АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

В-лимфоциты: развитие, маркёры, антигенспецифический В-клеточный рецептор. Методы определения количества и функциональной активности В-лимфоцитов

В-лимфоциты называются так потому, что они впервые выявлены у птиц в специальном центральном органе иммунитета, который называется "сумка Фабрициуса" (bursa of Fabricius) и в котором они проходят стадию созревания. У животных данный орган отсутствует, и ранние стадии созревания В-лимфоциты проходят в ККМ.

Они имеют антигенспецифический В-клеточкый рецептор (ВКР) в виде мембраносвязанных мо­лекул антител, а также ряд поверхностных CD АГ и рецепторов. В-лимфоциты могут узнавать нативный АГ в свободном состоянии.

Особенности:

• составляют 10-15% лимфоцитов крови и 20-25% клеток лимфоузлов.

• экспрессируют на поверхности IgD(IgM), HLA II, CD19,20,21,22,40,80/86,др.

Основная функция:

• ГИО, продукция антител определенной специфичности (Ig G,A,M)

• представление антигена Т-лимфоцитам

Развитие:

1. ККМ:

· полипотентная стволовая клетка (СD34 и CD117)

· про-В-клетки (экспрессируют АГ и стволовых клеток (СD34 и CD117), и В-лимфоцитов - СD19 и СD22))

· пре-В-­клетки (начинается синтез IgM в цитоплазме)

· незрелые В-клетки (экспрессируют IgM на поверхности)

2. Уничтожаются клетки, несущие рецепторы к аутоАГ.

3. Т – клеточные зоны периферич.лимфоидных органов:

· уничтожаются клетки, не получившие от Т-­клеток сигнала на выживание

4. Лимфатические фолликулы:

· Зрелые В-клетки (экспрессируют IgM и IgD, а также антигены СD21, СD22).

5. До встречи с АГ зрелые В-лимфоциты постоянно циркулируют в крови между ККМ и вторичными лимфоидными органами. После встречи с АГ они превращаются в плазматические клетки, продуцирующие АТ(1 млн. молекул/час), и клетки памяти.

Антигенраспознающий В-клеточный рецептор В-линфоцитов построен из молекулы мембранного иммуноглобулина (мономерные IgМ или IgD) и двух молекул CD79 (a и в). BcR имеет трансмембранные и внутрицитоплазматические сегменты, передающие внутриклеточные сигналы.

Методы определения количества и функциональной активности В-лимфоцитов.

В-лим­фоциты человека способны связывать эритроциты мыши и образовывать с ними розетки, а также формировать розетки с эритроцитами, сенсибилизированными молекулами антител (IgG) и молекулами СЗb фрагмента системы комплемента, что используется в лабораторной практике. Эти свойства совместно с экспрессией CD 5 молекул позволяют выявить субпопуляцию В-лимфоцитов.

Исследование количества и функционального состояния В-лимфоцитов В-клетки обнаруживаются в периферической крови по их рецепторному аппарату, а именно:

а) по наличию рецепторов к иммуноглобулинам и 3-ей фракции комплемента - реакция ЕАС-розеткообразования; Реакция ЕАС-розеткообразования ставится в 2 этапа: вначале

готовят реагент, состоящий из эритроцитов быка, антител к ним и комплемента, затем этот образовавшийся комплекс добавляют к лимфоцитам крови человека. Образуется розетка, которая внешне ничем не отличается от Е-розеток, но метод получения указывает на выявление именно В-лимфоцитов.

б) по наличию иммуноглобулиновых рецепторов - реакция иммунофлюоресценции; позволяет обнаружить на поверхности В-лимфоцита иммуноглобулиновые рецепторы. Для этого используются антиглобулиновые сыворотки, меченые люминофорами.

в) по наличию рецепторов к эритроцитам мыши - реакция МЕ-розеткообразования. Реакция роэеткообразования с мышиными эритроцитами появляется в результате смешивания последних с лимфоцитами периферической крови.

Функциональная характеристика В-лимфоцитов и количества иммуноглобулинов различных классов. Чаще других используется метод радиальной иммунодиффузии в агаре: на стеклянную пластину наливают расплавленный агар, содержаций антитела к даннному классу иммуноглобулинов. В агаре выбивают лунки, в которые вносят образцы изучаемых сывороток. В результате иммунопреципитации, образуются радиальные полоски, диаметр которых зависит от концентрации соответствующего иммуноглобулина. - Определение антител к аутоантигенам или к микробам нормальной микрофлоры.

- Определение титра специфических антител, вырабатывающихся в организме человека после иммунизации его вакцинами.

