АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Ошибочный порядок смешивания реагентов

Для смешивания каждой капли необходимо использовать чистую стеклянную палочку, если использовать одну палочку или небрежно ее обрабатывать, возможна агглютинация несоответствующая действительности в результате внесения (смешения) реагентов. Профилактика проста: соблюдение правил проведения серологических реакций.

Несоответствие стандартному объемному соотношения реагентов. Соотношение реагентов и исследуемых эритроцитов. Оптимальное для реакции агглютинации соотношение эритроцитов и тестовых реагентов - 1:10 при использовании гемагглютинирующих сывороток, 2 - 3:10 при использовании моноклональных реагентов (цоликлонов) и реагентов, приготовленных в комбинации с коллоидами.

При значительном избытке эритроцитов агглютинация может быть не замечена, особенно в тех случаях, когда агглютинационные свойства эритроцитов снижены - подгруппа А_2. При недостаточном количестве эритроцитов агглютинация медленно появляется, что также может привести к неправильной трактовке результатов в случае исследования эритроцитов со слабой агглютинабельностью.

Профилактика: соблюдение объемного соотношения реагентов.

Проведение реакции с кровью другого больного. При проведении исследования одновременно у нескольких пациентов и ошибочном написании паспортных данных или проведении реакции с другой кровью получаем у конкретного больного неправильный результат, при правильной оценке результатов агглютинации. Профилактика: пунктуальность выполнения исследования.

Несоблюдение времени на проведении реакции. Агглютинация эритроцитов появляется в течение первых 10 с, однако наблюдение за ходом реакции следует проводить не менее 5 мин, особенно внимательно наблюдая те капли, в которых агглютинация не появилась. Это позволяет выявить слабый агглютиноген А2, характеризующийся замедленной агглютинацией. Профилактика: наблюдение за результатом агглютинации не менее 5 минут.

Несоблюдение температурного режима и освещенности. Определение группы крови производят при температуре не ниже 15°С, поскольку исследуемая кровь может содержать поливалентные холодовые агглютинины, вызывающие неспецифическое склеивание эритроцитов при пониженной температуре.

При повышенной температуре анти-А, анти-В, анти-АВ антитела утрачивают активность, поэтому определение группы крови производят при температуре не выше 25°С.

При плохой освещенности возможно не заметить агглютинацию, если она выражена слабо.

Профилактика: соблюдение температурного режима, проведение исследования при хорошем освещении.

СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ ОШИБКИ

1. Псевдоагглютинация.

2. Панагглютинация.

3. Феномен Томсена.

4. Трудно определяемые группы крови.

5. Кровяные химеры.

6. Холодовая агглютинация.

7. Другие.

Псевдоагглютинация. При проведении исследования определения групп крови по системе АВО эритроциты могут образовывать «монетные столбики», что при анализе результатов можно принять за агглютинацию. Это приведет к ошибочным результатам исследования. Необходимо помнить, что «монетные столбики» нестойкие и пропадают при встряхивании или добавлении капли физиологического раствора.

Профилактики: добавлять физиологический раствор.

Панагглютинация –это неспецифическая агглютинация, проявляющаяся в способности эритроцитов агглютинироваться сыворотками всех групп, включая AB(IV). Неспецифическая агглютинация наблюдается при аутоиммунной гемолитической анемии и других аутоиммунных заболеваниях, сопровождающихся адсорбцией аутоантител на эритроцитах, при гемолитической болезни новорожденных, эритроциты которых нагружены аллоантителами матери.

Профилактика.

Неспецифическую агглютинацию трудно отличить от специфической. Поэтому при наличии агглютинации эритроцитов с реагентами анти-А, анти-В, анти-АВ, анти-D необходимо провести пробу со стандартной сывороткой AB(IV) и физиологическим раствором. В противном случае реципиент может быть ошибочно отнесен к группе AB(IV) резус положительный, что повлечет за собой неправильный выбор донора.

Если из-за неспецифической агглютинации эритроцитов группу крови больного установить не удается, заключение о групповой принадлежности крови не выдают, образец крови направляют в специализированную лабораторию. При наличии жизненных показаний больному переливают эритроциты группы 0(I).

Феномен Томсена. Одним из видов неспецифической агглютинации является и феномен Томсена (1927). Сущность его заключается в том, что не стерильно взятые и отмытые эритроциты, независимо от их групповой принадлежности, простояв в течении суток при комнатной температуре, образуют «монетные столбики» с сыворотками всех групп и со своей собственной. Фриденрейх (1928) открыл бактериальную природу этого феномена. Н.И. Блинов и Н.Н. Протасов (1938) доказали, что изменения в эритроцитах не связаны с каким-либо определенным видом бактерий. Установлено, что агглютинация при феномене Томсена не истинная, а вторичная, возникающая вследствие агглютинации бактерий, осевших на эритроцитах. В настоящее время встречается редко.

