АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Тема: Определение токсичности патогенных грибов

Цель занятия: Ознакомить студентов с методами определения токсичности патогенных грибов.

В дифференциальной диагностике микотоксикозов важную роль играет определение токсичности ядов. С этой целью выращенную на агаре культуру патогенных грибов сих ядовитыми продуктами скармливают животным тех видов, среди которых выявлено заболевание. Биологическую пробу ставят на лабораторных объектах.

Сначала готовят экстракты из выращенных на плотных средах культур. Пленку гриба помещают в пробирку, заливают водопроводной водой и оставляют на 24 часа при температуре 4-10 ⁰ С.

Через сутки на предметное стекло наносят одну каплю взвеси простейших (парамециум каудатум) и две капли исследуемого экстракта, после чего наблюдают в течение 24 часов, периодически просматривая объект исследования под малым увеличением микроскопа. Высокотоксичные экстракты патогенных грибов убивают парамеций в первые 3 минуты. Токсичные экстракты губительно воздействуют на парамеций в течение 8-10 минут, слаботоксичные грибы на морфологических изменений, ни гибели парамеций не вызывают.

Определение токсичности грибов на животных. Необходимо приготовить стерильные экстракты из культур гриба. Для этого берут навеску культуры и заливают ее стерильным физиологическим раствором в соотношении 1:3, выдерживают 1 час при постоянном помешивании. Полученный экстракт отжимают через несколько слоев марли и фильтруют через фильтр Зейца.

Лабораторным животным (белым мышам, крысам, кроликам, голубям, котятятам) его вводят подкожно в объеме 0,5-3 мл, внутрибрюшинно –0,5-20 мл. за животными наблюдают в течение 2 недель. Если культура гриба токсична, то у них развивается токсикоз (общее недомогание, тремар, парезы).

При подкожном введении возможна местная воспалительная реакция, при внутрибрюшинном - перитонит.

Из химических методов обнаружения ядов патогенных грибов доступны для практики пробы с соляной и трихлоруксусной кислотами.

В пробирку берут несколько капель эфирного экстракта из культуры гриба и добавляют 1-2 капли кислоты. При положительной реакции на токсины грибов из рода фузариум содержимое пробирки приобретает ярко красный цвет при добавлении соляной кислоты и зеленый при добавлении трихлоруксусной.

Методы определения токсичности кормов. Наиболее известна –кожная проба. Для приготовления экстракта берут 50 г. корма, измельчают, если нужно подсушивают, затем в аппарате Соксклета экстрагируют токсины эфиром в течение 6ч. экстракт упаривают до 10-15 мин. токсины можно извлекать в стеклянных колбах или банках. Берут 100 гр сена, измельчают заливают 200мл эфира, измельчают, заливают 200 мл эфира, настаивают в течение 24 часов при комнатной температуре и упаривают до густой консистенции.

Затем на выстриженный участок кожи кролика дважды с интервалом в одни сутки наносят полученный экстракт, принимая меры, чтобы кролик не смог слизать исследуемый экстракт. Учет реакции проводят в течение 3-7 дней.

По степени токсичности различают: первую степень- покраснение кожи, повышение чувствительности - покраснение, болезненность, шелушение; вторую степень- покраснение, болезненность, шелушение, утолщение кожи, мелкая сыпь в виде пузырьков темноватого окрашивания; третью степень - покраснение, выраженное утолщение кожи, болезненность и складчатость, поверхностный некроз, образование струпа; четвертая степень - покраснение, сильный отек в виде валика на нижней границе участка, сухой некроз, сплошной толстый струп.

Токсичность кормов устанавливают также биопробой на животных по клиническим признакам и данным патологоанатомических изменений. Это достигается путем скармливания белым мышам испорченного корма с предварительной выдержкой их на голоде или введением под кожу экстрактов исследуемых кормов. Иногда проводят пробу на бородках кур. Исследуемый экстракт вводят в одну из бородок, а вторая служит контролем. Степень воспалительной реакции бородки служит показателем токсичности экстракта.

Метод тонкого слоя хроматографии дает возможность определить состав и количество ядов микозного происхождения.

Общие меры профилактики микотоксикозов предусматривают скармливание животным доброкачественных кормов, которые заготавливают в оптимальные сроки. Злаки необходимо скашивать до цветения, хорошо просушивать, правильно хранить в скирдах, укрывая сено пленкой или слоем соломы. Особое внимание должно быть уделено хранению концентрированных кормов как наиболее питательных и ценных.

Консервированных грубых кормов 25%-ным раствором аммиака из расчета из расчета 10 л/ц сена или соломы предупреждает прорастание многих грибов. С целью консервирования сена и соломы применяют каустическую кальцинированную соду, негашеную известь. Для снижения токсичности зерна используют пиросульфат натрия (5-10кг/т) или термическую обработку, кроме кормов, которые поражены грибами рода фузариум.

Зерно первой и второй степени токсичности, пораженное грибами из рода пенициллиум, ризопус, мукор, подлежит сухой термической обработке с помощью АВМ-0,65; СБ-1,5 в течение 10-15 мин, а также в котлах под давлением 1-1.2 атм.

Важным условием профилактики микотоксикозов является соблюдение агротехники возделывания кормовых культур, для чего проводят своевременное лущение стерни, раннюю вспашку зяби, соблюдают правила скирдования сена и соломы.

Выпасанию животных на пожнивных полях только после предварительного анализа остатков растений на безвредность.

Вопросы для самопроверки

Дифференциальная диагностика микотоксикозов:

1 Метод определения токсичности грибов на животных.

2 Химический метод обнаружения ядов патогенных грибов.

3 Определение токсичности кормов по кожной пробе на кроликах.

Контрольные вопросы:

1 Определение токсичности патогенных грибов на животных?

2 Методы определение токсичности кормов?

3 Меры профилактики микотоксикозов?

Дата добавления: 2015-02-06 | Просмотры: 2151 | Нарушение авторских прав