АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Микробиологическая диагностика. Материалом для исследованияслужит:

Материалом для исследования служит:

1. носоглоточная слизь (от больных и носителей), которую берут специальным тампоном, изогнутым под углом, с задней стенки глотки при визуальном контроле, вводя тампон за мягкое небо,

2. ликвор, кровь, гной с мозговых оболочек, соскоб с элементов геморрагической сыпи на коже.

3. При цереброспинальном менингите исследуемым материалом является ликвор, берут его в день госпитализации больного асептически люмбальной пункцией в количестве 2-5 мл.

4. От трупа исследуемый материал (гной с мозговых оболочек, соскоб из кожных поражений) берут во время вскрытия.

Поскольку менингококки очень неустойчивы вне организма человека, клинический материал транспортируют в утепленных контейнерах при 30-35⁰. Из исследуемого материала готовят мазки и производят посевы.

Методы диагностики:

1. Основным методом диагностики является бактериологический. Материал засевают на чашки с питательным агаром, содержащим кровь, сыворотку крови или асцитическую жидкость, в которую добавили антибиотик ристомицин (150 ЕД/мл) для подавления грамположительных кокков. Культуры инкубируют в течение 18-24 ч при 37⁰С в сосуде со свечой или в специальном термостате с повышенным содержанием СО₂ (8-10%). Идентификацию выделенной культуры проводят на основании биохимических свойств. Принадлежность к серогруппам определяют в реакции агглютинации. Для эпидемиологического анализа проводят фаготипирование выделенных культур менингококков.

2. Бактериоскопическое исследование ликвора и крови позволяет определить наличие возбудителя.

Ликвор центрифугируют, из осадка готовят мазки, которые окрашивают по Граму, метиленовым синим и другими методами. В положительных случаях наблюдают полинуклеарные лейкоциты, эритроциты, нити фибрина и грамотрицательные диплококки бобовидной формы, окруженные капсулой в виде плохо окрашиваемого ореола.

Для микроскопического исследования крови готовят препарат «толстой капли», который высушивают и окрашивают метиленовой синью без фиксации. В положительном случае обнаруживают на голубом фоне менингококки, имеющие типичную морфологию, окруженные капсулой в виде бесцветного ореола.

Трупный материал исследуют только бактериоскопически из-за низкой жизнеспособности менингококка.

Носоглоточная слизь не микроскопируется из-за наличия в ней условно-патогенных нейссерий, морфологически сходных с менингококком.

3. Серологический метод используют для обнаружения растворимых антигенов менингококка в ликворе и других видах материала или антител в сыворотке крови.

Для обнаружения антигена применяют ИФА, РИА и метод встречного иммуноэлектрофореза: в агаровых пластинах на стекле размером 9 х 12 см вырезают два параллельных ряда лунок диаметром около 3 мм. В лунки одного ряда вносят исследуемую жидкость, в лунки другого ряда – преципитирующие антименингококковые сыворотки разных серогрупп. Для реакции используется веронал-мединаловый буфер. Пластины помещают в аппарат для иммуноэлектрофореза на 40-45 мин при комнатной температуре и силе тока около 30 А. При положительном результате между лунками со спинномозговой жидкостью и соответствующей антисывороткой образуются 1-2 полосы преципитации.

4. Для обнаружения антител при серологическом обследовании больных или для подтверждения диагноза используют РПГА (реакцию пассивной гемагглютинации) с парными сыворотками. У больных менингококковой инфекцией антитела обнаруживаются с конца первой недели болезни, достигая максимума на 2-3 неделе, а затем их титр снижается.

Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 593 | Нарушение авторских прав