АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Определение Col-плазмид (колицикогенных факторов).

Исследуе­мые культуры Е. coli засевают методом укола в питательный агар в чашке Петри (7...8 уколов на 1 чашку). Посевы инкубируют при 37 °С в течение суток, после чего на внутреннюю поверхность чашки помещают кусочек ваты, смоченный хлороформом, в парах которого погибают бактерии. Затем по поверхности агара равно­мерно распределяют 3 мл расплавленного и остуженного до 45 °С полужидкого (0,7 %) питательного агара, смешанного с 0,1 мл 4-часовой бульонной индикаторной культуры. В качестве таковой подбирается наиболее чувствительная к данному типу колицина культура Е. coli. Через 18...24ч инкубации посевов при 37 °С учи­тывают результаты опыта. Вокруг посевов исследуемых культур, продуцирующих колицины, появляются прозрачные зоны подав­ления роста индикаторного штамма.

Определение колицинотипа. В питательный агар в чашке Петри методом укола засевают эталонные штаммы бактерий с известным колициногенотипом. Посевы инкубируют при 37 °С в течение суток, после чего бактерии убивают в парах хлороформа. Затем по поверх­ности агара равномерно распределяют Змл расплавленного и осту­женного полужидкого агара, смешанного с 0,1 мл 4-часовой бульон­ной культуры Е. coli неизвестного колициногенотипа (например, Col A, Col В и др.). Через 18...24ч отмечают результаты опыта по нали­чию или отсутствию роста. Исследуемая и индикаторная культуры имеют один и тот же колициногенотип, т. е. содержат идентичные Col-плазмиды. В противном случае вокруг эталонных штаммов по­являются прозрачные зоны подавления роста бактерий.

Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 480 | Нарушение авторских прав