 |
|
АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология |
Айала Ф., Кайгер Дж. Современная генетика: В 3-х т. Т. 2. Пер. с англ.: – М.: Мир, 1988. – 368 с.15. Регуляция экспрессии генов у прокариот 185 на р-зависимых терминаторах tL1, tR1 и tR'. In vitro, в отсутствие фактора ρ, очищенная РНК-полимераза инициирует синтез тех же самых транскриптов на очищенной ДНК фага λ, причем поток транскрипции преодолевает терминаторы. Это наблюдение привело к представлению о существовании специфических факторов терминации. В результате был очищен так называемый р-белок, индуцирующий терминацию транскрипции in vitro на упомянутых терминаторах (не все терминаторы E.coli являются р-зависимыми). Транскрипция на стадии I приводит к появлению мРНК для двух белков N и Сго (названия белков набраны прямым шрифтом, а названия генов-курсивом). Функционируя как фактор антитерминации, белок N создает возможность экспрессии генов второй стадии. В присутствии белка N поток транскрипции, инициированный на pl и pr, преодолевает р-зависимые терминаторы tL1 и tR1. В результате появляется мРНК от гена cIII до гена int в левом опероне и от гена cII до Q в правом опероне. Транскрипция правого оперона прекращается на терминаторе tR', а транскрипция левого оперона прекращается в области b2 (рис. 15.13, светло-серые стрелки). Мутанты, дефектные по функции гена Ν, гибнут из-за очень сильного снижения уровня транскрипции на стадии II, в результате которого гены, существенные как для лизиса, так и для лизогенизации, не экспрессируются. Белок N служит позитивным белком-регулятором, поскольку благодаря его действию происходит активация второй стадии экспрессии фага λ. В то же время принцип его действия совершенно не похож на принцип действия рассмотренного в предыдущем разделе другого позитивного регулятора-САР-белка. Белок Ν, по сути дела, не активирует транскрипцию, а способствует ее продолжению, подавляя влияние терминирующих последовательностей. При этом белок N специфически узнает не промотор и не сам терминатор, а определенный участок последовательности, расположенный между этими регуляторными элементами. При изучении мутантов, неспособных к экспрессии генов левого оперона, расположенных за терминаторным участком tL1, и в то же время способных нормально расти и образовывать бляшки на чувствительном бактериальном газоне, был обнаружен сайт, расположенный между PL и N и необходимый для действия белка N. Этот участок (рис. 15.14, A) обозначают символом nutL (от англ. N utilization). Определение первичной структуры этого участка показало, что в него входит последовательность из 15 п.н., которой свойственна симметрия второго порядка. Анализ последовательности ДНК между PR и tR1 показал, что между геном cro и tR1 находится практически идентичный участок, обозначенный пutR [рис. 15.14, Б]. Принято считать, что белок N узнает участки nutL и nutR; однако, происходит ли это узнавание при взаимодействии с ДНК или с петлей, образующейся в соответствующем участке РНК-транскрипта, пока остается неизвестным. В соответствии с современными представлениями о механизмах терминации и антитерминации транскрипции определенное предпочтение можно отдать модели, согласно которой происходит узнавание петли в структуре РНК-транскрипта прежде, чем РНК-полимераза достигает терминаторного участка. Независимо от конкретных деталей механизма действия N-белка ясно, что он влияет на РНК-полимеразу таким образом, что та после про- Дата добавления: 2015-12-16 | Просмотры: 464 | Нарушение авторских прав |