Дослідження адгезивності тромбоцитів (метод Мультену і Врамену)
Визначення грунтується на різниці кількості тромбоцитів до і після фільтрації через скляну вату.
Апаратура. 1. Силіконірований посуд (дивись нижче). 2. Скляна вата (або скловолокно).
Реактиви. 1. Стабілізатор: 3 г глюкози, 3 г цитрату натрію розчиняють у 100 мл дистильованої води. 2. 3,8% розчин цитрату натрію. 3. Фізіологічний розчин.
Хід дослідження. Попередньо готують ізпрокип'яченої кілька разів скляної вати фільтр у вигляді косичок розміром 1 х 5 см. Кожну косичку поміщають у силіконіровану воронку, вставлену у силіконіровану колбочку. Фільтр змочують у 1,5 мл фізіологічного розчину і поміщують у термостат при 37 градусах. Кров із стабілізатором набирають у пробірки (дивись "Підрахунок еритроцитів") і рахують у камері Горяєва еритроцити та тромбоцити. Силіконірованою піпеткою беруть 1 мл крові іф1льтрують по краплинам через нагрітий до 37 градусів фільтр, зроблений із скляної вати. Через 30 сек. фільтр промивають 8 мл рідини (1 мл 3,8% розчину цитрату натрію і 9 мл фізіологічного розчину). Воронку знімають, фільтрат перемішують, набирають 20 мкл фільтрату піпеткою від гемометра Салі і переносять у пробірку, що вміщує 0,4 мл 3,8% розчину цитрату натрію. Підраховують число еритроцитів та тромбоцитів. Еритроцити рахують у 5 великих розграфлених квадратах, тромбоцити - у 25 розграфлених квадратах і перемножують на 2. Розрахунок роблять таким чином:
Показники До фільтру Після фільтру
Сума еритроцитів у 5 квадратах 372 356
Число тромбоцитів у 25 квадратах, 160 148
перемножене на 2
Загальна кількість еритроцитів із 372x10x10000356x10x10 000
переліком на розведення 9 9
= 4133 300 =3 955 550
Загальна кількість тромбоцитів 160x10x1000 148x10x1000
із переліком на розведення 9 9
= 177 780 =164440
Кількість еритроцитів, віднесена 4133 3003 955 550
до загальної кількості тромбоцитів 177 780 164 446
= 23,2 =24,05
24,05
Індекс адгезивності = ------------ = 1,04
23,2
Для підрахунку кількості адгезивних тромбоцитів Мооlten та Vгоman запропонували слідуючу формулу: загальну кількість тромбоцитів перемножують на
(1 - ------------------------------------).
індекс адгезивності + 0,3
У наведеному прикладі кількість адгезивних тромбоцитів:
177 780 (1------------------) = 71 112.
1,365 + 0,3
У здорових осіб індекс адгезивності дорівнює 1,02 - 1,5; число адгезивних тромбоцитів становить
41026 - 112 548 у 1 мкл, або 23 - 44%.
Дата добавления: 2015-09-27 | Просмотры: 564 | Нарушение авторских прав
|