АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Титрование вируса методом цветной пробы

Цветную пробу ставят в пробирках. (Возможна постановка реакции в луночках плексигласовых пластин). Пробирки иногда закрывают резиновыми пробками, но чаще разобщение от атмосферного воздуха достигается наслаиванием стерильного вазелинового масла (0,6-0,8 мл) или применением алюминиевой фольги. Однотипную опытную смесь наливают не в одну, а в че­тыре пробирки, что повышает достоверность реакции.

При оценке результатов реакции учитывают только два тона желтый и красный (табл.5).

При титровании вируса по цветной пробе готовят десятикратные разведения вируссодержащего материала. Эти разведения вируса, взятые в объеме 0,25 мл, смешивают с 1 дозой клеток, содержащейся в таком же объеме, добавляют питательную среду по 0,25 мл и наслаивают вазелиновое масло по 0,6-0,8 мл. В реакции ставят контроля клеточной взвеси: берут 1, 1/2 и 1/4 дозы клеток. Эти контроли подтверждают правильность выбора дозы клеток. Пробирки помещают на 5-6 дней в термостат при 37 С после чего по изменению цвета учитывают реакцию.

Титром вируса по цветной пробе называется то наибольшее разведение вируса, которое вызывает подавление метаболической активности клеток в 50% случаев. В данном примере (табл.5) титр вируса равен 10"⁴ (две пробирки красные, две - желтые). Количество вируса, содержащееся в объеме 0,25 мл в разведении, равном титру, называется цитопатической дозой (ЦПД₅₀) вируса.

Дата добавления: 2014-12-11 | Просмотры: 1699 | Нарушение авторских прав