АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Основные этапы анализа хромосом

Существует множество модификаций пря­мого и непрямого методов приготовления хро­мосомных препаратов. Однако при всем их разнообразии основные этапы получения мета-фазных пластинок, пригодных для анализа, остаются неизменными.

1. Использование колхицина или других аген­тов — ингибиторов образования веретена, оста­навливает клеточный цикл на стадии метафазы.

2. Гипотоническая обработка — вызывает набухание клетки, разрушение межхромосом­ных связей, что способствует отделению хромо­сом друг от друга.

3. Фиксация — сохраняет структуру хромо­сом и удаляет остатки цитоплазмы.

4. Окрашивание препаратов.

Исключением можно считать приготовление препаратов мейотических хромосом (сперматоциты I на стадии пахитены и ооциты II на ста­дии метафазы), которые не требуют применения колхицина. Первые три этапа полностью могут быть исключены при анализе Х- или Y-полового хроматина в интерфазных ядрах буккального эпителия и хориона.

Применение всех этапов обработки материа­ла существенно улучшает качество препаратов мета фазных хромосом. Концентрации реаген­тов, температурные и временные режимы, спо­собы нанесения материала на препарат и ок­раски хромосом могут варьировать. Наличие многочисленных вариантов и модификаций цитогенетических методов объясняется особеннос­тями исследуемого материала, целями исследо­вания и устоявшимися лабораторными тра­дициями. Подробно методы приготовления и анализа хромосомных препаратов изложены в соответствующих руководствах [3, 10, 17, 27].

Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 404 | Нарушение авторских прав