 |
|
АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология |
Стратегия генома (взаимодействие вируса с клеткой)Для вирусов гриппа специфическими рецепторами являются соединения, содержащие сиаловую кислоту. На мембране клеток — разный состав сиалоолигосахаридов и липидных компонентов. Кроме того, у молекул гемаг-глютинина разных вирусов может быть разное строение «рецепторного кармана», который связывается с рецептором, образуя «эндо-цитарную вакуоль», в результате чего вирус проходит внутрь клетки путем эндоцитоза. В клетке происходит частичная депротеини-зация, и сердцевина вириона транспортируется к ядру клетки. На ядерной оболочке происходит завершение депротеинизации, т. е. удаление матриксного белка (М-белок), и в ядро проникает функционально активный нуклеокапсид. Геном минус-нитевой РНК не инфекционен, поэтому для своего функционирования нуждается в полимеразе, которая должна быть в самом вирионе. В ядре клетки происходит транскрипция генов, в которой участвуют полимеразный комплекс (РА, РВ1-РВ2) и белок NP. Вирус индуцирует синтез и процессинг клеточных мРНК, от которых белок РВ2 «откусывает» кэп-структуру и прилегающие 10—13 нуклеотидов. Они и являются праймером для синтеза вирусной мРНК. транспортируется в цитоплазму, где и кодирует синтез соответствующего белка на рибосомах. При репликации генома, которая идет в ядре клеток, транскрибируется вся нить сегмента РНК. Сначала образуется плюс-нить, затем на матрице образуется минус-нить дочерних РНК. Сборка нуклеокапсида происходит в ядре. Формирование вирусных частиц идет на клеточных мембранах, в которые к этому времени уже встроены гемагглютинин и нейраминидаза, а выход из клетки происходит путем «почкования», что типично для оболочечных вирусов. Антигенная структура. Вирусы гриппа имеют внутренние и поверхностные антигены. Внутренние антигены представлены нукле-опротеином (NP-белком) и М-белками. NP-и М-белки — это типоспецифические антигены. NP-белок способен связывать комплемент, поэтому тип вируса гриппа обычно определяют в РСК. Антитела к внутренним антигенам не оказывают защитного действия при гриппе. Поверхностные антигены — это гемагглютинин и нейраминидаза. Их структуру, которая определяет подтип вируса гриппа, исследуют в РТГА, благодаря торможению специфическими антителами ге-магглютинации вирусов, т. е. блокированию способности вириона присоединять эритроциты к активным участкам на своей поверхности. Поверхностные антигены являются протективными, так как действие защитных вируснейтрализующих антител в организме направлено именно на них. Структура поверхностных антигенов вирусов серотипа А постоянно изменяется, причем изменения Н- и N-антигенов происходят независимо друг от друга. В настоящее время известно 15 подтипов гемагглютинина и 9 подтипов нейраминидазы, но от человека стабильно выделяются только H1, H2, НЗ и N1, N2. Тип В более стабилен, хотя все же имеет 5 подтипов. Наиболее стабильной антигенной структурой обладает вирус гриппа типа С. Необычайная изменчивость вирусов гриппа типа А объясняется двумя процессами, которые получили названия антигенный дрейф и антигенный шифт: ♦ дрейф происходит постоянно и обусловлен точечными мутациями в тех сайтах генома, которые отвечают за синтез и структуру антигенных детерминант гемагглютинина и нейраминидазы. В результате в популяции вирусов постоянно появляются новые серова-рианты, которые незначительно отличаются от исходного штамма, но эти изменения не выходят за пределы подтипа. Новые варианты обусловливают периодические эпидемии гриппа, потому что через 2—3 года циркуляции любого штамма среди людей структура поверхностных протективных антигенов настолько изменяется, что выработанный ранее иммунитет лишь частично защищает от заболевания. Так коллективный иммунитет становится фактором отбора новых антигенных вариантов; ♦ шифт (англ. shift — скачок) обусловлен пересортировкой и полной заменой гена, кодирующего гемагглютинин или нейраминидазу определенной разновидности. Шифт происходит редко и обычно является результатом рекомбинаций, происходящих при попадании в одну клетку двух разных подтипов вирусов. В результате шифта полностью заменяется структура антигена и образуется новый подтип вируса, который становится причиной пандемии. Считается, что источником новых подтипов могут быть вирусы гриппа животных. Резистентность. В окружающей среде устойчивость вирусов — средняя. Вирусы гриппа чувствительны к высоким температурам (более 60 °С), УФ-облучению, жирорастворите-лям, но могут некоторое время сохраняться при низких температурах — в течение недели не погибают при температуре около +4 °С. Вирусы чувствительны к табельным дезин-фектантам. Эпидемиология. Грипп — антропоноз. Основной механизм передачи — аэрогенный, путь — воздушно-капельный (при кашле, чихании, разговоре). Также возможна контактная передача. Грипп — высококонтагиозное заболевание и часто протекает в виде эпидемий и даже пандемий. Люди очень восприимчивы к вирусам гриппа. Развитие эпидемии регулируется формированием среди людей «иммунной прослойки», т. е. постепенным увеличением числа переболевших и, следовательно, защищенных от данной разновидности вируса. Чаще и тяжелее болеют дети, как не имеющие стойкого противогриппозного иммунитета. Но смертность выше среди взрослых, особенно из группы риска (пожилые люди, а также пациенты с ослабленной резистентностью). Вспышки инфекции легко возникают в «замкнутых» коллективах. Периодически