Гуморальный иммунный ответ: определение, этапы развития. Активация, пролиферация и дифференцировка клеток. Элиминация антигена. Т-зависимый и Т-независимый ответ. Проявления первичного и вторичного гуморального иммунного ответа.

Гуморальный иммунный ответ - комплексная кооперативная многокомпонентная реакция организма, которая индуцируется антигеном и приводит к выработке специфических к антигену антител, образованию иммунных комплексов и элиминации АГ. Реализуется посредством В-системы Лф при участии Т-лф. Контролируется ККМ, развивается на растворимые агенты - белки, ЛПС, экзотоксины, на внеклеточных паразитов.

Этапы ГИО:

1. Представление антигена (распознавание, переработка и презентация антигена).
2. Индуктивная стадия (передача информации на соответствующий клон В-лимфоцитов, их пролиферация и дифференцировка).
3. Эффекторная стадия (синтез антител и образование В-лимфоцитов памяти).

Т-независимая активация В-лимфоцитов - прямая стимуляция В-лимфоцитов без участия Т-лимфоцитов Т-независимыми антигенами.

• Этими АГ являются ЛПС или полисахариды микробов, имеющих линейно повторяющиеся структуры.

• Связываясь с ВКР, они или активируют соответствующий клон В-лимфоцитов (полисахариды пневмококков) или вызывают поликлональную активацию В-лимфоцитов (ЛПС грам- бактерий), которые пролиферируют, дифференцируются в плазматические клетки, синтезирующие IgM.

• В-лимфоциты памяти не образуются.

Т-зависимая активация В-лимфоцитов - осуществляется Т-зависимыми антигенами (белки, бактерии) при обязательном участии Т-лимфоцитов.

1. АПК захватывают антиген, процессирует его до низкомолекулярных пептидов и в комплексе с молекулой ГКГС II презентирует наивным Т-лимфоцитам (Тх0), которые взаимодействуют с ним рецептором ТКР и корецептором СD4.
2. Тх0 активируются, пролиферируют и превращаются в эффекторные клетки – Тх2.
3. ВКР распознает антиген и клетка поглощает его. После процессинга также образуется комплекс пептид-молекула ГКГС II класса, который В-лимфоциты представляют Тх2-хелперам.
4. В-Т-клеточное взаимодействие: Тх2 воспринимают сигнал с помощью ТКР и корецептора СD4. Однако для полноценной активации Т-хелперов необходима дополнительная стимуляция (костимуляция), которая осуществляется молекулами межклеточного взаимодействия (CD40-CD40L, CD80/86-CD28 и др). Эти процессы важны и для активации В-лимфоцитов. В случае отсутствия костимуляции наступает апоптоз Т-лимфоцитов.
5. Активированный Тх2 продуцирует ИЛ-4, 5, 6, 10, под влиянием которых происходит пролиферация В-лимфоцитов, превращение их в бласты и затем в плазматические клетки, синтезирующие антитела. Именно при участии цитокинов Тх2 возможно переключение иммуноглобулиновых генов В-лимфоцитов, что обеспечивает синтез иммуноглобулинов различных классов.
6. Часть бластных клеток превращаются в В-лимфоциты памяти. Небольшая популяция клеток, образующаяся в процессе гуморального иммунного ответа из активированных В-лимфоцитов. Переживают в состоянии функционального покоя многие годы после элиминации антигена из организма. Несут «память» об антигене в виде антигенспецифических ВКР (преимущественно IgG).

Первичный иммунный ответ развивается на первое попадание антигена в организм после латентного периода (2-3 дня). Первыми синтезируются IgM (выявляются через 2-3 суток), а затем IgG (пик на 10-14 сутки, могут сохраняться в низком титре в течение всей жизни). Параллельно отмечается небольшое увеличение уровня IgA, IgE, IgD. Первичный иммунный ответ затихает через 2-3 недели после стимуляции антигеном. После него остаются клетки памяти и может долго поддерживаться следовой уровень IgG-антител.

Вторичный иммунный ответ за счет В-клеток памяти стимуляция синтеза антител наступает быстро (через 1-3 дня). Количество антител резко увеличивается, причем сразу синтезируются IgG, титры которых во много раз больше, чем при первичном иммунном ответе. Возрастает их аффинность (сродство) к антигену. На слизистых оболочках значительно увеличивается уровень секреторных IgA-антител. Уровень IgM-антител существенно не меняется из-за отсутствия В-клеток памяти с рецептором IgM. Время затухания вторичного значительно превосходит длительность сохранения антител при первичном иммунном ответе.

Дата добавления: 2014-12-12 | Просмотры: 2035 | Нарушение авторских прав