 |
|
АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология |
Оценка фагоцитарной активности лейкоцитовФагоцитарная активность нейтрофилов обычно повышается в начале развития воспалительного процесса. Ее снижение ведет к хронизации заболевания, развитию синдрома иммунных комплексов (нарушается функция их разрушения и выведения). Адгезивную способность нейтрофилов измеряют по прилипанию к волокнам из нейлона. Поглотительную способность лейкоцитов измеряют по захвату ими различных частиц (микроорганизмы, частицы латекса). Метаболическую активность клеток можно оценить по интенсивности окислительного («респираторного») взрыва в фагоцитах (НСТ-тест) или с помощью хемолюминесцентного метода. Показатели фагоцитарной активности нейтрофилов оцениваются в тестах спонтанного и стимулированного микробными полисахаридами (продигиозаном и зимозаном) фагоцитоза, что позволяет при сравнении аналогичных показателей до и после стимуляции оценивать резервные способности клеток. При определении поглотительной способности нейтрофилов рассчитывают фагоцитарный индекс (процент фагоцитирующих лейкоцитов) и фагоцитарное число (среднее число частиц, поглощенных одним активным фагоцитом). Метод основан на умении полиморфноядерных лейкоцитов связывать на своей поверхности, поглощать и переваривать чужеродные агенты (микробные клетки и их структуры, индиферрентные частицы). Полученные данные сравнивают с нормами (табл. 20). Таблица 20 Интенсивность реакций фагоцитоза для человека в норме (нейтрофилы)
Учитывая, что главным итогом фагоцитоза является разрушение микробной клетки (завершенный фагоцитоз), для оценки функциональной активности фагоцитов используют показатель завершенного фагоцитоза и интенсивность «респираторного взрыва» в клетках (продукция активных форм кислорода, оказывающих бактерицидное действие). Завершенность фагоцитоза оценивают при культивировании лейкоцитарной взвеси с микробными клетками (время культивирования с каждым видом микроорганизмов устанавливают экспериментально) с последующим определением фагоцитарного индекса (учитывают только поглощенные нейтрофилами, но неразрушенные микробные клетки). Интенсивность окислительного взрыва при фагоцитозе определяют при помощи НСТ-теста и хемилюминесцентным методом. Образуемые фагоцитами активные формы кислорода (супероксидный анион-радикал, перекись кислорода, гидроксильный радикал, синглетный кислород, гипохлорная кислота, хлорамины и продукты перекисного окисления липидов) способны восстанавливать желтый краситель нитросиний тетразолий (НСТ) с формированием в цитоплазме клеток осадка темно-синего формазана (учитывают долю формазан-положительных клеток в процентах). При инкубации лейкоцитов здоровых людей только с красителем доля формазан-положительных клеток обычно не превышает 10%, в присутствии индукторов окислительного взрыва (клеток микроорганизмов, бактериальных липополисахаридов и др.) может достигать 100%. Снижение доли формазан-положительных клеток свидетельствует о дефектности кислородзависимого механизма бактерицидности фагоцитов. Уровень хемилюминесценции при фагоцитозе также характеризует интенсивность «респираторного» взрыва. Метаболиты активированного кислорода, взаимодействуя с люминесцирующими посредниками (люминол, люцигенин и др.), вызывают хемилюминесценцию фагоцитов. Доказана высокая степень корреляции между уровнем хемилюминесценции фагоцитов и киллингом, поэтому определение хемилюминесценции лейкоцитов также используется как один из критериев их способности к завершенному фагоцитозу (рис. 13).
Рис. 13. Микрофотография мазка лейкоцитарной взвеси, инкубированной с микробной нагрузкой (увеличение Х100, окраска по Романовскому-Гимзе). Дата добавления: 2015-01-12 | Просмотры: 2517 | Нарушение авторских прав |