вирусы гриппа типа А вызывают пандемии. Юго-Восточная Азия (Китай) является эпицентром возникновения новых пандемических штаммов вируса типа А, так как там высокая плотность населения, тесный контакт с домашними животными и птицами, т. е. создаются условия для рекомбинации вирусов человека и животных (однако не все ре-комбинанты способны «выжить» в популяции людей). В периоды между пандемиями каждые 2—3 года повторялись эпидемии, вызванные вирусом типа А. Эпидемии гриппа В происходили раз в 4—6 лет. В XX в. наиболее известны три пандемии. В 1918—1920 гг. возбудителем пандемии стал вирус типа А (подтип H1N1). Грипп получил название «испанский». Во время этой тяжелейшей пандемии погибло более 20 млн человек. В 1957—1959 гг. возбудителем пандемии стал вирус типа А (подтип H2N2). Грипп получил название «азиатский» (вирус впервые был выделен в Сингапуре). Болело 1,5—2 млрд человек. В 1968-1970 гг. пандемическим штаммом стал вирус типа А (подтип H3N2). Грипп получил название «гонконгский», в соответствии с местом первичного выделения вируса. Болело около 1 млрд человек. Между описанными пандемиями нет одинаковых временных промежутков, и все они вызывались разными подтипами вируса гриппа А. Известно, что к моменту начала каждой следующей пандемии предыдущий пандемический штамм уже «уходил» из человеческой популяции. Однако считается, что эти вирусы продолжают циркулировать среди животных, сохраняя возможность «вернуться». Так, с 1977 г. наряду с вирусом подтипа A (H3N2) от людей опять стал выделяться вирус подтипа A (H1N1). И в последние годы в эпидпроцессе одновременно участвуют вирусы гриппа типа A (H3N2 и H1N1), а также вирус гриппа типа В. Поэтому именно такие разновидности вирусов включены в состав современных вакцин для профилактики гриппа. Однако, несмотря на создание профилактических средств, грипп относят к числу неуправляемых инфекций, поэтому так важна созданная ВОЗ программа глобального эпиднадзора за гриппом, в которой участвует и Россия. Патогенез. Обычно входные ворота инфекции — это верхние дыхательные пути, но вирус может проникнуть сразу в альвеолы, что вызывает развитие первичной острой пневмонии. У пациентов из групп высокого риска именно она — частая причина смерти. Первичная репродукция вирусов происходит в клетках эпителия респираторного тракта. Инфицированные клетки начинают вырабатывать интерферон, обладающий неспецифическим противовирусным действием. Развивается воспаление, отек, набухание базальной мембраны и происходит десквамация клеток поверхностного эпителия. Через поврежденные эпителиальные барьеры вирус гриппа А проникает в кровоток и вызывает виремию. Всасывание продуктов распада клеток также оказывает токсическое и сенсибилизирующее действие на организм. Вирус активирует систему протеолиза и вызывает повреждение эндотелия капилляров. Это повышает проницаемость сосудов и серозных оболочек, что вызывает геморрагии и нарушение гемодинамики с расстройствами микроциркуляции. При гриппе также развивается транзиторный вторичный иммунодефицит, что предрасполагает к развитию вторичной бактериальной инфекции. Вторичная бактериальная пневмония — тоже частая причина смерти. Клиника. Инкубационный период 1—2 дня. Клинические проявления сохраняются 3-7 дней. Реконвалесценция 7—10 дней. При гриппе типа А начало болезни острое, у больного обычно наблюдается интоксикация (высокая одноволновая лихорадка с ознобом, суставные и мышечные боли, сильная головная боль). Вирус гриппа А — нейротро-пен, поэтому возможно развитие нейроток- сикоза, в результате чего может наступить смерть (чаще у детей). Развивается катар верхних дыхательных путей («саднящий» сухой кашель, боли за грудиной, нарушение фонации, ринит и ринорея). Характерен геморрагический синдром — кровоизлияния в кожу, серозные и слизистые оболочки и внутренние органы, повышенная кровоточивость. Опасное осложнение — геморрагическая пневмония и отек легких, в результате чего быстро наступает смерть.. Редко и чаще у детей бывает абдоминальный синдром (боли в животе, тошнота, рвота, диарея). Осложнения при гриппе проявляются в виде бактериальной суперинфекции, обычно вызванной пневмококками или золотистым стафилококком. Грипп А также может осложняться нарушениями функций нервной, сердечно-сосудистой систем, нарушениями функции печени и почек и др. Грипп В обычно протекает легче, чем грипп А и может сопровождаться такими симптомами как конъюнктивит, глазная боль, или фотофобия. Кроме того, вирус типа В не обладает ней-ротропностью. Грипп, вызванный вирусами типа С протекает легко. Иммунитет. Во время заболевания в противовирусном ответе участвуют факторы неспецифической защиты: выделительная функция организма, сывороточные ингибиторы, альфа-интерферон, специфические IgA в секретах респираторного тракта, которые обеспечивают местный иммунитет. Протективные ви-руснейтрализующие штаммоспецифические сывороточные антитела появляются на 7—8-й день болезни и достигают максимального уровня через 2-3 недели. Количество их сохраняется высоким в течение месяца, а затем постепенно снижается. В ходе реконвалесцен-ции важна роль клеточного иммунитета (NK-клетки и специфические цитотоксические Т-лимфоциты, действующие на клетки, инфицированные вирусом). Постинфекционный иммунитет достаточно длителен и прочен, но высокоспецифичен (он типо-, подтипо- и даже вариантоспецифичен). Вывод о прочности приобретенного иммунитета позволили сделать наблюдения 