Реакция связывания комплемента (реакция Вассермана) с кардиолипиновым антигеном
Исторически первым нетрепонемным серологическим тестом на сифилис стала адаптированная А.Вассерманом с соавт. (1906) реакция связывания комплемента (РСК), в которой в качестве антигена был использован экстракт печени новорожденных с врожденным сифилисом. После работ Pangborn (1941), выделившего и очистившего
кардиолипин, что в последующем позволило стандартизовать кардиолипин-лецитин-холестериновый антигенный комплекс, в РСК стали применять коммерческие препараты кардиолипинового антигена. В реакции используются сыворотки крови пациентов, прогретые при +56°С для инактивации комплемента. Механизм реакции заключается в связывании реагиновых антител тестируемой сыворотки с кардиолипиновым антигеном, образовавшийся иммунный комплекс способен связывать дозированный добавленный в систему комплемент морской свинки. В качества индикатора в реакцию вводится гемолитическая система (эритроциты барана с гемолитической сывороткой). В случае связывания комплемента образовавшимся иммунным комплексом гемолиза не наблюдается (реакция положительная), а при наличии свободного комплемента в реакционной смеси вследствие отсутствия в исследуемой сыворотке реагинов наблюдается гемолиз эритроцитов (реакция отрицательная). Для обозначения степени позитивности реакции Вассермана пользуются системой четырех плюсов: полная задержка гемолиза - 4+ (резко положительная реакция); значительная задержка гемолиза - 3+ (положительная реакция); частичная задержка гемолиза - 2+ (слабоположительная реакция); незначительная задержка гемолиза - 1+; сомнительная реакция - ±. Отрицательный результат реакции характеризуется полным гемолизом.
Реакция Вассермана (РВ) с кардиолипиновым антигеном может быть поставлена в качественном и количественном (с различными разведениями сыворотки) вариантах. Количественная постановка используется для контроля за эффективностью терапии (снижение титра реагиновых антител - серонегативация). Кроме сыворотки крови в реакции Вассермана могут быть использованы образцы спинномозговой жидкостию. Для увеличения чувствительности РВ может ставиться на холоде.
Реакции Вассермана с кардиолипиновым антигеном имеет недостаточно высокую чувствительность и специфичность:
- положительна приблизительно в 70% случаев при первичном сифилисе
- спустя 1-4 недели после появления шанкра;
- отрицательна у почти 30% пациентов с поздним (третичным) сифилисом;
- высокий процент ложноположительных реакций (см. выше).
Постановка реакции связывания комплемента сложна, требует подготовки сывороток (прогревание) и тщательной и трудоемкой подготовки исходных реагентов (титрование комплемента и гемолитической сыворотки, отмывка эритроцитов барана, разведение кардиолипинового антигена). Из-за сложности стандартизации реагентов, используемых в реакции Вассермана, сама реакция трудно поддается стандартизации, требует значительных трудозатрат. В связи с этим в большинстве зарубежных стран эту реакцию не используют в практике, заменив ее другими стандартными нетрепонемными тестами. Несмотря на эти факты в России, также как и в ряде других стран СНГ, реакция Вассермана входит в стандартный комплекс серологических реакций (КСР) на сифилис и до сих пор используется в практике здравоохранения. Ее применение и варианты постановки все еще регламентируются Приказом Минздрава СССР №1161 «О совершенствовании серологической диагностики сифилиса» от 2 сентября 1985 г.
Дата добавления: 2015-11-26 | Просмотры: 631 | Нарушение авторских прав
|