АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология
|
Реакция нейтрализации по цветной пробе
При постановке цветной реакции с определяемым вирусом, предварительно смешанным с соответствующей
вируснейтрализующей сывороткой, вирус, инактивируется и не подавляет жиз не деятельности клеточной культуры, что доказывается переходом цвета среды в желтый. По результатам цветной пробы можно судить о наступившей реакции нейтрализации, свидетельствующей о соответствии вируса и сыворотки, таким образом идентифицировать исследуемый вирус.
Обычно методом цветной пробы определяют наличие и титр антител в сыворотке больных; наибольшее значение она имеет для определения антител у больных полиомиелитом, а также у иммунизированных полиомиелитной вакциной людей (табл.6).
При титровании антител методом цветной пробы в качестве антигена берут известный, заранее оттитрованный вирус в рабочей дозе, равной 100 ЦПД5о- В нашем примере (табл. 5) доза 100 ЦПДзо вируса содержится в 0,25 мл разведения 10 в -2.
К приготовленным двукратно возрастающим разведениям исследуемой сыворотки в объеме 0,25 мл (каждое разведение - в 4 пробирках) добавляют по 100 ЦГТДзо вируса в равном объеме. Полученные смеси выдерживают при комнатной температуре 1-2 часа (чтобы могла произойти реакция нейтрализации), после чего в пробирки добавляют взвесь клеток в количестве одной дозы, также в объеме 0,25 мл. В реакции ставят контроль дозы клеток и контроль сыворотки на токсичность. Иногда сыворотка может оказывать на культуру клеток токсичное действие: клетки гибнут. не накапливая кислых продуктов, и цвет среды остается красным. Учет результатов реакции нейтрализации по цветной пробе производится через 7-9 дней инкубирования при 37°С при наличии правильных результатов в контролях.
Титром реакции (титром сыворотки) называется максимальное разведение сыворотки, которое еще подавляет в 50% случаев действие 100 цитопэтических доз вируса. В нашем примере титр равен 1:64.
Дата добавления: 2014-12-11 | Просмотры: 4632 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 |
|