АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Кормах и патологическом материале

Цель занятия: Освоить методы обнаружения остатков пестицидов в кормах и патологическом материале.

Биологический анализ. На основании ботанического, микологического и химического анализов не всегда можно установить причину отравления. Иногда возникает необходимость в использовании биологических методов исследования, в том числе и в искусственном отравлении подопытных животных, которым с этой целью скармливают подозрительный корм или вводят вытяжку из такого корма (биоконтроль: вводят внутрь или подкожно, наносят на кожу растворы, взвеси химически подозрительных веществ).

Испытание пестицидов на насекомых. Метод «сухой пленки» (А.В. Николаев). Основной прием метода заключается, в том что подопытных насекомых (комнатных мух, плодовых мушек-дрозофил и др.) выдерживают на «сухой пленке» токсического вещества, получаемой испарением досуха части образца экстракта объекта исследования. Исследуемый ядохимикат мотет быть нанесен в виде кристаллов или раствора.

Обнаружение пестицидов с помощью комнатных мух. Исследуемый объект (25-50г.) заливают ацетоном, плотно закрывают склянку и оставляют на 8-10 часов при комнатной температуре. Содержимое склянки периодически встряхивают. Затем ацетоновый экстракт фильтруют в чашку Петри и оставляют до полного испарения ацетона. В чашку помещают 20-30 мух. Для контроля столько же мух помещают в другую чашку Петри, где находится остаток ацетонового экстракта из нормального (не отравленного) объекта. Для получения более точных результатов одновременно ставят 2-3 пробы с подопытными насекомыми и одну контрольную.

Клинические признаки отравления комнатных мух фосфорорганическими пестицидами. При соприкосновении мух с поверхностью, обработанной ФОС, почти тотчас наблюдается активизация насекомых (усиленный лет их). Очистительный рефлекс почти не проявляется. Через некоторое время насекомые становятся сонными, затем у них появляется паралич ног, мухи часто прокидываются на спину и проделывают круговые движения. Отделенные конечности мух проявляют в некоторых случаях короткий аутотремор (непрерывная слабая дрожь или однократное сильное (одну минуту) вытягивание и сгибание ножек). Он проявляется как правило в первые 15-60 минут после принятия мухами спинного положения. После обдувания ножек воздухом аутотремор не возобновляется. Через 10 часов подсчитывают количество погибших мух. Метод позволяет обнаружить 0,5 кг тиофоса, метафоса и других ФОС в пробе.

Клинические признаки отравления комнатных мух хлорорганическими пестицидами.(ДДТ). Через некоторое время после соприкосновения насекомых с поверхностью, с которой испарился ацетоновый экстракт, полученный их материала, содержащего ДДТ, у мух наблюдается возбужденное состояние, характеризующееся энергичными и беспорядочными движениями или длительной очистительной реакцией. Затем наступает парез и паралич конечностей, вследствие чего мухи делают резкие круговые движения на месте, сильно жужжат, падают на спину, пробуют подняться, но обычно им это не удается. Постепенно паралич охватывает все конечности.

Обнаружение остатков пестицидов кормлением комнатных мух. Готовят эфирный экстракт из исследуемого материала, как описано выше. Смешивают его с сахаром, осторожно подсушивают для удаления эфира, затем прибавляют воды для растворения сахара и ставят в доступное для мух место. Через 24 часа учитывают результаты опыта.

Определение гексахлорана и ДДТ. В кристаллизатор помещают испытуемый материал в количестве 25 г и закрывают сверху марлей, под которую впускают 10-20 мух. В точно такой же кристаллизатор помещают мух для контроля без испытуемого материала. Гибель мух через 8-12 часов в кристаллизаторе с испытуемым материалом свидетельствует о наличии гексахлорана и ДДТ.

Реакция на расширение и сужение зрачков. Атропин. К остатку из хлороформенной вытяжки аммиачного раствора добавляют несколько капель разведенной соляной кислоты. Раствор выпаривают на водяной бане досуха. Полученный остаток растворяют в нескольких каплях воды и наносят на конъюнктиву глаза кошки. При наличии атропина наблюдается резкое расширение зрачков.

Эфедрин. Из исследуемого растения или содержимого желудка нужно приготовить настой, выпарить его и ввести концентрат в конъюктивальный мешок глаза кошки. При наличии эфедрина наступает побледнение конъюктивы глаза и расширение зрачка. Действие продолжается боле 2 часов.

Ареколин, пилокарпин, физостигмин. Исследуемый остаток растворяют в нескольких каплях воды, полученный раствор наносят на конъюктиву глаза кошки. В присутствии ареколина, физостигмина, пилокарпина зрачок сужается.

Проба на токсичность полыни. 10-15 г веточек полыни кипятят в небольшом количестве воды 10-15 минут, часто помешивая. Отвар процеживают через марлю и выпаривают до тех пор, пока не останется 10-15 мл жидкости, т.е. столько, сколько было взято сухого растения; 0,25-0,5 мл отвара вводят подкожно белой или серой мыши. Мышь погибает через 35-55 минут характерных судорожных явлений.

Проба на наличие никотина. Лягушке подкожно вводят фильтрат. При наличии ничтожных доз никотина (0,5 мг) у лягушки наступают судорожные подергивания мышц, затем развивается так называемое «никотиновое положение»: передние лапки скрещиваются впереди грудины, бедра отводятся под углом к позвоночнику, голени соприкасаются над крестцом. При этом замечается ригидность передних лап.

Реакция на вех ядовитый. По сообщению Г.С. Зеленко, кошка после поедания мяса, смоченного вытяжкой из желудка отравившегося животного, погибла в течение 15 минут. Это может быть использовано в качестве биологической пробы. Считается также пригодной биологическая проба на лягушках. Если ввести лягушке подкожно 0,5 мл эфирного экстракта из содержимого желудка или растения, то у лягушки развиваются тонико-клонические судороги.

Проба на наличие гликозидов наперстянки. Выпаренный фильтрат испытуемой среды (до нескольких капель) наносят пипеткой на обнаженное, путем треугольной вырезки, сердце лягушки. Сердце лягушки останавливается в систоле уже при наличии 1-2 г гликозидов наперстянки.

Проба на лютики. Некоторое количество зеленых лютиков, съеденное матерью, иногда относительно мало нарушают ее здоровье, но с молоком выделяются ядовитые начала, опасные для теленка–сосуна. Опасность допуска телят к матери совпадает с периодом наиболее заметного проявления признаков отравления у самой матери. В эксперименте молоко коров становилось резко токсичным через 10-12 часов после скармливания им опасных количеств растения. Заболевания теленка начинается вскоре после подсоса.

Дата добавления: 2015-02-06 | Просмотры: 857 | Нарушение авторских прав