Ход исследования. Приготовление мазков мокроты Поместить мокроту в центрифужную пробирку
Приготовление мазков мокроты
- Поместить мокроту в центрифужную пробирку.
- Добавить равное количество муколитика.
- Полученную смесь быстро перемешать.
- Поместить в термостат при температуре 37 °С на 5-15 мин.
- Развести смесью формалина и спирта (1: 1).
- Центрифугировать 10 мин при 1500 об/мин.
- Слить над осад очную жидкость.
- Осадок перенести на 4 —8 предметных стекол.
- Осадок нанести на стекло в виде тонкого мазка.
- Мазок высушить на воздухе.
Приготовление мазков лаважной жидкости
• Поместить лаважную жидкость в центрифужную пробирку.
• Добавить равное количество 50°-ного спирта и перемешать.
• Центрифугировать 20 мин при 2500 об/мин.
• Слить надосадочную жидкость.
• Осадок перенести на 4—8 предметных стекол.
• Осадок нанести на стекло в виде тонкого мазка.
• Мазок высушить на воздухе. Окраска мазков.
A) Скрининговая окраска по Романовскому-Гимзе
• Высушенный мазок фиксируют в смеси Никифорова в течение 10—15 мин.
• Опустить мазок в сульфатно-уксусный реагент на 10 мин.
• Промывать проточной водой в течение 5 мин.
• Высушить мазок на воздухе.
• Окрашивать 10 %-ной краской Романовского-Гимзы в течение 30 мин. Результат: цитоплазма трофозоитов голубоватая, ядро - розовое, внутрицистные тельца имеют фиолетовое ядро.
Б) Окончательная или специфическая окраска толуидиновым синим.
• Высушенный мазок фиксируют в 10 %-ном растворе формалина.
• Промыть дистиллированной водой.
• Опустить мазок в сульфатно-уксусный реагент на 5 мин.
• Реагент перемешать стеклянной палочкой.
• Оставить мазок в сульфатно-уксусном реагенте еще на 10 мин.
• Промыть проточной водой.
• Высушить мазок на воздухе.
• Окрашивать 0,15 %-ным толуидиновым синим в течение 3 мин.
• Промыть проточной водой.
• Высушить мазок на воздухе.
• Докрашивать в 0,25 %-ном растворе водного метанилового желтого в течение 2 мин.
• Промыть водой.
Результат: четко дифференцируется стенка пневмоцист, но не дает представления о клеточном содержимом; цисты сине-фиолетовые, тканевые элементы и фон - зелено-желтые.
B) Окончательная или специфическая окраска по Гомори-Грохоту.
• Высушенные мазки фиксируют в 10 %-ном растворе формалина в течение 5—10 мин.
• Промыть дистиллированной водой.
• Быстро подогреть раствор хромовой кислоты в стакане до 65 ° С.
• В нагретый раствор быстро погрузить мазки на 1 мин.
• Промыть дистиллированной водой.
• Опустить мазки в 1 %-ный раствор метабисульфита калия на 1 мин.
• Приготовить раствор: 25 мл рабочего раствора серебра + 25 мл дистиллированной воды +2 мл 5 %-ного водного тетрабората натрия + 15 мл диметилсульфоксида.
• Опустить мазки в приготовленный раствор.
• Подогреть до 90—95 °С, пока мазки не станут темно-коричневыми, а раствор светло-серым.
• Прополоскать мазки в трех сменах дистиллированной воды.
• Опустить мазки в 0,2 %-ный водный раствор тиосульфата соды на 1 мин.
• Промыть дистиллированной водой.
• Окрашивать лихтгрюном в течение 5 мин.
• Промыть дистиллированной водой.
Результат: цисты светло- или темно-коричневые (цвет зависит от толщины мазка), округлой или чашеобразной формы, окружающий фон и тканевые элементы зелено-желтые.
Г) Окраска акридином оранжевым.
• Высушенные мазки фиксируют в абсолютном метаноле в течение 2 мин.
• Окрасить рабочим раствором акридина оранжевого 10 мин.
• Промыть дистиллированной водой.
• Высушить окрашенные мазки на воздухе.
• Микроскопировать под масляной иммерсией при увеличении: объектив х 90 или х 100, окуляр х 7 или х 10.
Дата добавления: 2014-10-03 | Просмотры: 1096 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 | 34 | 35 | 36 | 37 | 38 | 39 | 40 | 41 | 42 | 43 | 44 | 45 | 46 | 47 | 48 | 49 | 50 | 51 | 52 | 53 | 54 | 55 | 56 | 57 | 58 | 59 | 60 | 61 | 62 | 63 | 64 | 65 | 66 | 67 | 68 | 69 | 70 | 71 | 72 | 73 | 74 | 75 | 76 | 77 | 78 | 79 | 80 | 81 | 82 | 83 | 84 | 85 | 86 | 87 | 88 | 89 | 90 | 91 | 92 | 93 | 94 | 95 | 96 | 97 | 98 | 99 | 100 | 101 | 102 | 103 | 104 | 105 | 106 | 107 | 108 | 109 | 110 | 111 | 112 | 113 | 114 | 115 | 116 | 117 | 118 | 119 | 120 | 121 | 122 | 123 | 124 | 125 | 126 | 127 | 128 | 129 | 130 | 131 | 132 | 133 | 134 | 135 | 136 | 137 | 138 | 139 | 140 | 141 | 142 | 143 | 144 | 145 | 146 | 147 | 148 | 149 | 150 | 151 | 152 | 153 | 154 | 155 | 156 | 157 | 158 | 159 | 160 | 161 | 162 | 163 | 164 | 165 | 166 | 167 | 168 | 169 | 170 | 171 | 172 | 173 | 174 | 175 | 176 | 177 | 178 | 179 | 180 | 181 | 182 | 183 | 184 | 185 | 186 | 187 | 188 | 189 | 190 | 191 | 192 | 193 | 194 | 195 | 196 | 197 | 198 | 199 | 200 | 201 | 202 | 203 | 204 | 205 | 206 | 207 | 208 | 209 | 210 | 211 | 212 | 213 | 214 | 215 | 216 | 217 | 218 | 219 | 220 |
|