Тема: Токсикологический анализ при отравлениях гликозидами
Цель занятия: Освоить метод определения гликозидов на лягушке.
Биологический метод определения гликозидов. Метод основан на способности гликозидов вызывать систолическую остановку сердца животных.
Предварительно готовят извлечение – отвар или настой. Для этого в колбочку или фарфоровую инфундирку помещают 3-5 г тонко измельченного растения, добавляют 30-50 мл холодной дистиллированной воды, закрывают крышкой и нагревают в течение 35 минут, настой-15 минут. По истечении этого срока отвары фильтруют горячими, а настой - после охлаждения.
Определение проводится на лягушках с обнаженным сердцем. Для удобства инъекции испытуемого препарата и дальнейшего наблюдения за действием его, лягушку накалывают на пробковую пластинку брюшком вверх. Булавки вкалывают в перепонки между пальцами верхних и нижних конечностей, лапки вытягивают в соответствующие стороны, с тем чтобы лишить лягушку возможности произвольных движений, после чего приступают к обнаружению сердца. Для этого с тонким пинцетом захватывают кожу на груди между верхними конечностями и вырезают треугольное отверстие. Вырезанный лоскут не должен быть велик. Общие размеры отверстия должны быть таковы, чтобы выведенное в дальнейшем сердце свободно помещалось на лишенном кожу участке и не прикасалось к наружной стороне последней. Это необходимо потому, что выделяемый кожей секрет способен действовать отравляющим образом на сердечную мышцу лягушки.
Затем удаляют ножницами хрящевую часть грудины с мускулатурой, нарушают целостность сердечной сорочки, легким надавливанием пальца на брюшную стенку по направлению к голове выталкивают сердце в образовавшееся отверстие. После обнаружения сердца лягушкн вводят по 0,3 мл исследуемого отвара или настоя в лимфатические бедренные мешки. Для этого оттягивают кожу пинцетом на грудной поверхности и через треугольное отверстие, лишенное кожи, вводят тонкой длинной иглой исследуемый препарат. Наблюдение ведут в течение 60 минут. При наличии гликозидов произойдет остановка сердца в стадии систолы, т.е. сердце будет максимально сокращено и бледно окрашено.
Контрольные вопросы:
1 Как готовят отвар или настой?
2 Определение гликозидов на лягушке?
Дата добавления: 2015-02-06 | Просмотры: 1191 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 | 34 | 35 | 36 | 37 | 38 | 39 | 40 | 41 | 42 | 43 | 44 | 45 | 46 | 47 | 48 |
|