АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Д. Определение субпопуляционного состава лимфоцитов крови

Прочитайте:
  1. A) уменьшение вязкости крови
  2. A) уменьшение содержания эритроцитов в периферической крови
  3. A- Определение индекса гигиены полости рта
  4. D. клетки, регулирующие активность B-лимфоцитов
  5. Der p 1 способен «удалять» CD23 с поверхности В-лимфоцитов
  6. E Определение в крови уровней мочевины и креатинина
  7. E) биохимические анализы крови.
  8. E) биохимические анализы крови.
  9. I. Аборты. Определение понятия.
  10. I. Иммунология. Определение, задачи, методы. История развитии иммунологии.

Тестирование субпопуляций лимфоцитов крови по CD-маркерам (СD3+, СD4+, СD8+) проводят методом проточной цитофлюориметрии с применением моноклональных антител.

Выделенные клетки культивируют в полной питательной среде в стерильном планшете, можно использовать планшет для ИФА, в количестве 2х106 на объем лунки (250 мкл). После культивирования клетки собирают в пластиковые пробирки для проточного цитофлюориметра, отмывают фосфатным буфером (рН=7,2) и окрашивают стандартными атнителами, меченными FITC, в объеме 20 мкл. Затем клетки собрают в пробирку, отмывают в 500 мкл ФСБ, центрифугируют 5 мин при 1,5 тыс. об/мин; супернатант удаляют аспирацией. После добавления 5 мкл меченых антител и 500 мкл ФСБ; пробы встряхивают на вортексе для смешивания антител с клетками.

Анализ проводят с использованием цитофлюориметра на основе определения малого углового светорассеяния (FSC), характеризующего размер клетки, и бокового светорассеяния (SSC), характеризующего цитоплазматические, а также мембранные особенности клетки. Анализируют параметры зеленой (FITC – 530 нм) флюоресценции на FL1-канале. Параметры напряжения для регистрации показателей на проточном цитометре задают согласно указаниям в инструкции к набору. Результаты выражают в относительных (%) и абсолютных (тыс/мкл) значениях.

Дата добавления: 2015-01-12 | Просмотры: 725 | Нарушение авторских прав


1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 | 34 | 35 |

При использовании материала ссылка на сайт medlec.org обязательна! (0.003 сек.)