АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Взятие крови, приготовление «тонкого мазка» и «толстой капли»

Для приготовления препаратов крови необходимо заблаговременно подготовить иглы, предметные стекла, стекла со шлифованными краями, спирт, эфир, гигроскопическую вату. Для обеспечения чистоты предметных стекол их кипятят в слабом растворе соды, затем моют с мылом в теплой воде, промывают в проточной водопроводной воде и вытирают чистым полотенцем. После этого их помещают в закрывающиеся банки со спиртом и выдерживают некоторое время.

Кровь обычно берут из мякоти последней фаланги безымянного или среднего пальца левой руки. Прокол производят острыми иглами одноразового пользования. Место укола протирают спиртом, а затем ватой, смоченной для быстрого обсушивания эфиром. Если кровь из ранки выступает плохо, то слегка массируют палец в направлении к месту укола или просят обследуемого сделать несколько энергичных сгибательных движений пальцами и кистью. Иногда производят повторный прокол. Когда от одного больного берут несколько мазков, а выступившая из пальца кровь свертывается, ее удаляют сухой ватой.

При изготовлении мазков палец держат проколом вверх. К выступившей капле крови прикасаются нижней поверхностью предметного стекла, отступив на 1,5—2 см от узкого края. Затем стекло переворачивают, берут в левую руку, а в правую - предметное стекло с шлифованными краями и сточенными углами. Его узким краем под углом 45° касаются капли крови. Кровь растекается по краю шлифованного стекла, после чего быстрым движением этого стекла вперед делают мазок. Последний должен быть тонким (эритроциты не должны налегать друг на друга) и располагаться в средней части стекла, не доходя до его боковых сторон и противоположного края, так как пораженные эритроциты в значительной степени группируются по периферии мазков. Мазки крови высушивают на воздухе, фикси­руют и окрашивают. Для фиксации применяют метиловый спирт (экспозиция 3-5 мин), этило­вый 96°С спирт (15 мин) или смесь Никифорова: абсолютный этиловый спирт и эфир в равных соотношениях (20 мин). Фиксатор можно нали­вать прямо на стекло, находящееся в горизон­тальном положении, но лучше пользоваться спе­циальными стаканчиками, в которые можно погружать сразу несколько препаратов. Фиксированные мазки высушивают на воздухе и окрашивают азур-эозином по методу Романовского—Гимза.

При изготовлении «толстых капель» палец поворачивают проколом вниз. К выступающим каплям крови прикасаются предметным стеклом, на которое берут 2-3 капли крови. Затем иглой или углом другого предметного стекла кровь размазывают, чтобы получить на стекле овал диаметром около 1 см или полосу длиной 2-3 см. Слой крови не должен быть слишком толстым, так как в последнем случае при высыхании он превращается в корочку и легко отстает от стекла. После изготовления «толстых капель» их высушивают, положив стекла на горизонтальную поверхность. Для ускорения высыхания стекла можно помещать в термостат (30-35°С). Нужно предохранять стекла от запыления, а также от мух и тараканов, которые охотно поедают влажную и подсохшую кровь.

Концентрированный раствор краски перед употреблением разводят дистиллированной во­дой из расчета 1-2 капли краски на 1 мл воды. Рабочий раствор краски наносят пипеткой на мазки, помещенные на дно стеклянной ванночки или на стеклянные палочки, соединенные попарно резиновой трубкой и положенные на края кюветки. Продолжительность окрашивания – 30-45 мин. После окраски препарат промывают слабой струей воды и высушивают на воздухе. На стекле поверх окрашенного мазка можно написать простым карандашом фамилию больного, номер и дату. Эта надпись хорошо сохраняется.

Дистиллированная вода для разведения краски должна иметь нейтральную или слабощелочную реакцию (рН 7,0—7,2). Число капель основного раствора на определенный объем воды и продолжительность окрашивания рекомен­дуется устанавливать для каждой отдельной серии краски путем предваритель­ных проб.

«Толстые капли» после высушивания на возду­хе окрашиваются краской Романовского-Гимза без предварительной фиксации. Техника окра­шивания такая же, как при окраске мазка. При этом происходит разрушение (гемолиз) эритроцитов и выход из них плазмодиев. Если «толстые капли» сохраняли неокрашенными более недели, то их следует предварительно обработать дис­тиллированной водой в течение 10-15 мин. Удалив со стекол дистиллированную воду вместе с выщелоченным гемоглобином, на них наливают красящий раствор. После окраски «толстой капли» препараты ополаскивают водой. Лучше всего промывать препарат, погружая его в баночку с водой, при этом следует соблюдать осторожность, чтобы не допустить смывания со стекла окрашенной капли крови.

Хранят окрашенные препараты завернутыми в бумагу, небольшими пачками, а лучше — в специальных папках с гнездами для каждого препарата. После микроскопирования иммерсионное масло удаляют мягкой фланелевой тряпочкой. Предварительно его можно растворять очищенным бензином. Для большей сохранности препаратов их можно покрывать раствором ор­ганического стекла в хлороформе.

Дата добавления: 2015-09-18 | Просмотры: 1100 | Нарушение авторских прав