1977-1978 гг., когда после 20-летнего отсутствия в популяцию людей «вернулся» вирус гриппа типа A (H1N1). Тогда возникшая эпидемия охватила почти исключительно лиц моложе 20 лет, которые ранее не контактировали с этим подтипом вируса и не имели иммунитета. Микробиологическая диагностика. Диагноз «грипп» базируется на (1) выделении и идентификации вируса, (2) определении вирусных АГ в клетках больного, (3) поиске вирусос-пецифических антител в сыворотке больного. При отборе материала для исследования важно получить пораженные вирусом клетки, так как именно в них происходит репликация вирусов. Материал для исследования — носоглоточное отделяемое, которое берут тампонами или отсасывают с задней стенки глотки и носа в первые три дня болезни. Иногда исследуют мазки-отпечатки со слизистой носа. Возможно постмортальное исследование аутопсийного материала (кусочки пораженной легочной ткани, соскобы со слизистой бронхов и трахеи). Материал доставляют в лабораторию, поместив в специальные растворы для сохранения жизнеспособности инфицированных вирусом клеток. Вирус гриппа теряет свою инфицирующую активность при температурах от —1 до —20 "С, поэтому материал либо хранят при +4 °С, если исследование планируется в ближайшие 1—2 дня после взятия материала, либо замораживают при температуре ниже —50 °С, если исследование будет проводиться в более поздние сроки. Для определения антител исследуют парные сыворотки крови больного. Методы Экспресс-диагностика. Обнаруживают вирусные антигены в исследуемом материале с помощью РИФ (прямой и непрямой варианты) и ИФА. Можно обнаружить в материале геном вирусов при помощи ПЦР. Вирусологический метод. Оптимальная лабораторная модель для культивирования большинства штаммов вирусов гриппа — это куриный эмбрион, но выделить вирусы можно и в культуре клеток (первичная культура клеток почек обезьян, клетки почек собак — MDCK, почек макак-резус и т. п.), и в организме лабораторных животных. С 1998 г. появились новые штаммы вируса A (H3N2) и вируса гриппа типа В, для которых оптимальной моделью являются культуры клеток. Индикацию вирусов проводят в зависимости от лабораторной модели (по гибели, по клиническим и патоморфологическим изменениям, ЦПД, образованию «бляшек», «цветной пробе», РГА и гемадсорбции). Идентифицируют вирусы по антигенной структуре. Применяют РСК, РТГА, ИФА, РБН (реакцию биологической нейтрализации) вирусов и др. Обычно тип вирусов гриппа определяют в РСК, подтип — в РТГА. Серологический метод. Диагноз ставят при четырехкратном увеличении титра антител в парных сыворотках от больного, полученных с интервалом в 10—14 дней. Применяют РТГА, РСК, ИФА, РБН вирусов. Следует помнить, что если человек повторно заболел гриппом, то в его организме повышается уровень антител не только к тому серотипу который вызвал данное заболевание, но и к тем, которыми он был инфицирован ранее. Метод часто используют для ретроспективной диагностики. Лечение. В большинстве случаев течение гриппа доброкачественное и требует только симптоматического/патогенетического лечения (применяют жаропонижающие, сосудосуживающие, антигистаминные препараты, витамины, детоксикацию, иммуномодуля-торы, ангиопротекторы, ингибиторы проте-олиза и т. д.). Неспецифически угнетает размножение вирусов аlfa-интерферон, препараты которого применяют интраназально. Можно применять препараты — индукторы эндогенного интерферона. Этиотропное лечение включает различные препараты. Ремантадин препятствует репродукции вирусов, блокируя М-белки. Ремантадин эффективен только в отношении вируса гриппа А, так как блокирует ионные каналы белка М2 и изменение рН лизосом клетки (у вирусов типа В нет белка М2, вместо него — белок NB, в котором нет адамантан-связывающего сайта, поэтому ремантадин на него не действует). Такое лечение эффективно лишь в первые 48 ч после заражения. Из-за побочного действия препарат не назначают беременным, детям до 7 лет, лицам с нарушениями функции печени и почек, тиреотоксикозом. Арбидол — препарат, который действует на вирусы гриппа типов А и В, нетоксичен, является иммуномодулято-ром и индуктором эндогенного интерферона. Другая группа препаратов — ингибиторы нейраминидазы (озельтамивир и др.). Препараты связываются со стабильными (консервативными) участками нейраминидазы, одинаковыми у всех типов вирусов гриппа. В результате блокируется выход вирусных частиц из инфицированных клеток. Лечение эффективно только в первые 36 ч после заражения. При тяжелых формах гриппа, которые чаще развиваются у пациентов «группы риска», можно применять также противогриппозный донорский иммуноглобулин и нормальный человеческий иммуноглобулин для внутривенного введения. Если присоединяется бактериальная инфекция — назначают антибиотики. Профилактика. Для неспецифической профилактики гриппа применяют противоэпидемические мероприятия, ограничивающие распространение вирусов гриппа аэрогенно и контактно (изоляция больных, карантин в детских коллективах и лечебных учреждениях, дезинфекция белья и посуды, ношение марлевой повязки, тщательное мытье рук, т. п.). Большое значение имеет повышение общей сопротивляемости организма. Для неспецифической противовирусной профилактики применяют интраназально препараты альфа-интерферона и оксолина (интраназально 2 раза в день 0,25% мазь в течение 25 дней во время эпидемии гриппа). Для экстренной хи-миопрофилактики во время эпидемии гриппа можно применять ингибиторы нейраминидазы, а также