АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Методы определения сапонинов в растениях и кормах

Прочитайте:
  1. Cовременные методы лечения миомы матки
  2. I. Иммунология. Определение, задачи, методы. История развитии иммунологии.
  3. I. Классификация и определения
  4. II) Методы исследования и симптомы поражения III, IV, VI пары ЧН
  5. II. Дополнительные методы
  6. II. Инструментальные методы диагностики
  7. II. Неизотопные методы
  8. III. Методы искусственной физико-химической детоксикации.
  9. III. Перспективные методы лечения инсулинозависимого сахарного диабета
  10. III. Экстракорпоральные методы детоксикации

Качественная проба. Гемолитическая проба. Проба основана на гемолизе эритроцитов.

Реактивы. 1 Физиологический раствор хлористого натрия: 9 г хлористого натрия растворяют в 1000 мл дистиллированной воды.

2 5%-ная взвесь эритроцитов.

Кровь берут из яремной вены любого животного в стеклянный стаканчик, дефибринируют ее круговым помешиванием деревянной палочкой в течение 10—^минут. Фибрин с палочкой удаляют, а плазму с эритроци­тами дефибринированной крови фильтруют через 2 слоя марли. Фильтрат смешивают с 2—3 объемами физиологи­ческого раствора поваренной соли и производят центри­фугирование в течение 8—10 минут. Во время центри­фугирования эритроциты оседают на дно пробирки, а сверху остается слегка окрашенная в розовый цвет жидкость. Затем прозрачную розовую жидкость осторожно отсасывают, стараясь не задевать слоя эритроци­тов, после чего к нему доливают до первоначального уровня физиологический раствор поваренной соли и снова центрифугируют. Если после второго промывания жидкость над эритроцитами стала бесцветной и прозрач­ной, то на этом заканчивают промывку эритроцитов, в противном случае промывку повторяют третий раз. За­тем берут 0,5 мл осадка отмытых эритроцитов и к ним добавляют 9,5 мл физиологического раствора.

Исследование материала проводят следующим обра­зом. В колбочку помещают 1 г измельченного, сена или муки, или отрубей и добавляют 10 мл физиологического раствора поваренной соли, измельченное сено ставят на 10 минут в кипящую водяную баню (при частом поме­шивании), а муку или отруби экстрагируют 15 минут при комнатной температуре, периодически встряхивая. После этого фильтруют через бумажный фильтр. Полу­ченный фильтрат в количестве 2 мл помещают в про­бирку. Такое же количество физиологического раствора хлористого натрия наливают в другую пробирку. Затем добавляют по 0,5 мл 5%-ной взвеси эритроцитов в обе пробирки, встряхивают и оставляют их в штативе. Че­рез 5—10 минут учитывают результат. При наличии са­понинов в исследуемом извлечении (первая пробирка) наступит гемолиз эритроцитов, тогда как в контрольной (второй) пробирке гемолиза не будет

 

Контрольные вопросы:

1 Приготовления 5%-ой взвеси эритроцитов?

2 Определение сапонинов качественной пробой?


Дата добавления: 2015-02-06 | Просмотры: 830 | Нарушение авторских прав



1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 | 34 | 35 | 36 | 37 | 38 | 39 | 40 | 41 | 42 | 43 | 44 | 45 | 46 | 47 | 48 |



При использовании материала ссылка на сайт medlec.org обязательна! (0.002 сек.)