Основные этапы анализа хромосом
Существует множество модификаций прямого и непрямого методов приготовления хромосомных препаратов. Однако при всем их разнообразии основные этапы получения мета-фазных пластинок, пригодных для анализа, остаются неизменными.
1. Использование колхицина или других агентов — ингибиторов образования веретена, останавливает клеточный цикл на стадии метафазы.
2. Гипотоническая обработка — вызывает набухание клетки, разрушение межхромосомных связей, что способствует отделению хромосом друг от друга.
3. Фиксация — сохраняет структуру хромосом и удаляет остатки цитоплазмы.
4. Окрашивание препаратов.
Исключением можно считать приготовление препаратов мейотических хромосом (сперматоциты I на стадии пахитены и ооциты II на стадии метафазы), которые не требуют применения колхицина. Первые три этапа полностью могут быть исключены при анализе Х- или Y-полового хроматина в интерфазных ядрах буккального эпителия и хориона.
Применение всех этапов обработки материала существенно улучшает качество препаратов мета фазных хромосом. Концентрации реагентов, температурные и временные режимы, способы нанесения материала на препарат и окраски хромосом могут варьировать. Наличие многочисленных вариантов и модификаций цитогенетических методов объясняется особенностями исследуемого материала, целями исследования и устоявшимися лабораторными традициями. Подробно методы приготовления и анализа хромосомных препаратов изложены в соответствующих руководствах [3, 10, 17, 27].
Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 442 | Нарушение авторских прав
|