арбидол и ремантадин (в течение не менее 2—3 недель). Следует помнить, что действие ремантадина ограничено типом вируса, а также то, что он может вызвать побочные эффекты (возбуждение ЦНС, желудочно-кишечные расстройства). Специфическая плановая профилактика состоит в применении вакцин. Их применяют перед началом эпидемического сезона (октябрь — середина ноября). Вакцинирование рекомендовано прежде всего лицам из группы высокого риска, персоналу лечебных учреждений и т. п. В результате заболеваемость снижается в 2,5 раза у привитых лиц по сравнению с непривитыми. Разработано несколько разновидностей вакцин для профилактики гриппа А и В, приготовленных на основе штам- мов, прогностически «актуальных» в данный эпидсезон. Вакцинные штаммы обновляются раз в 2—3 года. В настоящее время в России разрешены к применению вакцины: живые аллантоисные интраназальная и подкожная, тривалентные инактивированные цельно-вирионные гриппозные интраназальная и парентеральная-подкожная («Грипповак»), химические «Инфлювакс», «Агриппал», по-лимер-субъединичная «Гриппол», сплит-вак-цины «Ваксигрипп», «Бегривак», «Флюарикс» и т. д. Живые вакцины создают наиболее полноценный, в том числе местный, иммунитет. Инактивированные цельновирионные или «убитые» вакцины могут вызывать аллергию у лиц с повышенной чувствительностью к ово-альбумину Сплит-вакцины, т. е. высокоочи-щенные «расщепленные», содержат полный набор вирусных антигенов, но из них удалены липиды внешней оболочки, чтобы уменьшить пирогенный эффект. Субвирионные или «химические» вакцины содержат только про-тективные антигены Н и N. Современные субъединичные вакцины нового поколения обладают также иммуномодулирующим действием за счет полимеров-адъювантов. Для поддержания напряженного иммунитета требуется ежегодная ревакцинация, однако следует помнить, что частое введение вакцин может дать поствакцинальные осложнения — развитие иммунологического паралича, а у беременных женщин может быть повреждение плода. 17.1.7. Парам иксовирусы (семейство Paramyxoviridae) Парамиксовирусы (семейство Paramyxoviridae, от лат. para — около, туха — слизь) — семейство РНК-содержащих вирусов. Включает два подсемейства: Paramyxovirinae, которое содержит 3 рода — Morbillivirus, Respirovirus (ранее — Paramyxovirus), Rubulavirus; и Pneumovirinae, которое содержит 2 рода — Pneumovirus, Metapneumovirus (табл. 17.2). В семейство входят респираторно-синтициальный вирус, вирусы кори, паротита, парагриппа. Они передаются аэрогенным механизмом. Структура. Вирион парамиксовирусов имеет диаметр 150—300 нм, окружен оболочкой с гликопротеиновыми шипами (рис. 17.5). Под оболочкой находится спиральный нуклеокап- сид, состоящий из нефрагментированной линейной однонитевой минус-РНК, связанной с белками: нуклеопротеином (NP), поддерживающим геномную структуру; полимеразой-фосфопротеином (Р) и большим (L) белком. Нуклеокапсид ассоциирован с матриксным (М) белком, расположенным под оболочкой вириона. Оболочка вириона содержит шипы — два гликопротеина: белок слияния (F — от англ. fusion), который вызывает слияние мембран вируса и клетки; прикрепительный белок (гемагглютинин-нейраминидаза {HN}, гемагглютинин {Н} или {G} белок). F-белок активизируется протеолитическим расщеплением с образованием F1-, Р2-гликопротеинов. Репродукция (рис. 3.9) парамиксовирусов инициируется связыванием HN, H или G-бел-ка на оболочке вириона с сиаловой кислотой на поверхности клетки (Г). F-белок обеспечивает слияние оболочки вируса с плазматической мембраной клетки. Вирионы проникают в клетку без образования эндосом. Парамиксовирусы индуцируют слияние клеток, образуя поликарионы — синцитий. Вирус Сендай мышей (с расщепленным F-белком) часто используют для слияния клеток при получении клеточных гибридов. Репликация генома сходна с репликацией минус-РНК-геномных вирусов (например, вируса бешенства): РНК-полимераза вносится в клетку с нуклеокапсидом вируса. Транскрипция, синтез белка и репликация генома происходят в цитоплазме клетки хозяина. Геном транскрибируется в отдельные иРНК (2) и полноценную плюс-матрицу (J) для геномной РНК. Новые геномы взаимодействуют с L-, N- и NP-бел-ками, образуя нуклеокапсиды, которые связываются с М-белком и окружаются оболочкой из модифицированной плазмолеммы клетки. Вирионы выходят из клетки почкованием (4). Культивирование парамиксовирусов осуществляют в первичных и перевиваемых культурах клеток. Резистентность. Парамиксовирусы относятся к наименее устойчивым вирусам. Они чувствительны к высокой температуре (50 °С), детергентам, дезинфицирующим веществам и другим факторам. Отмечается большая устойчивость к низким температурам. 