АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология
|
Типы клеточных культур
Для приготовления культур клеток используют различные ткани животных, человека и птиц как эмбриональные, так и зрелые. Кроме нормальных, используют и злокачественно перерождённые ткани, получаемые из опухолей.
Источником эмбриональной ткани часто служит куриный зародыш, а также эмбрионы человека, мышей, свиней, кроликов и др. Эмбриональная и опухолевая ткани отличаются лучшей выживаемостью и более активным ростом, чем ткани взрослого организма. Из зрелых тканей чаще всего употребляется почечная ткань (обезьян, морских свинок, хомячков и др.), амниотическая оболочка человека.
Ткани следует брать по возможности в асептических условиях; в тех случаях, когда ткани инфицированы (например, миндалины, слизистая оболочка кишечника), их обрабатывают большими дозами антибиотиков. Взятую ткань промывают в солевом растворе Хенкса и затем подвергают измельчению. Последующая обработка и культивирование бывают различными в зависимости от типа приготовления культуры.
Существуют культуры переживающих тканей, в которых клетки временно сохраняют жизнеспособность, но не размножаются, и культуры растущих тканей, в которых происходит активное размножение клеток.
В вирусологии используют только культуры растущих тканей, которые подразделяют на:
1) Культуры фиксированных кусочков тканей.
2) Однослойные культуры клеток:
а) первичные культуры клеток;
б) перевиваемые (стабильные) культуры клеток;
в) культуры диплоидных клеток;
3) Культуры суспензированных клеток.
Культуры фиксированных кусочков тканей (плазмированные культуры)
Кусочки измельчённой ткани помещают в куриную плазму, образующую сгусток, в котором эти кусочки фиксируются. Поверх свернувшейся пламзы наливают жидкую фазу - раствор Хенкса (с антибиотиками) и эмбриональный экстракт. После 1-2 дней инкубации вокруг кусочка начинают расти новые клетки на опорной сети из фибрина плазмы. В практической вирусологии эти культуры не применяются, их вытеснили более удобные однослойные культуры клеток. Однако на принципе культивирования кусочков ткани основан современный метод органного культивирования. Органные культуры - это культуры, в которых эмбрионы, зачатки органов, эксплантаты органов помещают в условия, обеспечивающие дифференцировку эмбриональной ткани, сохранение структуры и(или) функции культивируемой культуры. Органные культуры выращивают на границе раздела жидкой питательной и газовой фаз. Их используют в научно-исследовательской работе, например, для изучения ответа ткани на вирусную инфекцию, патогенеза респираторных вирусных инфекций и др.
Дата добавления: 2014-12-11 | Просмотры: 2087 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 |
|