АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Методы определение солонина

Качественная проба. Проба основана на цветной реакции в результате взаимодействия солонина с реактивами. С клубня картофеля делают несколько срезов толщиной около миллиметра:

1 от верхушки до основания по оси, делящей клубень на две равные половины;

2 поперечные – у основания и верхушки клубня;

3 с боков клубня;

4 в участках около глазков;

Срезы раскладывают по фарфоровой чашке или на часовом стекле. На срезы наносят по каплям вначале уксусную кислоту, затем серную кислоту и, наконец несколько капель перекиси водорода. При наличии соланина почти немедленно появляется резкое темно-малиновое или красное окрашивание. При отсутствии окрашивания или появления бугровой окраски реакция отрицательная. Моча животных, отравленных соланином, суживает зрачок у кошки.

Количественное определение. Содержание соланина в различных частях картофеля колеблется (в процентах): в клубнях от 0,002 до 0,004, в шелухе от 0,005 до 0,01, в зеленой ботве от 0,05 до 0,25, в цветах от 0,6 до 0,7, в ягодах до 1, в картофеле с зеленой кожурой до 0,5.

Количественное определение основано на извлечении и осаждении соланина из исследуемого материала.

Для исследования берут 300г картофеля, измельченного на терке. К полученной массе прибавляют 250 мл дистиллированной воды и настаивают при комнатной температуре в течение 30 минут, периодически помешивая. Затем жидкую кашицу переносят в плотный льняной мешочек и хорошо отжимают под прессом. Выжимки трижды обрабатывают 0,2%-ным раствором уксусной кислоты (по 250-300 мл) и после каждой обработки снова отжимают под прессом.

Всю отжатую жидкость собирают в фарфоровую чашку, подщелачивают аммиаком до слабощелочной реакции, добавляют 10 г инфузорной земли и выпаривают на водяной бане досуха. При выпаривании появляющуюся на краях чашки коричневую массу периодически смывают выпариваемой жидкостью и небольшим количеством теплой дистиллированной воды. Полученный порошок помещают в колбу, снабженную обратным холодильником, добавляют 125 мл 95⁰ спирта и 30 минут кипятят в водяной бане. Прибор после охлаждения разбирают и содержимое фильтруют. Осадок помещают обратно в колбу, затем добавляют 125 мл свежей порции спирта и кипятят (операцию повторяют 4 раза). Спиртовые вытяжки собирают в колбу, из которой отгоняют спирт. К полученному остатку добавляют 100 мл дистиллированной воды, подкисленной 5 каплями уксусной кислоты, смешивают и фильтруют. К фильтрату прибавляют аммиак до слабощелочной реакции, после чего нагревают 30 минут на кипящей водяной бане.

При наличии соланина образуются хлопья, которые отфильтровывают и промывают 2,5%-ным раствором аммиака. Полученный осадок окрашивается в слабо-коричневый цвет. Для получения чистого соланина осадок растворяют в 30 мл теплого спирта, фильтруют, спирт выпаривают на водяной бане. Остаток растворяют в 100 мл дистиллированной воды, подкисленной уксусной кислотой (5-8 капель), и снова осаждают аммиаком.

Такую очистку повторяют 2-3 раза.

Белый осадок соланина, собранный на предварительно взвешенный фильтр, сушат при температуре 100⁰ до постоянного веса.

При количественном определении необходимо учитывать, что при осаждении соланина аммиаком в 100мл аммиака остается 2,75 мг соланина.

Пример. После высушивания исследуемого материала получено 665 мг соланина и израсходовано 200 мл аммиака на осаждение. Тогда содержание соланина (в мг %) составит:

665+5,5х100

Определение соланина в высушенной и мелко измельченной ботве картофеля и силосе производится аналогично. В патологоанатомическом материале из трупов животных соланин обнаружить не удается.

2. Навеску 50г сухого, тонко измельченного клубня (или ботвы) картофеля помещают в колбу, соединенную с обратным холодильником, добавляют 150 мл этилового спирта и кипятят 30 минут при частом взбалтывании.

Охлажденный экстракт фильтруют через воронку Бюхнера и бунзеновскую колбу. Остаток вновь подвергают экстрагированию спиртом (по 100-150 мл). Извлечение спиртом повторяют 4 раза. Все полученные спиртовые экстракты соединяют вместе. Спирт отгоняют на водяной бане. К почти сухому остатку добавляют 150 мл дистиллированной воды, подкисленной уксусной кислотой.

Полученный мутный раствор центрифугируют. Верхний слой сливают, а в остаток добавляют 1%-ный раствор уксусной кислоты и опять центрифугируют; промывание повторяют 2 раза. Полученные промывные воды соединяют с первой вытяжкой и постепенно приливают 5%-ный раствор аммиака до щелочной реакции на лакмус. После этого нагревают 30 минут на кипящей водяной бане. Если во время нагревания весь аммиак улетучится, его добавляют. При нагревании выпадает хлопьевидный осадок соланина. Осадок солонина центрифугируют. Затем его растворяют в спирте, спирт отгоняют. Остаток растворяют в воде, подкисленной уксусной кислотой, и после центрифугирования осаждают аммиаком.

Такую очистку повторяют 2-3 раза. Последний раз соланин фильтруют через бумажный фильтр, предварительно взвешенный. Осадок на фильтре промывают 1%-ным раствором аммиака и высушивают при температуре 100⁰ до постоянного веса. Вес полученного соланина во взятой навеске пересчитывают на процентное содержание.

Контрольные вопросы:

1 Качественное определение соланины?

2 Количественное определение соланины?

Дата добавления: 2015-02-06 | Просмотры: 4221 | Нарушение авторских прав