17.1.7.1. Вирусы парагриппа Парагрипп — острая инфекционная болезнь, характеризующаяся преимущественным поражением верхних дыхательных путей, в основном гортани, и умеренной I интоксикацией. Таксономия. Возбудители относятся к РНК-содержащим вирусам семейства Paramyxoviridae. Вирусы парагриппа человека серотипы 1 и 3 относятся к роду Respirovirus, а серотипы 2 и 4а, 4b — к роду Rubulavirus. Вирусы парагриппа человека были открыты в 1956 г. Р. Ченоком. Структура и антигенные свойства. По своей структуре вирусы парагриппа человека не отличаются от других представителей семейства. Они также содержат однонитевую, нефрагмен-тированную минус-РНК, кодирующую 7 белков. Оболочка имеет гликопротеиновые шипы (HN, F). Нуклеокапсид является внутренним антигеном. Гликопротеиновые шипы являются поверхностными антигенами. По антигенам вирусных белков HN, NP, F различают 4 основных серотипа вирусов парагриппа: (ВПГЧ-1, ВПГЧ-2, ВПГЧ-3, ВПГЧ-4). Серотипы 1, 2, 3 перекрестно реагируют с антителами к вирусу паротита. У ВПГЧ-1, ВПГЧ-2, ВПГЧ-3 имеются общие антигены с вирусом эпидемического паратита. Гемагглютинин имеется у всех серо-типов, но он отличается по спектру действия: ВПГЧ-1 и ВПГЧ-2 склеивают разные эритроциты (человека, кур, морской свинки и др.); ВПГЧ-3 не агглютинирует эритроциты кур; ВПГЧ-4 склеивает только эритроциты морской свинки. Культивирование вирусов производят в основном на первичных культурах клеток. Резистентность вирусов парагриппа человека такая же, как у других представителей семейства. Эпидемиология. Источник парагриппа — больные люди. Заражение происходит через дыхательный тракт. Основной путь передачи — воздушно-капельный, но возможен также и контактно-бытовой путь. Заболевание широко распространено (чаще от больных выделяют ВПГЧ-1, ВПГЧ-2 и ВПГЧ-3) и очень контагиозно. Почти у всех взрослых обнаруживают антитела к вирусам парагриппа. Сезонность в возникновении парагриппа не отмечается. Патогенез. Входные ворота инфекции — верхние дыхательные пути. ВПГЧ адсорбируются на клетках слизистой оболочки верхних дыхательных путей, внедряются в них и размножаются, вызывая гибель клеток. Патологический процесс быстро спускается в нижние отделы респираторного тракта, вызывая здесь воспаление. ВПГЧ-1 и ВПГЧ-2 являются самой частой причиной крупа (ост- рого ларинготрахеобронхита у детей). ВПГЧ-3 вызывает очаговую пневмонию. Имеет место непродолжительная вирусемия. Продукты распада погибших клеток и вирусов вызывают интоксикацию организма. Вирусы вызывают вторичный иммунодефицит, способствующий развитию бактериальных осложнений. Клиника. Инкубационный период 3-6 дней. Повышается температура, появляется слабость, насморк, боль в горле, кашель, т. е. специфические симптомы отсутствуют. При тяжелых формах у детей возможно развитие крупа и пневмонии. У взрослых заболевание обычно протекает как ларингит. Иммунитет. Иммунитет после перенесенного заболевания непрочный и непродолжительный. И хотя он типоспецифичен, возможны реинфекции теми же типами. Микробиологическая диагностика. От больного берут слизь или смыв из дыхательных путей, мокроту. Применяют вирусологический метод на культуре клеток. Индикацию проводят по цитопатическому действию вирусов, РГА, но самым важным критерием является феномен гемадсорбции, наиболее выраженный у ВПГЧ-1, -2, -3 (раньше эти вирусы называли гемадсорбирующими). Идентификацию осуществляют с помощью РТГА, РСК, РН. Возможно использование серологического метода как для выявления антигенов вируса, так и для обнаружения антител в парных сыворотках крови больного в РТГА, РСК, РН и др. (ретроспективная диагностика). Лечение. Помимо симптоматической терапии возможно использование арбидола, интерферона, других иммуномодуляторов. Профилактика. Только неспецифическая. 17.1.7.2. Вирус эпидемического паротита Эпидемический паротит («свинка») — острая детская инфекция, характеризующаяся поражением околоушных слюнных желез, реже — других органов. Таксономия. Вирус паротита относится к РНК-содержащим вирусам семейства Paramyxoviridae рода Rubulavirus. Вирусная природа болезни установлена в 1934 г. К. Джонсоном и Э. Гудпасчером. Структура и антигенные свойства. Вирус паротита имеет сферическую форму, диаметр 150—200 нм. Строение сходно с другими парамиксовиру-сами (рис. 17.5). Внутри вируса расположен NP-белок, а снаружи — оболочка с шипами (HN- и F-гликопротеины). Вирус агглютинирует эритроциты кур, морских свинок и др. Проявляет нейраминидазную и симпластообразующую активность. Существует один серотип вируса. Культивирование вирусов производят на культуре клеток и курином эмбрионе. Резистентность. Как и другие парамиксовиру-сы, возбудитель паротита обладает невысокой резистентностью к факторам окружающей среды. Эпидемиология. Эпидемический паротит — строго высококонтагиозная антропо-нозная инфекция; источник — больные люди. Возбудитель передается воздушно-капельным путем, иногда — через загрязненные слюной предметы. Наиболее восприимчивы дети от 5 до 15 лет, но могут болеть и взрослые. Заболевание встречается повсеместно. Патогенез. Входные ворота инфекции — верхние дыхательные пути. Вирусы размножаются в эпителии слизистых верхних дыхательных путей и, возможно, в околоушных железах. Затем они поступают в кровь и разносятся по организму, попадая в яички, поджелудочную и щитовидную железы, мозговые оболочки и другие органы, вызывая их воспаление. Клиника. Инкубационный период 14—21 день. Болезнь начинается с повышения температуры, головной боли, недомогания. Воспаляются одна или обе околоушные железы (glandula parotis); могут вовлекаться в патологический процесс другие слюнные железы. Болезнь продолжается около недели. Наиболее частые осложнения — орхит (и как следствие — бесплодие), менингит, менингоэнцефалит, панкреатит. Нередко наблюдается бессимптомное течение. Иммунитет. После перенесенной болезни вырабатывается пожизненный. Микробиологическая диагностика. Производится редко, так как очень характерна клиническая картина. Материал для исследования — слюна, цереброспинальная жидкость, моча, сыворотка крови. Применяют вирусологический метод, заражая культуру клеток куриных фибробластов или куриный эмбрион. Вирус идентифицируют с помощью РТГА, РИФ, РН, PC К. При серологическом методе в парных сыворотках крови больного определяют антитела с помощью ИФА, РСК, РТГА. Лечение и профилактика. Для лечения и поздней профилактики можно использовать специфический иммуноглобулин. Для специфической профилактики детям старше одного года, вводят живую вакцину (в первые 6 месяцев жизни у ребенка есть плацентарный иммунитет). 