 |
|
АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология |
Работа 10. Изучение лизоцимной активности яичного белка птицОборудование:. Те же, что и в предыдущих опытах, но вместо коротких пробирок на каждую пробу яйца нужно иметь по 6 бактериологических пробирок с 9 мл стерильного физиологического раствора. Реагенты: физраствор; яйца птичьи (1. промышленного производства куриные, 2. домашние куриные, 3. куриные фабричные с селеном, 4. перепелиные). Ход работы. Тупой конец яйца протирают ватным тампоном, смоченным в спирте, скорлупу надкалывают, не нарушая подскорлуповой оболочки, удаляют пластинку скорлупы, в образовавшееся отверстие вводят стерильную пипетку и, не касаясь желтка, набирают 1 мл белка и вносят в первую пробирку с 9 мл физиологического раствора. Белок с помощью пипетки осторожными круговыми движениями тщательно размешивают в физиологическом растворе до исчезновения сгустков. Получив в первой пробирке разведение белка 1:10, переносят из нее 1 мл содержимого во вторую пробирку с 9 мл физиологического раствора, размешивают, набирают пипеткой 1 мл, переносят в третью пробирку и тем же способом - в последующие до разведения яичного белка 1:1000000. В пробирки каждого разведения яичного белка, начиная 1:100 погружают стерильные диски из фильтровальной бумаги. Одновременно подготавливают чашки Петри, засеянные культурой M.lysodeieticus по методике, описанной в работе 9. Каждую чашку, предназначенную для исследования одной пробы яичного белка, расчерчивают восковым карандашом с наружной стороны дна на пять секторов, обозначив разведения: 1:100, 1:1000, 1:10000; 1:100000; 1:1000000, уменьшая при этом площадь сектора по мере возрастания степени разведения яичного белка. С помощью пинцета из пробирок с разведениями яичного белка извлекают диски и в количестве 3-4 раскладывают соответственно, в каждый обозначенный сектор чашки Петри на поверхность МПА, засеянного тест-культурой M. lysodeicticus. Затем чашки ставят в термостат на 24 часа крышками вниз во избежание размыва выросших на агаровой среде колоний конденсационной водой. В процессе манипуляции с яичным белком следует учитывать, что работа должна проходить в условиях соблюдения правил стерильности, с использованием горящей спиртовки. Пробирки после взятия из них пипеткой разведений яичного белка снова должны закрываться ватными пробками. Лизоцимную активность яичного белка учитывают по показателям зон задержки роста (ЗЗР)) тест-культуры, начиная с разведения 1:100 со следующей оценкой: слабая – в разведении 1:100; средняя – в разведении 1:1000 - 1: 10000; сильная – в разведении 1:100000 - 1:1000000. Оформление работы. Расчитать ЗЗР микроорганизмов вокруг бумажных дисков в ч.Петри в проходящем свете, сделать выводы о силе лизоцимной активности белка птичьих яиц в зависимости от вида птиц, от характера кормления кур.
Дата добавления: 2014-12-12 | Просмотры: 715 | Нарушение авторских прав |