АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

ВИРУСНЫХ ИНФЕКЦИЯХ

Явление гемагглютинации - склеивания эритроцитов под действием вирусов впервые обнаружил Херст (1941г.). Было выявлено, что вирус гриппа агглютинирует эритроциты кур, и разработана реакция гемагглютинации. Позже было установлено. что гемагглютинирующими свойствами обладают и многие другие вирусы (большинство парамиксовирусов, поксвирусов, рабдвирусов, некоторые энтевирусы, флавивирусы, аденовирусы и

Др.)-

Механизм, стадии реакции. Гемагглютинация, вызываемая вирусами, не является иммунологической реакцией, так как здесь нет системы антиген - антитело. С помощью этой реакции легко выявить присутствие гемагглютинирующего вируса, но невозможно его идентифицировать.

Вирусы, обладающие гемагглютинирующими свойствами, имеют на поверхности гемагглютинины, с помощью которых и происходит склеивание эритроцитов. По своей химической природе гемагглютинины являются глико- или липопротеидами. У сложных вирусов они структурно связаны с ворсинками, у простых вирусов - с капсидом.

В процессе взаимодействия вирусов с эритроцитами различают стадии адсорбции, агглютинации и элюции. Адсорбция вирусов на эритроцитах начинается как неспецифическая, а затем переходит в специфическую вследствие сродства гемагглютининов к рецепторам эритроцитов. На одном эритроците адсорбируется множество вирусов, они образуют мостики между эритроцитами, изменяется электростатический заряд эритроцитов и в результате наступает следующая стадия взаимодействия - гемагглютинацид, на которой процесс может остановиться. Некоторые вирусы способны к элюции - освобождению с поверхности эритроцитов. Элюция происходит под действием вирусных ферментов (например, нейраминидазы) на рецепторы эритроцитов. Элюированные вирусы при этом не повреждаются, эритроциты же не способны повторно адсорбировать вирус вследствие разрушения рецепторов.

При постановке реакции гемагглютинации (РГА) стараются использовать именно те эритроциты (птиц, животных, человека), с которыми гемагглютинирующие свойства данного вируса выявляются лучше; -чаще всего гемагглютинацию ставят с эритроцитами кур. Обычно РГА ставят при комнатной температуре, реже при 4° или 37 С. Необходимо также учитывать значение рН, электролитный состав среды.

Задерживающее действие на РГА могут оказать ингибиторы, содержащиеся в тканях, где размножался вирус, и других биологических субстратах. Для снятия ингибиторного действия виру с со держащие материалы прогревают, обрабатывают трипсином, ацетоном и др.

Применение, Реакция гемагглютинации широко применяется
в вирусологической практике для обнаружения

гемагглютинирующих вирусов и их титрования. Реакция проста но технике выполнения, дает быстрые и достаточно точные результаты. Наиболее часто РГА применяют при диагностике гриппа и других острых респираторных вирусных инфекций. Используют ее и для обнаружения ряда других вирусов, обладающих гемагглютинирующими свойствами. В научных исследованиях РГА является удобной моделью для изучения механизма взаимодействия вируса и клетки.

Обычно реакцию гемагглютинации ставят на плексигласовых досках с углублениями - луночками, реже - в пробирках или на предметных стеклах.

Ниже приводится пример выявления вируса гриппа и определения его титра в вируссодержащем материале аллантоисиоЙ жидкости куриного эмбриона, зараженного в аллантоисную полость смывом из носоглотки больного гриппом.

Техника постановки РГА (табл. 7). На плексигласовой доске готовят двукратные возрастающие разведение в объеме 0,5 мл исследуемого вируссодержащего материала, начиная с 1:10 и до 1:1280. В луночки с разведениями добавляют равные объемы 1% взвеси эритроцитов кур (предварительно трехкратно отмытых физиологическим раствором).

Доску осторожно встряхивают и оставляют на 30-45 мин при комнатной температуре. Учет результатов проводят по трехкрестовой системе в зависимости от внешнего вида осадка эритроцитов.

При гемаггдютинации на "++" осадок имеет форму зонтика и занимает все дно лунки. При отсутствии агглютинации эритроциты оседают в центре лунки в виде компактного диска.

Титром вируса называется то наибольшее его разведение, при котором еще наблюдается выраженная гемагглютинация ("+++" или "++"), В нашем примере титр вируса 1:320, Количественное содержание вируса в разведении, равном титру, называется гемаглютинирующей единицей (содержится в 0,5 мл разведения 1:320). Определение этой величины необходимо для постановки реакции торможения гемагглютинации, в которой в качестве рабочей дозы вируса берут 4 гемагглютинирующие единицы.

Дата добавления: 2014-12-11 | Просмотры: 1322 | Нарушение авторских прав