Определение токсигенности
Определение invivo. Проводят подкожным или внутрикожным заражением 0,5–1,0 мл бактериальной культуры морских свинок массой 250 г. За 24 ч до заражения одно животное иммунизируют дифтерийным антитоксином. При положительном результате неиммунизированные животные погибают в течение 3–5 сут.
Определение invitro. Способность к образованию токсина можно определять заражением куриных эмбрионов или культур клеток с регистрацией последующего цитопатического эффекта. Можно использовать твердофазный ИФА с использованием антитоксинов, меченных пероксидазой. Также предложены ПЦР и ДНК-зонды для обнаружения гена tox в бактериальной хромосоме. Однако наибольшее распространение получил тест иммунодиффузии Илека. На среду с пониженным содержанием Fe2+ (для более интенсивного токсинообразования) проводят посев исследуемого изолята и эталонных токсигенного и нетоксигенного штаммов параллельными штрихами. На выросшие колонии накладывают полоску фильтровальной бумаги, пропитанной дифтерийным антитоксином. Образующийся токсин и антитоксин диффундируют в агар и в месте встречи образуют линии преципитации, так называемые «усы» или «стрелы» (рис. 14 – 4). На практике используют модификацию метода. Полоску бумаги, пропитанную антитоксином (500 АЕ в 1 мл), наносят на чашку, а исследуемые культуры засевают бляшками по обе стороны бумажной полоски. Контролем служит заведомо токсигенная культура, также посеянная «бляшкой». В результате встречной диффузии токсина и антитоксина в месте их контакта выпадает линия преципитации, сливающаяся с линией преципитации токсигенного штамма (рис. 14 – 5).
Ы Вёрстка Рисунок 14–04.
Рис. 14 – 4. Тест Илека для выявления токсигенных штаммов Corynebacteriumdiphtheriae (линии преципитатов указаны стрелкой).
Ы Вёрстка Рисунок 14–05.
Рис. 14 – 5. Модификация теста Илека для выявления токсигенных штаммов Corynebacteriumdiphtheriae (линии преципитатов указаны стрелкой).
Фаготипирование. Для дифференциальной диагностики возбудителей используют набор из 9 коринефагов. С его помощью можно типировать большинство токсигенных и нетоксигенных штаммов биовара gravis.
Ы Вёрстка Рисунок Дать портрет Беринга (Беринг.GIF)
Эмиль Беринг
Ы Вёрстка Рисунок (Китазато.JPG)
Шибасабуро Китазато
Лечение. Поскольку патогенез поражений обусловлен действием токсина, то основу специфической терапии составляет противодифтерийная лошадиная сыворотка (антитоксин), содержащая не менее 2000 международных антитоксических единиц активности (МЕ) в 1 мл. Антитоксин вводят внутримышечно или внутривенно в дозах, соответствующих тяжести заболевания (от 20 000 до 100 000 ЕД). Открытие Э. БЌрингом и Ш. КитазЊто антитоксических свойств сыворотки иммунных животных явилось одним из важных этапов развития микробиологии, а практическая медицина получила возможность противостоять этой высоколетальной инфекции. Параллельно назначают эффективные антимикробные препараты (аминогликозиды, цефалоспорины), а также проводят симптоматическую терапию. Выписку больных проводят только после двукратного отрицательного результата бактериологического обследования.
Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 1179 | Нарушение авторских прав
|