Работа 11. Пробиотические микроорганизмы молочнокислых продуктов питания
Оборудование: ч.Петри, спиртовки, шпатель Дригальского, бакпетля.
Реагенты: фармацевтические бакпрепараты («Диалакт», «Бифидумбактерин», «Лактобактерин» и др.), молочнокислые продукты питания торговой сети, скарификат стенки средней кишки кролика или фекалии кролика, спирт.
Ход работы. Для получения молочнокислой закваски из фармацевтических сухих бакконцентратов молоко прокипятить, дать ему остыть до 37 oC. Затем сухой бакконцентрат активизировать в стерилизованном молоке в термостате в течении 10 ч. После активации (созревания) бактерий в молоке получается закваска, которая по внешнему виду напоминает домашний кефир.
Для получения равномерного бактериального газона на твердой среде МПА с целью дальнейшего изучения антагонистических свойств микрофлоры скарификат предварительно растворить в 5 мл физраствора и по 0,1 см3 исследуемого продукта вносить на застывший МПА, растиреть стеклянным шпателем по среде. Инкубировать при 37°С 18 ч. Для получения бактерий фекалий объект исследования собрать с пола клетки животного сразу после акта дефекации и поместить в чистую стерильную посуду. Исследовать не позднее 1 часа после дефекации, растворяя фекалии в течении 20 мин в физрастворе в соотношении 1:10. Затем 0,1 мл биосубстрата внести стерильной пипеткой на плотную среду, растереть шпателем, инкубировать при 37°С 18-24 ч.
Затем пастеровской петлей наносить изучаемый биосубстрат (без серии предельных разведений), проводя волнообразную линию по поверхности МПА - посев штрихом. Через сутки инкубирования (при 37°С) изучить бактериостатическую и бактерицидную деятельность молочнокислых бактерий на гнилостную микрофлору кишечника, оценивая зону лизата вдоль штриха внесенных пробиотиков. Чашки просматривать на свет. Зону угнетения жизнедеятельности бактерий кишечника оценивать в рангах:
I ранг – зарастание зоны штриха пробиотиков на 95% микроорганизмами кишечника, следовательно, проявление антагонизма минимально.
II ранг - частичное зарастание зоны штриха на 75-50%,
III ранг – частичное зарастание зоны штриха менее 50%,
IY ранг - нет зарастания зоны штриха (зарастание до 5%) – максимальное проявление характера антагонистических межвидовых взаимоотношений.
Оформление работы. Составить отчет о характере бактерицидного и бактериостатического действия молочнокислых продуктов питания торговой сети и активированных бактериальных фармацевтических препаратов в лабораторных условиях.
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
1. Романова, Л.К. Признаки общего и легочного воспаления у детей первого года жизни, оперированных по поводу врожденных пороков сердца / Л.К. Романова, Л.А. Бокерия, А.В. Трепаков, Л.Ф. Макарова и др. // Иммунология, 2008, т.29, №1, с.24 – 27.
2. Авдеева, Ж.И. Лекарственные препараты моноклональных антител / Ж.И. Авдеева, Н.А. Алпатова, Р.А. Волкова, Л.К. Лаптева // Вакцинология 2010. Совершенствование иммунобиологических средств профилактики, диагностики и лечения инфекционных болезней: материалы всерос. науч.-практ. конф., Москва, 9-10 ноября 2010 г. – Москва, 2010. – С.15 – 16.
3. Позднякова, А.С. Состояние иммунологической реактивности детей с латентной туберкулезной инфекцией / А.С. Позднякова, Д.Т. Леви, Е.С. Хитеева // Вакцинология 2010. Совершенствование иммунобиологических средств профилактики, диагностики и лечения инфекционных болезней: материалы всерос. науч.-практ. конф., Москва, 9-10 ноября 2010 г. – Москва, 2010. – С. 96.
4. Осидак, Л.В. Гриппферон: метод. пособие для врачей / Л.В. Осидак, В.П. Дриневский, П.Я. Гапонюк; ГУ Научно-исследовательский институт гриппа РАМН. – Санкт-Петербург, 2009. – 58 с.
5. Тархан-Моурави, И.Д. Патогенетические механизмы действия аэрозольтерапии циклофероном при хронических ринитах / И.Д. Тархан-Моурави, М.М. Ломая // Аэрозольная терапия заболеваний дыхательных путей: рекомендации для врачей, под ред. Проф. М.Г. Романцова. – Санкт-Петербург, 2011. С. 16 – 23.
6. Поворова, О.В. Функциональная характеристика иммунной системы при иммунозависимых воспалительных заболеваниях детей Климовического района Могилевской области / О.В. Поворова, Л.Г. Борткевич, Т.А. Сапунова, В.В. Блинов // Веснiк МДУ iмя А.А.Кулешова. – 2006. - № 1 (23). С. 178-183.
7. Бронштейн, А.М. Трихинеллез: информационно-методическое пособие. / А.М. Бронштейн, В.П. Сергиев, О.Г. Полетаева и др. – Москва, 2004. 32 с.
Дата добавления: 2014-12-12 | Просмотры: 932 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 |
|