АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Использование иммуносорбентов для определения антител при пищевой аллергии

Сущность иммуносорбции заключается в фор­мировании комплексов антиген—антитело, когда один компонент находится в твердой фазе и специфически извлекает из раствора другой.

Белковые антигены, прочно фиксированные на целлюлозе, представля­ют собой специфический иммуносорбент. При соприкосновении такого им-муносорбента с соответствующей сывороткой происходит прирост белка, что указывает на присутствие специфических антител в сыворотке [Студени-кин М. Я., Соколова Т. С., 1971]. Для использования в пашей работе (Т.С.Со­колова. Т. Е. Фокина) были приготовлены иммуносорбенты с яичным кри­сталлическим альбумином, сухим обезжиренным молоком, антигеном мяса и рыбы. С помощью этих иммуносорбентов определяли антитела в сыворот­ках крови у детей, страдающих кожными и респираторными формами ал­лергии с подозрением па пищевую сенсибилизацию. Контролем служило со­держание соответствующих антител в донорских сыворотках.

Исследования показали, что сенсибилизация к пищевым анти­генам чаще встречается у детей с кожными формами аллергии (экзема, нейродермит, отек Квинке, крапивница и т. д.), нежели у детей с бронхиальной астмой. Например, антитела к яичному белку обнаружены у 50% детей с кожной аллергией и только у 16% детей с бронхиальной астмой. У детей с указаниями на непе­реносимость яиц в анамнезе антитела обнаружены в 2/з случаев а у больных без указаний на непереносимость—в '/5 случаев. Име­лась разница и в количестве определяемых антител (от 10 до 150 мкг/мл). В контрольной группе, где использовали донорские сыворотки, антитела обнаружены только в одном случае. Обнару­женные антитела оказались термолабильными, что позволяет отнести их к реагинам. Метод иммуносорбентов достаточно специ­фичен, что позволяет рекомендовать его для специфической диагностики.

Радиоаллергосорбентный тест (PACT). В последние годы раз­работан метод выявления специфических антител различных классов в сыворотках больных аллергическими болезнями. В 1967 г. Wide, Bennich, Johansson нашли способ обнаружения специфических антител класса IgE к неинфокционным аллерге­нам. Оказалось, что концентрация IgE в сыворотке у больных пол-линозом и бронхиальной астмой выше, чем у лиц контрольной группы. На этом было основано предположение, что данный имму-ноглобулин близок к антителам-реагинам, и для их идентифика­ции был предложен весьма чувствительный радиоаллерго-сорбент-ный тест. С помощью этого метода производится количественное определение аллерген-специфических IgE в крови.

Интересующий исследователя аллерген ковалентно присоединяется к бу­мажному диску и при добавлении сыворотки связывается с антителом, если в сыворотке имеются соответствующие данному аллергену IgE. После отмы-вання несвязавшихся (неспецифических) IgE добавляются антитела IgE, меченные радиоактивным йодом. Образуется комплекс: аллерген на бума­ге + специфический IgE+аптитела к IgE. Несвязавшиеся антитела к IgE удаляются. Радиоактивность этого комплекса легко определяется на гамма-счетчике. Чем больше радиоактивность, тем больше специфических IgE в сыворотке пациента. Ценность метода состоит и в том, что для теста с од­ним аллергеном необходимо всего 0,05 мл сыворотки больного и можно изучить сразу несколько аллергенов.

Исследования, проведенные в Институте педиатрии АМН СССР, показали высокую специфичность этого метода. Совпадение данных, полученных методов PACT и другими аллергологически-ми тестами, доходило до 65—82% [Соколова Т. С., и др., 1976;

Соломенцева В. С., 1978; Ботвиньева В. В., 1983; Ревякина В. А., 1983; Парцалис Е. М., 1983].

Метод PACT позволяет определять специфические иммуногло-булины не только в сыворотке, но и, что особенно ценно, в секре­тах: слюне, желудочном содержимом, копрофильтрах и т. д. По мнению ряда исследователей, определение специфических имму-ноглобулинов в секретах информативнее, чем в сыворотке крови [Парцалис Е. М., 1983].

В настоящее время, несмотря на внедрение столь современных приемов лабораторной диагностики, как PACT, не утратили своего значения и более простые методы, основанные па реакциях клеток крови, не требующие практически никакой аппаратуры.

Дата добавления: 2015-09-18 | Просмотры: 558 | Нарушение авторских прав