17.1.7.3. Вирус кори и ПСПЭ Корь — острая инфекционная болезнь, характеризующаяся лихорадкой, катаральным воспалением слизистых оболочек верхних дыхательных путей и глаз, а также пятнисто-папулезной сыпью на коже. Таксономия. Возбудитель относится к РНК-содержащим вирусам семейства Paramyxoviridae рода Morbillivirus (лат. название болезни — morbilli). Выделен в 1954 г. Дж. Эндерсом и Т. Пиблсом. Структура и антигенные свойства. Морфология вируса типична для парамиксовиру-сов (рис. 17.5). Диаметр вириона 150—250 нм. Геном вируса — однонитевая, нефрагменти-рованная минус РНК. Имеются следующие основные белки: NP — нуклеокапсидный; М — матриксный, а также поверхностные гли-козилированные белки липопротеиновой оболочки — гемагглютинин (Н) и белок слияния (F), гемолизин. Вирус кори обладает гемаг-глютинирующей и гемолитической активностью. Нейраминидаза отсутствует. Имеет общие антигены с вирусом чумы собак и крупного рогатого скота. Культивирование. Вирус кори культивируют на первично-трипсинизированных культурах клеток почек обезьян и человека, перевиваемых культурах клеток HeLa, Vero. Возбудитель размножается с образованием гигантских многоядерных клеток — симпластов; появляются цитоплазматические и внутриядерные включения. Белок F вызывает слияние клеток. Резистентность. В окружающей среде вирус кори нестоек, при комнатной температуре инактивируется через 3—4 ч. Быстро гибнет от солнечного света, УФ-лучей. Чувствителен к детергентам, дезинфектантам. Восприимчивость животных. Корь воспроизводится только на обезьянах, остальные животные маловосприимчивы. Эпидемиология. Корь — антропонозная инфекция, распространена повсеместно. Восприимчивость человека к вирусу кори чрезвычайно высока. Болеют люди разного возраста, но чаще дети 4—5 лет. Источник инфекции — больной человек. Основной путь инфицирования — воздушно-капельный, реже — контактный. Наибольшая заражаемость происходит в продромальном периоде и в 1-й день появления сыпи. Через 5 дней после появления сыпи больной не заразен. Патогенез. Возбудитель проникает через слизистые оболочки верхних дыхательных путей и глаз, откуда попадает в подслизистую оболочку, лимфатические узлы. После репродукции он поступает в кровь (вирусемия) и поражает эндотелий кровеносных капилляров, обуславливая тем самым появление сыпи. Развиваются отек и некротические изменения тканей. Клиника. Инкубационный период 8— 15 дней. Вначале отмечаются острые респираторные проявления (ринит, фарингит, конъюнктивит, фотофобия, температура тела 38,8—39,0 °С). Затем, на 3—4-й день, на слизистых оболочках и коже появляется пятнисто-папулезная сыпь, распространяющаяся сверху вниз: сначала на лице, затем на туловище и конечностях. За сутки до появления сыпи на слизистой оболочке щек появляются мелкие пятна (диаметр около 1 мм) Филатова—Коплика, окруженные красным ореолом. Заболевание длится 7—9 дней, сыпь исчезает, не оставляя следов. Возбудитель вызывает аллергию, подавляет активность Т-лимфоцитов и иммунные реакции, что способствует появлению осложнений в виде пневмоний, воспаления среднего уха и др. Редко развиваются энцефалит и ПСПЭ. ПСПЭ — медленная вирусная инфекция со смертельным исходом в результате поражения нервной системы с гибелью нейронов и развитием двигательных и психических нарушений. Заболевание развивается в возрасте 2—30 лет и обусловлено персистенцией вируса в клетках нейроглии без образования полноценных вирионов. В дефектных вирионах нарушается формирование оболочки, изменяется белок F, отсутствует белок М. В крови и ликворе больных обнаруживаются антитела в разведениях до 1:16 000, а в клетках мозга — вирусные нуклеокапсиды. Вместе с этим показано, что возбудитель ПСПЭ по своим свойствам ближе к вирусу чумы собак. Иммунитет. После перенесенной кори развивается гуморальный стойкий пожизненный иммунитет. Повторные заболевания редки. Пассивный иммунитет, передаваемый плоду через плаценту в виде IgG, защищает новорожденного в течение 6 месяцев после рождения. Микробиологическая диагностика. Исследуют смыв с носоглотки, соскобы с элементов сыпи, кровь, мочу. Вирус кори можно обнаружить в патологическом материале и в зараженных культурах клеток с помощью РИФ, РТГА и реакции нейтрализации. Характерно наличие многоядерных клеток и антигенов возбудителя в них. Для серологической диагностики применяют РСК, РТГА и реакцию нейтрализации. Лечение. Симптоматическое. Специфическая профилактика. Активную специфическую профилактику кори проводят подкожным введением детям первого года жизни или живой коревой вакцины из атте-нуированных штаммов (Л-16), или ассоциированной вакцины (против кори, паротита, краснухи). В очагах кори ослабленным детям вводят нормальный иммуноглобулин человека. Препарат эффективен при введении не позднее 7-го дня инкубационного периода. 