АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Експрес-метод для диференційної діагностики гемофілії (за Л. 3. Баркаганом)

На основі аутокоагуляційного тесту можна провести перше орієнтовне обстеження хворих, у яких є підозра на гемофілію. Визначається здатність нормальної плазми, адсорбованої ВаSО₄ та нормаль­ної старої сироватки виправляти показники аутокоагуляційного тесту. ВаSО₄ - плазма містить VIII та XI фактори, але у ній відсутній IX фактор. У старій сироватці містяться 1Х та Х1 фактори, але відсутній VIII фактор.

1. Спочатку визначають час зсідання плазми хворого під впливом його ж гемолізат-кальцієвої суміші (ГКС) після 4 хв. інкубації цієї суміші. При гемофілії він різко подовжується (1 пробірка).

2. Потім проводять таке ж саме дослідження, але з додаванням до ГКС нормальної ВаSО₄-плазми (2 пробірка).

3. Точно таке ж дослідження, але з додаванням нормальної старої сироватки (3 пробірка).

Якщо початково подовжений час зсідання нормалізується у 2-й пробірці, то у хворого гемофілія А (дефіцит УІІІ ф.). Якщо відмічається нормалізація часу у 3-й пробірці, то це гемофілія В (дефіцит 1Х ф.). При дефіциті XI ф. (гемофілія С) нормалізація відбувається у обох пробах.

Реактиви. 1. 3,8 % розчин цитрату натрію. 2. Розчин СаС1₂ М/50 (0,222 %).

3. Нормальна, бідна на тромбоцити плазма, адсорбована ВаSО₄: до 1 мл плазми додають 100 мг ВаS0₄, ретельно перемішують 40 хвилин при 37 градусах, центрифугують 15 хв. при 4000 об./хв. 0,1 мл ВаSО₄ - плаз­ми розводять фізіологічним розчином 1:4. Готується безпосередньо перед дослідженням. 4. Сироватка крові здорової людини витримується на протязі 24 годин при 37 градусах. Перед дослідженням сироватку центрифугують 10 хв. при 2000 об./хв. Розводять сироватку фізіологічним розчином у 9 разів.

5. Гемолізат-кальцієва суміш (ГКС) готується так само, як і при проведенні аутокоагуляційного тес­ту (див. АКТ).

Хід дослідження. У центрифужну пробірку, що містить 0,3 мл 3,8 % розчину цитрату натрію, набирають 3 мл крові, перемішують. 0,5 мл цієї крові відливають у іншу пробірку для приготування ГКС. Кров, що залишилася, центрифугують 10 хв. при 1500 об./хв. Плазму багату тромбоцитами розливають у 3 пробірки по 0,2 мл і ставлять на водяну баню при 37 град. У три інші пробірки наливають по 2 мл СаС1₂.

Гемолізат-кальцієва суміш: у одну з пробірок, яка містить розчин СаС1₂ (2 мл), додають 0,1 мл цільної крові досліджуваного, змішують та вмикають секундомір. ГКС, що утворюється, витримують 4 хв. (37 град.). Потім 0,2 мл ГКС додають до одного із раніше приготованого зразків плазми (1 пробірка), вмикають секундомір та реєструють час зсідання. У 2-гу пробірку з розчином СаС1₂ додають 0,1 мл ВаSО₄ - плазми, потім - 0,1 мл крові досліджуваного. Через 4 хв. інкубації при 37 град. 0,2 мл цієї суміші додають до плазми хворого (2 пробірка) і визнача­ють час зсідання. У 3-тю пробірку з розчином СаС1₂ додають 0,1 мл нормальної сироватки і 0,1 мл крові досліджувано­го. Через 4 хв. інкубації 0,2 мл цієї суміші додають до плазми хворого і реєструють час зсідання (3 пробір­ка).

Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 525 | Нарушение авторских прав