АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

В) Культуры диплоидных клеток

Культуры диплоидных клеток ещё называют полуперевиваемьми культурами, так как они обладают способностью к пересевам в течение длительного времени -выдерживают до 40-50 пассажей, проводимых на протяжении 8-10 месяцев. Затем культура клеток подвергается дегенерации и гибнет. Диплоидными культурами их называют потому что они стойко сохраняют диплоидный кариотип, присущий исходным нормальным клеткам организма - родоначальницам диплоидной линии.

Культуры диплоидных клеток подучают из различных тканей эмбриона человека, из первичных культур. Так, например, пользуется известностью штамм ДКЛЧ (диплоидные клетки лёгких человека), штаммы WJT-38, JMR-90, MRC-5 из лёгочной ткани эмбриона человека.

Диплоидные культуры характеризуются быстрым размножением клеток, хорошей жизнеспособностью (они выживают до 4 недель при еженедельной смене среды), они обладают чувствительностью ко многим вирусам. Диплоидные культуры, как правило, не заражены микоплазмами и латентными вирусами. Они хорошо сохраняются в замороженном состоянии при температуре ниже - 70 С. Важное условие успешной работы с диплоидными культурами - наличие большого запаса ампул с диплоидными клетками ранних делений. Такими диплоидными культурами можно пользоваться практически в безграничном количестве пассажей, размораживая поочерёдно ампулы диплоидных клеток одну за другой и поддерживая каждую из культур в течение 40-50 пассажей.

Культуры диплоидных клеток применяют для выделения и культивирования вирусов. Но поистине незаменимыми они оказались в производстве культуральных вирусных вакцин. Диплоидные клетки чувствительны ко многим штаммам вирусов, онкогенно безопасны, пригодны для культивирования в промышленных масштабах и получения массового количества вирусных. вакцин. Применяемые диплоидные штаммы проходят систематический контроль на отсутствие контаминации вирусами и другими микроорганизмами, кариологический контроль с определением количества хромосом и анализом кариотипа.

Кроме стационарных однослойных клеточных культур применяют и роллерные однослойные культуры клеток, выращиваемые на стенках вращающихся цилиндрических сосудов, что значительно увеличивает поверхность, на которой растет клеточный монослой. В роллерных культурах выход вируса на единицу питательной среды возрастает в 10-20 раз, поэтому этот метод нередко используют для производственных целей.

Также весьма продуктивны суспензионные культуры.

Дата добавления: 2014-12-11 | Просмотры: 2109 | Нарушение авторских прав