Синтетические среды
Синтетические среды готовят из определённого набора химических веществ, поэтому они имеют постоянный и точно известный состав. Кроме того, они не содержат животного белка, что иногда бывает необходимо (например, при изготовлении вакцины из культуры клеток, заражённой вирусами).
Синтетические среды отличаются весьма сложным составом. Чаще всего применяют среду 199 (Паркера), содержащую 61 компонент и среду Игла, в состав которой входит около 30 компонентов.
Среда 199 (Паркера) содержит 20 аминокислот, 17 витаминов, пурины и пиримидины, глюкозу, 9 минеральных солей и ряд других веществ. Эту среду готовят на солевом растворе Хенкса, стерилизуют фильтрованием через бактериальные фильтры. Среда 199 может сохраняться на холоде до 6 месяцев.
Среда Игла содержит 13 незаменимых аминокислот, 4 катиона, 3 аниона, б витаминов, холин, инозит и углеводы. Вариантом этой среды является среда Дульбекко.
Имеются и другие синтетические среды.
На синтетических средах возможно получение размножения клеток без добавления биологических жидкостей. Однако в присутствии сыворотки рост культуры клеток значительно улучшается. Поэтому в тех случаях, когда не требуется, чтобы среда была безбелковой, к синтетическим средам, как правило, добавляют сыворотку.
В зависимости от содержания питательных веществ вирусологические среды принято подразделять на среды для размножения и среды поддерживающие..
Среды для размножения более богаты питательными веществами в основном за счёт добавления 10-20% сыворотки. Их используют для размножения клеток растущей культуры до заражения её вирусами, чтобы получить хороший рост.
Поддерживающие среды употребляют после заражения культуры клеток вирусами, они содержат меньше питательных компонентов. Такие среды или совсем не содержат сыворотки, или она добавляется в очень небольшом количестве (2%). Необходимо пользоваться прогретой при 56° С сывороткой, чтобы разрушить антитела к культивируемому вирусу.
В настоящее время Московский институт вирусных препаратов МЗ РФ производит довольно широкий ассортимент различных солевых растворов и вирсологических питательных сред (синтетических и с гидролизатом лакталъбумина), которыми снабжаются вирусологические лаборатории. Это избавляет их от излишней трудоёмкой работы по приготовлению питательных сред и растворов собственными силами и способствует стандартизации проводимых исследований.
Дата добавления: 2014-12-11 | Просмотры: 2036 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 |
|