Подсчет количества тромбоцитов в мазках крови (метод Фонио)

Принцип метода. Для постановки диагноза тромбоцитопатии кроме подсчета количества тромбоцитов необходимо изучить их размеры, форму и структуру. Последняя наиболее хорошо выявляется после паноптической окраски тромбоцитов по Нохту (смесью азура и эозина).

Реактивы. Абсолютный метиловый спирт, который получают добавлением в сосуд с продажным метиловым спиртом просушенного до постоянного веса химически чистого медного купороса. Сосуд герметически закупоривается. Перед употреблением готовят смесь красок из 10 частей раствора азура, 5 частей раствора эозина и 10 частей водопроводной воды. Азур II и эозин используются в разведении 1:1000.

Ход определения. Мазки готовятся без стабилизатора (ЭДТА или сернокислой магнезии). Их фиксируют 15 минут в абсолютном метиловом спирте и красят 45 минут смесью красок.

Оценка результатов. Если в мазке некоторые тромбоциты образуют скопления по 5-6 пластинок, считается, что это хорошая агрегация.

Тромбоциты здорового человека обычно округлые ли овальные. 90 - 92% из них являются нормотромбоцитами (их диаметр в 3 - 3,5 раза меньше диаметра эритроцитов здорового человека и составляет 1,5 - 3 мкм). 8 - 12% тромбоцитов относятся к микропластинкам (диаметр 1 - 1,5 мкм), макропластинкам (диаметр 3,5 - 5 мкм) и мегатромбоцитам (6 - 10 мкм) (рис.12).

Структура тромбоцитов отражает степень их зрелости. Различают юные, зрелые и старые кровяные пластинки. Не всегда встречаются в крови здорового человека тромбоциты раздражения и дегенеративные пластинки.

Юные формы тромбоцитов отличаются от зрелых несколько большей величиной (2 - 5 мкм), нерезкими контурами, выраженной базофилией гиаломера и нежной необильной азурофильной зернистостью.

Зрелые формы - наиболее типичные - округлые или овальные, с ровными контурами, диаметром 2 - 4 мкм, в них четко разделяются грануломер с хорошо выраженной красно-фиолетовой зернистостью и голубовато-розовый (сиреневый) гиаломер.

Рисунок 12. Семь малых, два больших и два мегатромбоцита в мазке периферической крови.

У старых форм тромбоцитов насыщенно-фиолетовый грануломер на всю центральную часть кровяной пластинки и светло-розовый узкий гиаломер по периферии. Пластинки как бы сморщены, диаметр составляет 0,5 - 2,5 мкм.

Тромбоцитам раздражения свойственны большой полиморфизм и значительная величина. Встречаются гигантские колбасовидные, хвостатые и т.п. пластинки диаметром 7 - 9 и даже

12 мкм (рис. 13 А, Б).

А Б

Рисунок 13. Гигантские аномальные тромбоциты в мазках периферической крови.

Дегенеративные формы не содержат зернистости (гиалиновые, голубые пластинки) или имеют темно-фиолетовую зернистость в виде комков или мелких осколков (пылинок), встречаются и вакуолизированные пластинки.

Практическое значение. Тромбоцитарная формула здоровых людей: юные 0 - 0,8%; зрелые 90 - 95%; старые 2 - 5,5%; дегенеративные - 0 - 0,2%; раздражения 0,8 - 2,5%; вакуолизированные - 0%.

Повышение числа юных форм (“омоложение” или сдвиг тромбоцитарной формулы влево) отмечается при повышении регенерации костного мозга (гемолитическом кризе, посттрансфузионных осложнениях, лейкозе, после кровопотери, спленэктомии и др.).

Большое число старых форм (“постарение” или сдвиг тромбоцитарной формулы вправо) чаще всего обнаруживается у больных раком. Формы раздражения присущи тромбоцитопеническим состояниям. Количество старых и дегенеративных форм увеличивается у больных наследственными и симптоматическими тромбастениями, циррозом печени, при отравлении бензолом.

При миелопролиферативных заболеваниях (хроническом миелолейкозе, тромбоцитемии, полицитемии и др.) в периферической крови наряду с формами раздражения встречаются “тромбобласты” - фрагменты ядер мегакариоцитов, которые окружены цитоплазмой с отшнуровывающимися пластинками.

Мегатромбоциты характерны для синдромов Бернара-Сулье, Мея-Хеглина, а микротромбоциты - для синдрома Вискотта-Олдрича.

2.4. Лабораторная оценка функциональной полноценности тромбоцитов (диагностика тромбоцитопатий).

Тромбоцитопатии - это нарушения гемостаза, обусловленные качественной неполноценностью и дисфункцией кровяных пластинок. Это группа распространенных заболеваний и синдромов, с которой связаны большинство геморрагий петехиально-синячкового типа, меноррагий неясного генеза, десневых и носовых кровотечений, продолжительные кровотечения после экстракции зубов и порезов. Такая кровоточивость при нередко неизмененном или незначительно сниженном содержании тромбоцитов и малоизмененной коагулограмме всегда должна наводить на мысль о качественной неполноценности кровяных пластинок.

Среди наследственных геморрагических диатезов регистрируемые тромбоцитопатии занимают по частоте первое место - около 40% от общего числа больных. При активном выявлении легких форм этот показатель увеличивается до 60 - 65%.

Помимо наследственных форм, в клинической практике часто встречаются всевозможные вторичные дисфункции тромбоцитов, обусловленные гемобластозами, болезнями печени и почек, токсическими и лекарственными воздействиями, ДВС-синдромом и другими причинами.

Распознавание и дифференцировка тромбоцитопатий основываются на комплексном исследовании микроциркуляторного гемостаза, адгезивно-агрегационной и коагуляционной функции кровяных пластинок, оценке содержания в них и высвобождения тромбоцитарных факторов и гранул. Материалом для исследования служит цельная венозная кровь или богатая тромбоцитами плазма.

Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 4061 | Нарушение авторских прав