АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология
|
Тест з отрутою гюрзи звичайної (лебетоксовий тест) (ЛЕТ) (Баркаган З.С., 2001) - для визначення дефіциту ф. Х, У, ІІ, І
Принцип. Визначають час згортання плазми при активації процесу отрутою гюрзы, яка активує фактор X в присутності іонів кальцію та фактора V. Гемокоагулююча дія отрути гюрзи підсилюється фосфоліпідним компонентом (кефаліном або тромбоцитами).
Реактиви. 1. Лебетокс - робочий розчин отрути гюрзи, яку отримують слідуючим чином: на дистильованій воді готують маточний розчин отрути із розрахунку 10 мг кристаллічної речовини на 5 мл води (2 мг/мл). Маточний розчин залишають на 1 добу при +2...+8°С для стабілізації активності (дозрівання). Із маточного розчину шляхом послідовних розведень дистильованою водою готують робочі розчини отрути гюрзи (до концентрації 0,02 и 0,002 мг/мл). Конкретне розведення зміїної отрути з необхідною активністю згортання вибирається експериментальним шляхом, для чого визначається лебетоксовий час в контрольній нормальній плазмі. 2. Хлорид кальцію, 0,277% розчин.
Матеріал для дослідження. Цитратна бідна тромбоцитами плазма.
Хід визначення. 1. В кювету коагулометра або в пробірку (при мануальному визначенні) вносять 0,1 мл досліджуваної плазми та 0,1 мл робочого розчину лебетокса.
2. Інкубірують 1 хв при +37°С.
3. Добавляють 0,1 мл розчину хлориду кальцію, який має температуру +37°С, включають таймер коагулометра або секундомір та визначають час згортання.
Аналогічним чином визначають час згортання в контрольній нормальній плазмі.
Читання результатів. Результат виражають в секундах, зрівнюючи час згортання контрольної нормальної та досліджуваної плазми. В нормі показники ЛЕТ коливаються в межах від 23 до 27 с (25,0+2,0 с). При співпаданні результатів ЛЕТ в досліджуваному та контрольному зразках плазми (різниця в часі згортання не більше як 3 с) робиться висновок про відсутність дефициту факторів X, V, II и I (фібриногену). Подовження часу згортання в указаному тесті порівняно з контролем більше, ніж на 3 с, свідчить про ізольований або сочетаний дефіцит факторів X, V, II и I (фібриногену). При дефіциті фактору VII, на відміну від протромбінового тесту, час згортання в ЛЕТ не збільшується. Гепаринотерапія та прийняття непрямих антикоагулянтів подовжують час згортання в ЛЕТ.
Варіанти методики. Проба з ослабленим (розведеним в дистильованій воді до активності 35-55 с) отрутою гюрзи використовується для виявлення вовчаночного антикоагулянта при діагностиці антифосфоліпідного синдрому - АФС (див. розділ 8.1.2.4). Тест з отрутою гюрзи являється аналогом тесту з отрутою гадюки Рассела, який використовується за кордоном.
Таблиця 21
Тести, які розповсюджені в практичній охороні здоров’я для диференціації дефіциту факторів протромбінового комплекса (Баркаган З.С., 1988).
Лабораторні тести
| Показники при дефіциті факторів
| УІІ
| Х
| У
| ІІ
| АПТЧ, АКТ, тест генерації тромбопластину
| Н
| ЧП
| ЧП
| ЧП
| Протромбіновий час
| П
| П
| П
| ЧП
| Те ж при корекції:
|
|
|
|
| старою сироваткою
| Н
| Н
| П
| П
| ВаSО4-плазмою
| НП
| П
| Н
| П
| старою плазмою
| Н
| Н
| П
| Н
| Лебетоксовий час
| Н
| П
| П
| П
| Корекція в тестах змішання з плазмою без факторів:
|
|
|
|
| УІІ
| -
| +
| +
| +
| Х
| +
| -
| +
| +
| У
| +
| +
| -
| +
| ІІ
| +
| +
| +
| -
| Примітка: Н – нормальні показники; ЧП – частіше нормальні; П – патологічні показники; ЧП – частіше патологічні; + корекція є; - корекції не має. Стара сироватка – 24 год; стара плазма – декілька діб при + 4 град, яка дає протромбіновий час більше 60 с.
Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 545 | Нарушение авторских прав
|