Основные подходы к анализу кариотипа
По мере развития методов цитогенетического анализа их арсенал неуклонно увеличивался, и к настоящему времени возможно изучение всего хромосомного набора или отдельных хромосом в клетках практически любых тканей и органов, на любой стадии клеточного цикла, в митозе и мейозе.
В зависимости от целей исследования различают прямые и непрямые методы исследования хромосом.
1. Прямые методы подразумевают приготовление препаратов из свежеполученного материала после специальной обработки. Эти методы применяются при исследовании тканей, обладающих высокой митотической активностью (костный мозг, клетки лимфатических узлов, ткани эмбриона на ранних стадиях развития и хорион/плацента на любом сроке беременности) и при исследовании мейотических хромосом.
2. Непрямые методы включают получение препаратов хромосом из любой ткани после стимулирования пролиферации клеток в культуральных условиях в течение времени — от нескольких часов(кратковременные культуры) до нескольких лет (перевиваемые культуры).
В зависимости от стадии клеточного цикла проводят исследования:
• интерфазных ядер (половой хроматин в ядрах буккального эпителия, анализ гетероплоидии в интерфазных ядрах любых клеток методом гибридизации in situ);
• профазных хромосом (анализ на стадии пахитены в сперматогенезе);
• прометафазных хромосом (высокий уровень разрешения);
• метафазных хромосом (традиционный анализ ФГА-стимулированных лимфоцитов и реже — клеток костного мозга, фибробластов кожи и др.);
• стадий анафазы-телофазы (для регистрации специфического воздействия различных агентов на хромосомы методом оценки частоты клеток с мостами и фрагментами).
В клинической цитогенетике широко применяются методы анализа буккального эпителия и лимфоцитов периферической крови.
Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 488 | Нарушение авторских прав
|