17.1.7.4. Респираторно-синцитиальный вирус Респираторно-синпитиальный вирус (РС-вирус) вызывает заболевания нижних дыхательных путей у новорожденных и детей раннего возраста. Основной путь передачи — воздушно-капельный. Таксономия. PC-вирус относится к РНК-со-держащим вирусам семейства Paramyxoviridae рода Pneumovirus. Он был выделен от детей Р. Ченоком в 1956 г. Структура и антигенные свойства. РС-вирус, как все парамиксовирусы (рис. 17.5), имеет од-нонитевую спиральную минус-РНК. Вирионы полиморфны: кроме обычной сферической формы встречаются и нитевидные формы. На липопротеиновой оболочке расположены гли- копротеиновые шипы, отвечающие за связь с рецепторами клетки (гликопротеин G) и слияние с мембранами клетки (гликопротеин F). Гликопротеин F вызывает слияние клеток, в результате чего образуется синцитий. Свое название PC-вирус получил по характерному ЦПД в культуре клеток — по образованию симплас-тов и синцития. Гемагглютинин отсутствует. По специфическому поверхностному антигену возможно отличие трех серотипов РС-вируса. Культивирование. PC-вирус культивируют на перевиваемых культурах клеток и на первичных культурах почек обезьян. В качестве биологической модели можно использовать обезьян. Резистентность. PC-вирус, как и многие па-рамиксовирусы, очень чувствителен к факторам окружающей среды. Эпидемиология. Источником заболевания является больной. Инфицирование человека происходит через респираторный тракт. Пути передачи — контактно-бытовой (через руки, белье, другие предметы) и воздушно-капельный (при кашле, чихании). Заболевание широко распространено (составляет 3—16 % в структуре всех ОРЗ) и высококонтагиозно (у 3/4 детей к трем годам обнаруживаются вируснейтрализующие антитела, главным образом секреторные IgA). Наиболее опасен PC-вирус для детей первых 6 месяцев — у них развиваются тяжелые бронхиты и пневмонии. Старшие дети и взрослые болеют нетяжело. Патогенез. Входные ворота инфекции — верхние дыхательные пути: вирусы проникают в эпителиальные клетки и размножаются, вызывая их гибель. Патологический процесс быстро распространяется на нижние дыхательные пути. Развивается вторичный иммунодефицит, что приводит к развитию вторичных бактериальных инфекций. Кроме того, образуются иммунные комплексы, в результате чего развиваются иммунопатологические реакции. Клиника. Инкубационный период 3—5 дней. Сначала появляются признаки ОРЗ, а затем трахеобронхита, пневмонии. Иммунитет. После перенесенного заболевания развивается непродолжительный иммунитет. Возможны рецидивы, но с более легким течением. Микробиологическая диагностика. Материалом для исследования служат отделяемое но- соглотки, ткань легких (исследуемый материал нельзя замораживать). В вирусологическом методе используют культуры клеток. Индикацию вирусов производят по характеру ЦПД — образованию синцития, а идентификацию вирусов — с помощью РН, РСК и др. Возможно применение серологического метода, направленного на обнаружение специфического антигена с помощью РИФ, ИФА (экспресс-диагностика); реже, используя РСК, РН, выявляют антитела в сыворотке крови больного. У грудного ребенка могут быть антитела матери в титре 1:320, что затрудняет выявление нарастания титра антител. При микроскопическом (гистологическом) исследовании в эпителии слизистой оболочки бронхов обнаруживают многоядерные клетки и синцитий. Лечение. При PC-инфекции применяют иммуномодуляторы и рибавирин. Специфическая профилактика. Отсутствует. 17.1.8. Рабдовирусы (семейство Rhabdoviridae) Рабдовирусы — семейство РНК-содержащих вирусов, включающее около 80 вирусов родов Lyssavirus (вирус бешенства) и Vesiculovirus (вирус везикулярного стоматита). Вызывают заболевания животных и растений. Структура. Размер вирионов 130/300x60/80 нм. Вирионы имеют форму цилиндра с полукруглым и плоским концами (форма пули), отсюда и название — Rhabdoviridae (греч. rhabdos — прут, палка). Пулевидная форма характерна для вирусов, поражающих позвоночных, а бациллярная с закругленными с обеих сторон концами — для вирусов везикулярного стоматита. Вирионы рабдовирусов состоят из двухслойной липопротеиновой оболочки и РНП (нук-леокапсида) спиральной симметрии (рис. 17.6). Оболочка изнутри выстлана М-белком (англ. matrix), а снаружи от нее отходят шипы гликопроте-ина G (длина 5—10 нм, диаметр 3 нм). РНП состоит из геномной РНК и белков: N-белок (англ. nucleocapsid), укрывающий как чехол геномную РНК; L-белок (англ. large) и NS-белок, являющиеся полимеразой (транскриптазой) вируса. Геном рабдовирусов представлен однонитевой нефраг-ментированной линейной минус-РНК. Репродукция. Репродукция рабдовирусов сходна с репродукцией минус-РНК-содержащих вирусов (рис. 17.7). Рабдовирусы связываются гликопротеинами оболочки с рецепторами клетки и проникают в нее путем эндоцитоза (I). Затем, после удаления оболочки, освободившийся РНП попадает в цитоплазму клетки (2). Здесь, с помощью РНК-зависимой РНК-полимеразы (3), синтезируются неполные (4) плюс-нити РНК (пять индивидуальных иРНК для синтеза вирусных белков) и полные (6) плюс-нити РНК, являющиеся матрицей для синтеза геномной РНК (7). В результате трансляции и РНК рибосомами (5) образующиеся вирусные белки преобразуются в аппарате Гольджи и включаются в плазмолемму клетки (8). Образование РНП происходит путем взаимодействия геномной (минус-нити) РНК с белками N, NS и L. После сборки вирионов происходит их почкование и выход из клетки (9). 