СУЛЬФИТРЕДУЦИРУЮЩИЕ КЛОСТРИДИИ
Среди многочисленных патогенных и сапрофитных видов рода Clostridium в качестве санитарно-показательных привлекают микроорганизмы, постоянным местом пребывания которых является кишечник человека и теплокровных животных.
Поскольку только клостридии кишечного происхождения обладают редуцирующими (восстанавливающими) свойствами при росте на железосульфитных средах, этот признак является основным для суждения о санитарной показательности таких микроорганизмов.
Наиболее частым обитателем кишечника человека является Cl. perfringens, и, следовательно, именно этот микроорганизм может служить основным показателем фекального загрязнения.
В испражнениях новорожденных детей О. perfringens уже на 3-й день жизни обнаруживается в 3-4 %, на 5-й день - в 6 %, на 7-й день -69 %. У взрослых людей сульфитредуцирующие клостридии находят до 72-98 %, при этом титры достигают 10-8 – 10-10.
Биологические свойства Cl. perfringens представлены в главах 10,11.
Использование Cl. perfringens в качестве санитарно-показательного микроорганизма основывается также на том, что споры его во внешней среде не обладают высокой устойчивостью, в пищевых продуктах он размножается только при температуре 18-20°С и выше. Начиная с 6-8 ч. хранения, по мере нарастания общего количества бактерий размножение его замедляется, а затем полностью прекращается. Особенно чувствителен Cl. perfringens к кислой реакции среды.
Сульфитредуцирующие анаэробы выделяются из кишечника людей и животных преимущественно в виде вегетативных клеток, а в почве, как правило, сохраняются в форме спор. По отношению количества обнаруженных в исследуемом объекте вегетативных форм к числу спор можно судить о свежести фекального загрязнения. Это достигается путем сопоставления титров, полученных при исследовании нагретого в течение 15 мин при 80 °С (только споры) и ненагретого (споры и вегетативные клетки) материала.
Однако прогретые пробы могут показывать большее содержание сульфитредуцирующих анаэробов, чем непрогретые. Причиной является способность 95 % спор Cl. perfringens прорастать только после так называемого "теплового шока" (нагревание при 70 °С в течение 30 мин), что затрудняет количественный учет этого микроорганизма в непастеризованных материалах.
Присутствие Cl perfringens было обнаружено в 16-18 % проб молока после его промышленной пастеризации. При наличии оптимальных условий этот микроорганизм может интенсивно размножаться в пищевых продуктах и вызывать пищевые токсикоинфекции при их употреблении.
Сульфитредуцирующие клостридии используются в качестве санитарно-показательных микроорганизмов при исследовании пищевых казеинатов, также колбасных изделий, икры, специй, пряностей и др.
Определение сульфитредуцирующих клостридии основано на высеве определенного количества продукта и его разведений в ряд пробирок с полужидкой селективно-диагностической сульфит-железной средой, культивировании посевов при 37°С в течение 24-72 ч, учете результатов и определении минимального количества продукта, в котором обнаружены грамположительные неподвижные палочки, образующие яйцевидные или шарообразные споры и редуцирующие сульфит.
В 1 г казеината допускается не более 200 клеток О. perfringens.
Приготовление сульфит-железной агаровой полужидкой среды. К 100 см3 мясо-пептонного бульона или 100 см3 гидролизованного молока добавляют 1 г сухого дрожжевого экстракта или 5 см3 жидкого дрожжевого экстракта, 0,6-0,7 г агара, устанавливают рН 7,3 после стерилизации его показатель составит 7,1. Стерилизуют при 121 °С в течение 15 мин.
После стерилизации добавляют по 1 см3 горячих (75 °С) 5 %-ных водных растворов сульфита натрия и лимоннокислого железа, стерилизованных или приготовленных в асептических условиях без стерилизации на стерильной дистиллированной воде. Допускается замена сульфита натрия на гипосульфит натрия в количестве 0,1 г на 100 см3 среды, лимоннокислого железа на хлорное железо в тех же концентрациях. Среду перемешивают, разливают в стерильные пробирки по 10-12 см3 и используют для посева.
Сульфитредуцирующие клостридии на этой среде образуют колонии черного или серо-черного цвета на глубине не менее 1 см от поверхности среды (образуется черного цвета сернистое железо FeS).
При оценке эффективности технологии обработки питьевой воды определяют количество спор сульфитредуцирующих клостридии методом мембранной фильтрации или прямым посевом на железо-сульфитный агар. Споры сульфитредуцирующих клостридии не должны обнаруживаться в 20 см3 питьевой воды.
В качестве санитарно-показательного микроорганизма Cl perfringens используют также для контроля очистки сточных вод. Его преимущество перед кишечными палочками состоит в том, что он не размножается в отстойниках.
При комплексной санитарной оценке почвы и воды открытых водоемов наряду с кишечными палочками, энтерококками и бактериофагом учитывают Cl. perfringens, что позволяет определить давность фекального загрязнения.
Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 3128 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 | 34 | 35 | 36 | 37 | 38 | 39 | 40 | 41 | 42 | 43 | 44 | 45 | 46 | 47 | 48 | 49 | 50 | 51 | 52 | 53 | 54 | 55 | 56 | 57 | 58 | 59 | 60 | 61 | 62 | 63 | 64 | 65 | 66 | 67 | 68 | 69 | 70 | 71 | 72 | 73 | 74 | 75 | 76 | 77 | 78 | 79 | 80 | 81 | 82 | 83 | 84 | 85 | 86 | 87 | 88 | 89 | 90 | 91 | 92 | 93 | 94 | 95 | 96 | 97 | 98 | 99 | 100 | 101 | 102 | 103 | 104 | 105 | 106 | 107 | 108 | 109 | 110 | 111 | 112 | 113 | 114 | 115 | 116 | 117 | 118 | 119 | 120 | 121 | 122 | 123 | 124 | 125 | 126 | 127 | 128 | 129 | 130 | 131 | 132 | 133 | 134 | 135 | 136 | 137 | 138 | 139 | 140 | 141 | 142 |
|