновой кислотой. Калийная соль эфирно-серной кислоты индоксила носит название индикана.
Резкое увеличение индикана в моче наблюдают при заболеваниях, связанных с застоем и разложением кишечного содержимого.
Кишечная индиканурия — постоянный признак при завалах в слепой кишке, различных формах кишечной непроходимости, хронических катарах кишечника. Тканевая индиканурия наблюдается при острых и некоторых хронических процессах, характеризующихся резким аутолитическим распадом тканей, например, при гангрене лёгкого, метритах, при инфекционной анемии, некоторых гельминтозах кишечника.
Уменьшение индикана в моче обращает на себя внимание при заболеваниях, связанных с поносами; в диагностическом отношении оно особенно важно при инфекционном энцефаломиэлите лошадей, когда, несмотря на ослабление перистальтики и несомненные завалы кишечника, содержание индикана сведено к минимуму.
Проба Обермайера. К 10 куб. см мочи прибавляют 2—3 куб. см свинцового сахара и после взбалтывания фильтруют. 5 куб. см совершенно прозрачного фильтрата смешивают с равным количеством реактива Обермайера (раствор хлорного железа в крепкой соляной кислоте в отношении 0,2 на 100 куб. см), прибавляют 3—5 куб. см хлороформа и, закрыв пробирку пробкой, осторожно извлекают образовавшееся индиго. Смотря по количеству индикана, хлороформ окрашивается в более или менее резкий синий цвет.
Жёлчные пигменты. Билирубин, являющийся нормальной составной частью крови, переходит в мочу лишь при значительно повышенном содержании в крови, при желтухах различного происхождения. В то время как у Собак присутствие жёлчи в моче легко удаётся доказать, у лошади при обычных застойных желтухах с повышением билирубина в крови до 1,8—2 мг, несмотря на хорошо заметное желтушное окрашивание конъюнктивы, моча тем не менее оказывается свободной от билирубина (van-den-Bergh). Обнаружение жёлчных пигментов в моче лошади указывает всегда на сильную желтуху. Наиболее резкие степени её, когда содержание билирубина в сыворотке крови доходит до 5—8—12 мг, по van-den-Berghy, и выше, особенно характерны для инфекционного энцефаломиэлита. Кроме того, резкие желтухи наблюдают при отравлении SO2, morbus maculosus, крупозной пневмонии, инфлуэнце, мыте и других заболеваниях. Ценность явлений желтухи в диагностике инфекционного энцефаломиэлита повышается тем, что желтуха оказывается одним из наиболее ранних симптомов этой инфекции, появляясь ещё до развития комплекса нервных явлений.
Наиболее простойчИ удобной для обнаружения пигментов жёлчи в лошадиной моче является следующая проба. Мочу, разбавленную пополам дестиллированной водой, обрабатывают равным количеством 10% раствора хлористого бария и после взбалтывания центрифугируют. Слив прозрачный центрифугат, растворяют осадок в дымящейся азотной кислоте. Появление жёлтого или зелёного окрашивания характерно для билирубина.
Проба Накаяма. К 5 куб. см мочи прибавляют равное количество 10% раствора хлористого бария. Помутневшую, вследствие выпадения нерастворимых солей бария, мочу центрифугируют. Слив жидкость, размазывают осадок стеклянной палочкой по дну фарфоровой чашечки, осторожно высушивают на лёгком пламени и затем на неостывшую ещё чашечку опускают 1 каплю реактива Накаяма. Зелёное расходящееся кольцо характерно для жёлчных пигментов. Другие оттенки — бурый, жёлто-бурый, жёлтый —не доказательны.
Состав реактива: 99 куб. см 95% спирта, 1 куб. см крепкой азотной кислоты и 0,4 хлорного железа.
Проба Обермайер — Поппера. Разведённую дестиллирован-ной водой мочу переслаивают реактивом. В присутствии жёлчных пигментов появляется синее кольцо, переходящее в зелёное.
