Методы определения госсипола
Определение свободного госсипола в хлопчатниковом жмыхе:
1. Анилиновый метод. Извлечение госсипола производится из воздушно-сухого жмыха обезвоженным серным эфиром в аппарате Сокслета в течение 72 часов.
По окончании экстракции часть эфира удаляют и в экстракт приливают 2 мл анилина. Снова отгоняют эфир. В остаток приливают 4 мл пиридина. Смесь энергично встряхивают и оставляют на четверо суток. Затем раствор фильтруют через тигель Гуча и осадок на фильтре промывают петролейным эфиром. Тигель с осадком дианилин- госсипола сушат при температуре 1000 до постоянного веса. Вес осадка умножают на 0,775 и таким образом определяют количество госсипола во взятой навеске жмыха.
Если нет тигля, можно пользоваться маленькой стеклянной воронкой и обыкновенным складчатым фильтром. Фильтр должен быть предварительно выдержан в эфире, высушен при температуре 1000 и взвешен.
2. Сернокислотный метод. Метод основан на способности госсипола под действием серной кислоты окрашиваться в ало-красный цвет. Для использования небольшие кусочки жмыха (около 200г) из разных мест нескольких плиток и измельчают в ступке в мелкий порошок. Из равномерно перемешенной массы жмыхового порошка отвешивают навеску 20-40 мг и помещают на стекло. Все комочки размельчают, а шелуху семян отбрасывают. Навеску жмыха равными частями распределяют на 20-30 предметных стеклах, смачивают 1-2 каплями концентрированной серной кислоты, препарат перемешивают и покрывают покровным стеклом.
Приготовленный таким образом препарат рассматривают под микроскопом при малом увеличении и подсчитывают окрашенные под действием серной кислоты круглые или овальные железки, из которых вытекает струйка алой жидкости, а также круглые алые пятна с едва заметными остатками оболочки.
Эту работу следует производить по возможности быстро при дневном свете или лампе дневного света. Каждый отдельный препарат следует смачивать серной кислотой только перед его рассмотрением под микроскопом.
Подсчитывают общее количество окрашенных пятен во всех препаратах (20-30). После этого процент госипола в жмыхе начисляют по формуле:
Х = 64
где: 0,085 – постоянный коэффициент госсипола;
64 – количество подсчитанных алых пятен на предметных стеклах;
20- навеска жмыха (в мг).
Определение госсипола в печени. Определение основано на образовании железо- гемосидерина от воздействия железосинеродистым калием на измененную печень.
Реактивы. 1. 2%-ный водный раствор железосинеродистого калия (красная кровяная соль – К3Fe (CN)6).
2. 1%-ный раствор соляной кислоты.
Реактивы смешивают в соотношении 1: 1,5, в полученную смесь опускают тонкий срез печени. При наличии госсипола печень окрашивается в синий цвет (проба будет положительной и от лошадей, больных энцефаломиелитом). Параллельно ставят пробу с печенью от нормального животного (для сравнивания).
Определение госсипола в моче. В мочу добавляют равный объем солянокислого раствора желтой кровяной соли (2,0г желтой кровяной соли + 100 мл 1% -ного раствора соляной кислоты). При наличии госсипола моча окрашивается в цвет берлинской лазури или происходит окрашивание осадка мочи в синий цвет.
Контрольные вопросы:
1 Определение госсипола в хлопчатниковом жмыхе?
2 Определение госсипола в печени?
3 Определение госсипола в моче?
Дата добавления: 2015-02-06 | Просмотры: 1496 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 | 34 | 35 | 36 | 37 | 38 | 39 | 40 | 41 | 42 | 43 | 44 | 45 | 46 | 47 | 48 |
|