АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Определение фактора 3 тромбоцитов ( по Y . Rabiner , O. Hrodek, 1968; З.С. Баркагану, 1975)

Прочитайте:
  1. A. для оценки стоимости объекта недвижимости необходимо определить вклад каждого фактора и его важнейших элементов в формирование полезности и стоимости объекта
  2. B. нормальное количество тромбоцитов
  3. C. тромбоцитов
  4. E. Увеличение кратности развития клеток опухоли при увеличении дозы канцерогенного фактора
  5. I. Определение верхушечного толчка.
  6. I.1. Определение понятия
  7. II) Энзимологическое определение количества метаболитов.
  8. IV.1. Дыхательная недостаточность. Определение понятия
  9. А) Определение силы неизвестного анатоксина по известной антитоксической сыворотке
  10. А. Определение стресса

Принцип: Активность фактора 3 тромбоцитов (Ф - 3) определяется по разнице каолинового времени рекальцификации плазмы, богатой и бедной тромбоцитами. Полуколичественная оценка активности проводится по стандартной кривой разведении плазмы здорового с 50 000, 25 000 и 12 500 тромбоцитами в 1 мкл.

Реагенты: 1. 3,8% раствор цитрата натрия; 2. 0,025 м раствор хлорида кальция; 3. Суспензия легкого каолина 5 мг/мл 4. Имидазоловый буфер 0,2 М или буфер Михаэлиса, рН 7,3.

Ход определения: В пробирки с 0,1 мл богатой и бедной тромбоцитами плазмы добавляют суспензию каолина или целита (0,1 мл) и, постоянно помешивая, ставят на 2 мин на водяную баню (37о С). Точно через 2 мин в смесь добавляют 0,1 мл раствора хлорида кальция, немедленно включают секундомер и определяют время свертывания. Разница во времени свертывания богатой и бедной тромбоцитами плазмы свидетельствует об активности фактора 3.

Для более точной оценки количества Ф-3 0,1 мл богатой тромбоцитами плазмы разводят плазмой, бедной тромбоцитами, до получения в смеси 50 000 и 25 000 кровяных пластинок в 1 мкл. 0,1 мл каждой смеси инкубируют с 0,1 мл суспензии каолина 20 мин при 37о, постоянно помешивая. Затем рекальцифицируют 0,1 мл раствором хлорида кальция и определяют время свертывания. Одновременно таким же образом исследуется плазма здорового человека (лучше несколько образцов). Эту плазму разводят собственной бедной пластинками до концентрации 50 000, 25 000, 12 500 тромбоцитов в 1 мкл. Получают бедную тромбоцитами плазму здорового, время ее свертывания служит отправной точкой отчета (соответствует 0%, Ф-3). По данным исследований нескольких образцов разведенной нормальной плазмы строится стандартная кривая разведения (в полулогарифмической системе координат), в которой время свертывания бестромбоцитарной плазмы соответствует 0 % Ф - 3, плазмы с 12 500 тромбоцитами в 1 мкл - 25 %, с 25 000 тромбоцитов - 50% и плазмы с 50 000 тромбоцитов в 1 мкл - 100%.

Оценка результатов: По кривой разведения определяется активность Ф -3 у исследуемого. Активность Ф -3 снижается у больных тромбоцитопениями и некоторыми тромбоцитопатиями. Время свертывания плазмы больных тромбоцитопениями сравнивается с временем свертывания плазмы здоровых людей с одинаковым числом тромбоцитов.

Примечание: Кривая разведения строится для каждого нового образца каолина.

Доступность тромбоцитарного фактора 3 (тест по Хардисти)

Материал для исследования: Свежая, бедная тромбоцитами (бестромбоцитарная), и тромбоцитарная плазмы обследуемого и здорового.

Реагенты: 1. Суспензия каолина; 2. 0,035 М раствор хлористого кальция.

Таблица 3

Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 654 | Нарушение авторских прав


1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 |

При использовании материала ссылка на сайт medlec.org обязательна! (0.003 сек.)