Состав реактива: 3,5 куб. см 10% йодной настойки, 12 йодистого калия, 75 хлористого натрия, 125 куб. см 95% спирта и 625 куб. см дестиллированной воды.
Красящие вещества мочи. Из мочевых пигментов, сообщающих нормальной моче свойственную ей окраску, диагностическое значение придают лишь присутствию уробилина, который образуется в кишечнике под действием микроорганизмов, путём восстановления пигментов жёлчи. Большая часть только что образовавшегося уробилина выделяется с фекалиями, и лишь незначительное количество его, всасываясь стенкой кишки, поступает в печень, откуда часть перебрасывается кровью в почки.
При нормальных условиях почка выделяет лишь хромоген уробилина —уробилиноген, из которого при стоянии мочи под действием солнечного света образуется уробилин. Постоявшая на свету моча травоядных содержит довольно много этого красящего вещества. Особенно много его в моче лошади. Причиной уробилинурии является усиленное образование уробилина в кишечнике; это наблюдается при гемолитических желтухах и нарушении функции печени.
Проба Флоренс а. 8—10 куб. см свежевыпущенной мочи подкисляют 8—10 каплями серной кислоты, сильно взбалтывают и доливают 5—8 куб. см эфира. Закрыв плотно резиновой пробкой пробирку, переворачивают её в течение 3—5 минут. Осторожно отсасывают слегка пожелтевший слой эфира и наслаивают его на концентрированную соляную кислоту. По линии соприкосновения слоев жидкостей в присутствии уробилина получается резко ограниченное розовое или красно-коричневое кольцо. С постоявшей несколько часов мочой лошади проба Флоренса даёт рэзко положительный результат.
Хлориды в моче. Большая часть поступающих в организм хлоридов выделяется почками вместе с мочой в виде хлористого натрия, и лишь незначительное их количество выбрасывается с faeces. В зависимости от содержания хлористого натрия в корме, в воде и целого ряда других условий, процентное содержание этой соли в моче колеблется в значительных пределах. По Френеру, лошадь выделяет от 25 до 35 г хлористого натрия в течение суток. У собаки выделяются более значительные количества NaCl—от 0,25 до 5 г в сутки. Почки, таким образом, являются главным выделителем хлора. Их способность выбрасывать хлор настолько велика, что в течение очень короткого времени после введения поваренной соли с пищей кровь освобождается от излишка хлоридов. Тем не менее, нередки резкие нарушения в этом отношении, приводящие к задержке этой соли в организме.
Подобного рода состояния являются постоянным спутником всех лихорадочных процессов. Одновременно с повышением температуры, содержание хлоридов в моче резко падает. Начальная и средняя фазы лихорадки всегда сопровождаются, таким образом, резкой задержкой хлора в организме. С понижением температуры функция почки вновь восстанавливается, и содержание хлора в моче увеличивается.
Ещё более значительные расстройства в выделении хлора наблюдают при нефрозах. Поражение эпителия прямых и извитых канальцев нарушает его выделительную функцию и приводит к задержке NaCI в крови. Кроме того, понижение процентного содержания хлора в моче наблюдают при плевритах, перитонитах и всех вообще страданиях, связанных с развитием воспалительных отёков и скоплением в полостях экссудатов. Задержка хлора является, таким образом, неблагоприятным в прогностическом отношении признаком.
Резкое повышение процентного содержания хлора в моче наблюдают при всех лихорадочных заболеваниях в фазе падения температуры, при экссуда-тивных плевритах и подобных им страданиях в стадии рассасывания экссудата.
Одним из лучших способов количественного определения поваренной соли является способ Фольгардта, основанный на обратном титровании. Весь хлористый натрий мочи осаждается избытком азотнокислого серебра в виде нерастворимого хлористого сергбра. Часть азотнокислого серебра, не вступившую в реакцию с хлоридами мочи, определяют титрованием раствором роданистого аммония. Введённая в качестве индикатора сернокислая окись железа даёт с небольшим избытком роданистого аммония красное окрашивание, вследствие образования роданистоводородной соли окиси железа. Интенсивная красная окраска определяет конец реакции.