Профилактика: соблюдение правил асептики и антисептики при заборе компонентов крови.

Трудно определяемые группы крови. Антиген А, содержащийся в эритроцитах группы А(II) и AB(IV), может быть представлен двумя вариантами (подгруппами) - А1 и А2. Антиген В таких различий не имеет. Эритроциты А2 отличаются от эритроцитов A1 низкой агглютинационной способностью по отношению к антителам анти-А. Подгруппы крови в клинической трансфузиологии значения не имеют, поэтому при переливании эритроцитов их не учитывают. Лицам, имеющим антиген А2, можно переливать эритроциты А1; лицам, имеющим антиген A1, можно переливать эритроциты А2. Исключение составляют реципиенты, имеющие экстраагглютинины α1 и α2. Эти антитела не вызывают посттрансфузионных осложнений, однако проявляют себя в пробе на индивидуальную совместимость. В частности сыворотка реципиента A2 α1 агглютинирует эритроциты А1 на плоскости или в пробирках при комнатной температуре, поэтому реципиентам A2 α1(II) переливают эритроциты 0(I), реципиентам A2В α1(IV) переливают эритроциты B(III) или 0(I).

Кровяными химерами называют одновременное пребывание в кровяном русле двух популяций эритроцитов, отличающихся по группе крови и другим антигенам. Трансфузионные химеры возникают в результате многократного переливания эритроцитной массы или взвеси группы 0(I) реципиентам другой группы. Истинные химеры встречаются у гетерозиготных близнецов, а также после пересадки аллогенного костного мозга.

Профилактика.

Установление группы крови при кровяных химерах затруднено, поскольку в некоторых случаях половина эритроцитов, циркулирующих в кровяном русле, имеет одну группу крови, а другая половина – другую. Реципиенту, имеющему кровяную химеру, переливают эритроцитную массу или взвесь, не содержащие антигены, по отношению к которым у реципиента могут быть антитела.

Холодовая агглютинация. При низкой температуре происходит агглютинация независимо от групп крови. Она связана с наличием в крови холодового агглютинина, дающего реакцию только при низких температурах, обычно не выше +15⁰ С. Холодовой агглютинин не связан с агглютининами α и β. В условиях организма его действие не проявляется. Разрушается при подогревании сыворотки до +60⁰ С.

Профилактика: соблюдение температурного режима, может быть формально отнесен и к технической ошибке

Другие особенности. Определение группы крови АВ0 и резус принадлежности может быть затруднено у больных в связи с изменением свойств эритроцитов при различных патологических состояниях. Это может выразиться в повышенной агглютинабельности эритроцитов, наблюдаемой у больных циррозом печени, при ожогах, сепсисе. Агглютинабельность может быть столь высока, что эритроциты склеиваются в собственной сыворотке и физиологическом растворе. При лейкозах наблюдается снижение агглютинабельности эритроцитов, в результате чего значительное их количество остается не вовлеченным в агглютинацию даже при использовании высокоактивных стандартных реагентов (ложная кровяная химера).

У некоторых новорожденных, в отличие от взрослых людей, антигены А и В на эритроцитах выражены слабо, а соответствующие агглютинины в сыворотке крови отсутствуют.

Во всех случаях нечеткого, сомнительного результата необходимо повторить исследование, используя дополнительно стандартные реагенты другой серии. Если результаты остаются неясными, образец крови направляют на исследование в специализированную лабораторию.

КОНТРОЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ

1. Методика определения группы крови по системе АВО с помощью стандартных сывороток.

2. Методика определения группы крови по системе АВО с помощью цоликлонов.

3. Основные методики определения резус-принадлежности.

4. Перечислите необходимый набор инструментария для проведения серологической реакции определения групповой принадлежности крови реципиента.

5. Какие две основные группы ошибок возникают при определении групповой принадлежности крови?

6. Основной метод профилактики технических ошибок при проведении серологических реакций.

7. Что такое феномен Томсена?

8. Определение какой группы крови сопряжено с наибольшей вероятностью ошибочного трактования результатов агглютинации?

9. Как могут появиться кровяные химеры?

10. Как избежать псевдоагглютинации?

Дата добавления: 2015-09-18 | Просмотры: 590 | Нарушение авторских прав