Работа 1. Взятие крови у рыб, стабилизация
Общее количество крови в организме животных составляет приблизительно 4-8% от массы тела. Форменные элементы составляют около 45% объема крови, плазмы – 55%.
Для предотвращения свертывания крови к последней добавляют стабилизаторы, т.е. антикоагулянты. С этой целью используют следующие антикоагулянты (на 10 мл крови):
1. 50 ЕД гепарина медицинского в растворе (в 1 мл раствора 5000 ЕД); 1-2 капли гепарина отмеривают тонкой иглой для внутрикожной туберкулинизации.
2. 3-4 капли 10%-го раствора трилона Б (двунатриевая соль ЭДТА – этилендиаминтетрауксусной кислоты).
3. 30 мг натрия цитрата или 0,3 мл 10%-го раствора.
4. 15 мг натрия (калия) оксалата или 0,15 мл 10%-го раствора.
5. 0,3-0,5 мл 10%-го раствора натрия хлорида.
Чтобы кровь хорошо перемешалась с антикоагулянтом, пробирку закрывают пробкой, 10-15 раз легко переворачивают, не взбалтывая.
Стабилизированную кровь хранят в холодильнике при температуре +40С. Для подсчета форменных элементов кровь пригодна в течение 72 часов, для приготовления мазков – не более 24 часов.
Для получения сыворотки периферическую кровь берут в сухие чистые пробирки и ставят в теплое место для свертывания. Образовавшийся сгусток крови отделяют от стенок пробирки стеклянной палочкой и центрифугируют в течение 5-10 минут при 2-3 тыс. об/мин. Сыворотку отсасывают пипеткой. Для получения плазмы центрифугируют стабилизированную кровь при тех же условиях.
Реагенты: спирт, антикоагулянт
Оборудование: шприц, рыба
Кровь у рыб берут из сердца, луковицы брюшной аорты, подкожной и хвостовой артерии.
Ход работы. Одним из предложенных методов взять кровь у рыбы из:
- сердца (рис. А) – между грудными плавниками с брюшной стороны обработать спиртом место взятия крови с целью удаления слизи, содержащей тромбокиназу, затем просушить салфеткой. Иглу шприца ввести с брюшной стороны по сагиттальной линии в точке между грудными плавниками, направляя иглу к голове;
- подкожной артерии (рис. Б) – у сеголеток пункцию провести в точке пересечения средней боковой линии и линии, идущей перпендикулярно от анального отверстия; у рыб старших возрастов – в точке пересечения боковой линии и перпендикулярной к ней линии, идущей от заднего конца анального плавника.
А – из сердца (1) рыбы, Б – из подкожной артерии (1 — у сеголетков; 2— у карпов старшего возраста)
Рисунок 1. – Взятие крови у рыб
Оформление работы. Зарисуйте схематически места взятия крови у рыб. Запишите возможные к использованию антикоагулянты.
Дата добавления: 2014-12-12 | Просмотры: 1734 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 |
|