АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Демонстрация фагоцитоза бактерии.

К фагоцитирующим клет­кам относят полиморфноядерные лейкоциты крови. Поглощение микробной клетки фагоцитом может не сопровождаться гибелью микроорганизма (незавершенный фагоцитоз) или приводить к внутриклеточному перевариванию захваченных бактерий (завер­шенный фагоцитоз).

Белой мыши внутрибрюшинно вводят 2 мл стерильного МПБ, затем через 2...3 ч — 0,5 мл культуры эшерихий. Спустя 20...40 мин шприцем из брюшной полости отбирают экссудат, делают мазки на предметном стекле, фиксируют спирт-эфиром и окрашивают метиленовой синью (экспозиция 2...3 мин). При микроскопирова-нии можно наблюдать различные стадии фагоцитоза: поглощение, деструкцию (переваривание) клеток (цв. рис. VI).

Методы оценки активности фагоцитиру­ющих клеток. Для оценки активности фагоцитов использу­ют следующие показатели: фагоцитарный показатель — процент фагоцитирующих клеток от общего числа учтенных нейтрофиль-ных лейкоцитов; фагоцитарное число — среднее число микробных клеток, поглощенных одним лейкоцитом (характеризует интен­сивность фагоцитоза).

Определение фагоцитарного показателя. В чистую стерильную центрифужную пробирку вносят 0,2 мл 2%-го раствора цитрата натрия, 0,1 мл крови морской свинки или кролика и 0,05 мл суспензии убитых нагреванием бактерий S. epidermidis, Е. сок или других (концентрация 0,5 ■ 109 клеток по оптическому стандарту мутности). Компоненты перемешивают и выдерживают при 37...38°С в течение 30 мин, затем центрифугируют 15,..20мин при 2500...3000 мин"1 до разделения на прозрачный слой плазмы, слой эритроцитов и тонкий сероватый средний слой лейкоцитов. Осторожно отсасывают плазму, пипеткой берут средний слой, дела­ют 3...5 мазков и окрашивают по методу Романовского—Гимза. Пре­парат микроскопируют, подсчитывают не менее 100 нейтрофильных лейкоцитов и определяют среди них число (%) фагоцитирующих.

Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 565 | Нарушение авторских прав