Реактивы. 1. Титрованный п/ 10 раствор азотнокислого серебра (16,994 г на 1 л дистиллированной воды).
2. Титрованный п/10 раствор роданистого аммония. На обычных аптечных весах отвешивают 8 г этой соли и растворяют в 900 куб. см дестиллированной воды. Для установления титра отмеривают бюреткой 20 куб. см титрованного раствора азотнокислого серебра, приливают 5 куб. см раствора железо-аммиачных квасцов и, подкислив азотной кислотой до обесцвечивания, титруют из бюретки приготовленным раствором роданистого аммония до тех пор, пока вся жидкость не даст слабого красноватого окрашивания. На осаждение 20 куб. см титрованного раствора азотнокислого серебра должно быть израсходовано ровно 20 куб. см роданистого аммония. Если конечная реакция получилась раньше, раствор роданистого аммония доливают водой до нужной концентрации и окончательно проверяют повторным титрованием. 3. Насыщенный раствор железо-аммиачных квасцов. 4. Разведённая азотная кислота (удельный вес 1,20).
Техника. Отмеривают пипеткой 10 куб. см исследуемой мочи в мерную колбу ёмкостью 100 куб. см, подкисляют 2—5 каплями азотной кислоты и прибавляют 2 куб. см раствора железо-аммиачных квасцов.
Моча лошади при этой обработке обычно окрашивается в красно-бурый цвет. Для обесцвечивания жидкости приливают несколько капель (5—10) 10% раствора марганцевокислого калия. Если окрашивание не исчезает, приливают ещё несколько капель перманганата калия и подогревают на водяной бане до тех пор, пока окраска не потеряет своей интенсивности.
Обесцветив жидкость, приливают к ней 15—20 куб. см титрованного раствора азотнокислого серебра и, осадив таким образом весь хлор мочи в виде нерастворимого хлористого серебра, доливают дестиллированной водой до метки. Закрыв колбу пробкой, несколько раз взбалтывают жидкость и после 5-минутного отстаивания фильтруют через сухой фильтр.
Если фильтрат не совсем прозрачный, его вторично пропускают через тот же фильтр до тех пор, пока жидкость не сделается совершенно прозрачной.
Затем отмеривают 50 куб. см фильтрата и титруют роданистым аммонием до тех пор, пока жидкость не получит лёгкого красноватого окрашивания. Появление красноватого окрашивания указывает на полное осаждение серебра, образование роданистого железа и служит концом реакции.
Вычисление. Положим, на 50 куб. см фильтрата до появления окрашивания было израсходовано 6 куб. см титрованного, раствора роданистого аммония. На весь фильтрат пришлось бы израсходовать ровно 12 куб. см. Так как 1 куб. см роданистого аммония соответствует 1 куб. см титрованного раствора азотнокислого серебра, очевидно, из 20 куб. см прибавленного к моче раствора серебра только 12 куб. см вступили в реакцию с роданистым аммонием, остальное же количество раствора серебра пошло на связывание хлористого натрия. Определение процентного содержания хлористого натрия производят по формуле:
Способ Фольгардта даёт хорошие результаты при исследовании мочи лошади.
При определении хлора в моче собак этим способом Меринг (Mering), во избежание выпадения веществ, дающих осадок с азотнокислым серебром, рекомендует следующую предварительную обработку: 20 куб. см мочи разводят 60 куб. см дестиллированной воды, подкисляют, прибавляют 5—8 г свободной от хлора цинковой пыли, 15 куб. см разведённой серной кислоты (1:5) и нагревают в течение часа на водяной бане. Горячую жидкость фильтруют, осадок повторно промывают кипящей водой и, подкислив фильтрат соляной кислотой, определяют, таким образом, в обработанной моче содержание поваренной соли по способу Фольгардта.
Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 1070 | Нарушение авторских прав
|