Практическое применение ИФА
ИФА нашел широкое применение в различных областях медицины и биологии. ИФА применяется для:
· диагностики инфекционных заболеваний (выявление специфических антигенов и/или антител к ним);
· выявления и определения уровня гормонов и лекарственных препаратов в биологических образцах;
· определения уровня антител против конкретного антигена (IgA, M, G, в том числе изотипов), общего и специфического IgE;
· выявления онкомаркеров;
· определения белков сыворотки крови и др. биологических жидкостей (фибронектина, СРБ и др.);
· определения цитокинов в биологических жидкостях и т.д..
Рис. 23. Иммуноблоттинг (Атлас-руководство для студентов и врачей под ред. акад. РАМН Воробьева А.А., проф. Бычкова А.С.)
Иммуноблоттинг — качественный метод, позволяющий выявлять антигены и антитела в исследуемой пробе. Этот метод широко применяется для подтверждения результатов твердофазного иммуноферментного анализа при диагностике ВИЧ-инфекции.
Антигены возбудителя разделяют с помощью электрофореза в полиакриламидном геле, затем переносят их (блоттинг – blot – пятно) из геля на активированную бумагу (1) или нитроцеллюлозную мембрану и проявляют с помощью ИФА. В настоящее время выпускаются готовые наборы для проведения иммуноблоттинга. Разработаны специальные полоски с «блоттами» антигенов, на которые наносят сыворотку больного (2). После инкубации полоски отмывают от несвязавшихся антител больного и наносят сыворотку против иммуноглобулинов человека, меченную ферментом (3). Образовавшийся комплекс (антиген + антитело больного + антитело против иммуног лобулинов человека) выделяют добавлением хромогенного субстрата (4), изменяющего окраску под действием фермента.
Рис. 24. Реакция иммунофлюоресценции (Атлас-руководство для студентов и врачей под ред. акад. РАМН Воробьева А.А., проф. Бычкова А.С.).
Дата добавления: 2014-12-12 | Просмотры: 988 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 |
|