17.1.8.1. Вирус бешенства Вирус бешенства вызывает бешенство (Rhabies, синонимы: водобоязнь, гидрофобия) — вирусную инфекционную болезнь, развивающуюся после укуса или ослюнения раны инфицированным животным. Поражаются нейроны ЦНС с развитием симптомов возбуждения, параличом дыхательной и глотательной мускулатуры. Болезнь заканчивается летально. Вирусная этиология бешенства доказана П. Ремленже в 1903 г. Таксономия. Возбудитель бешенства — РНК-содержащий вирус, относится к семейству Rhabdoviride роду Lyssavirus, включающему еще 5 других вирусов (Lagos, Mocola, Duvenhage, Kotonkan, Obodhiang), выделен- ных от различных животных, насекомых в Африке и сходных с вирусом бешенства. Морфология и антигенные свойства. Вирион имеет форму пули (рис. 17.6), размер 75— 180 нм; состоит из сердцевины (РНП спирального типа и матриксного белка), окруженной липопротеиновой оболочкой с гли-копротеиновыми шипами. Гликопротеин G отвечает за адсорбцию и внедрение вируса в клетку, обладает антигенными (типоспеци-фический антиген) и иммуногенными свойствами. Антитела к нему нейтрализуют вирус и выявляются в РН. РНП состоит из геномной однонитевой линейной минус-РНК и белков: N-белка, укрывающего как чехол геномную РНК; L-белка и NS-белка, являющихся полимеразой (транскриптазой) вируса. РНП является группоспецифическим антигеном; выявляется в РСК, РИФ, РП. Различают два вируса бешенства: • дикий (уличный) вирус, циркулирующий среди животных, патогенный для человека; • фиксированный (virus fixe), полученный Л. Пастером в качестве антирабической вакцины многократным пассированием дикого вируса через мозг кроликов, утративший патогенность для человека, не образующий включений, не выделяющийся со слюной. Оба вируса идентичны по антигенам. Культивирование. Вирус культивируют путем внутримозгового заражения лабораторных животных (кроликов, белых мышей, крыс, хомячков, морских свинок, овец и др.) и в культуре клеток: почек хомячка; нейроблас-томы мыши; фибробластов человека, куриного эмбриона; Vero-клетки почки обезьяны и др. В нейронах головного мозга зараженных животных образуются цитоплазматичес-кие включения, содержащие антигены вируса. Эти включения впервые были описаны В. Бабешем (1892) и А. Негри (1903) и названы тельцами Бабеша—Негри (эозинофильные включения вируса овальной формы размером 1—15 мкм, состоящие из вирусного РНП). Резистентность, Вирус бешенства неустойчив: быстро погибает под действием солнечных и УФ-лучей, а также при нагревании до 60 "С. Чувствителен к дезинфицирующим веществам, жирорастворителям, пропиолак-тону, щелочам и протеолитическим фермен- там; сохраняется при низких температурах (-20...-70°С). Эпидемиология. Заболевание распространено повсеместно, кроме некоторых островных государств, где осуществляются карантинные и профилактические мероприятия. Источниками инфекции в природных очагах (природное, дикое бешенство) являются лисы, волки, енотовидные собаки, песцы, шакалы, грызуны, насекомоядные, плотоядные и кровососущие летучие мыши, а в антропургичес-ких очагах (городское бешенство) — собаки и кошки, чаще других передающие возбудителя. Вирус бешенства накапливается в слюнных железах больного животного и выделяется со слюной. Животное заразно в последние дни инкубационного периода (за 2—10 дней до клинических проявлений болезни). Механизм передачи возбудителя — контактный при укусах, реже — при обильном ослюнении поврежденных наружных покровов. Возможен аэрогенный механизм передачи вируса, например, в пещерах, населенных летучими мышами, которые многомесячно могут выделять вирус бешенства со слюной. Иногда заболевание развивается при употреблении мяса больных животных или при трансплантации инфицированных тканей (например, роговицы глаза). У собаки после инкубационного периода (14—16 дней) появляются возбуждение, обильное слюнотечение, рвота, водобоязнь. Она грызет место укуса, посторонние предметы, бросается на людей, животных. Через 1—3 дня наступают паралич и смерть животного. Патогенез и клиника. Вирус, попав со слюной больного животного в поврежденные наружные покровы, реплицируется и персистирует в месте внедрения. Затем возбудитель распространяется по аксонам периферических нервов, достигает клеток головного и спинного мозга, где размножается. В цитоплазме нейронов мозга, чаще в гиппокампе, обнаруживаются тельца Бабеша— Негри. Клетки претерпевают дистрофические, воспалительные и дегенеративные изменения. Размножившийся вирус попадает из мозга по центробежным нейронам в различные ткани, в том числе в слюнные железы. Выделяется вирус со слюной за 8 суток до начала и в течение всей болезни. Инкубационный период у человека при бешенстве — от 10 дней до 3 месяцев, иногда до года и более, что зависит от характера и локализации повреждения. Короткий инкубационный период отмечается при множественных укусах в голову, более продолжительный — при укусах в конечности. Инкубационный период при передаче вируса летучими мышами более короткий (не более 3—4 недель). В начале заболевания появляются недомогание, страх, беспокойство, бессонница, затем развиваются рефлекторная возбудимость, спазматические сокращения мышц глотки и гортани; дыхание шумное, судорожное. Судороги усиливаются при попытке пить, при виде льющейся воды (гидрофобия), от дуновения (аэрофобия), яркого света (фотофобия), шума (акустофобия) и при других воздействиях. Развиваются галлюцинации, а в конце болезни (на 3—7-й дни болезни) — параличи мышц конечностей и дыхания. Реже болезнь развивается без возбуждения и водобоязни; развивается паралич и слюнотечение (тихое бешенство). Летальность — около 95 %. Иммунитет. Человек относительно устойчив к бешенству: при укусах бешеным волком заболевает около 50 % не привитых людей, а бешеной собакой — около 30 %. Постинфекционный иммунитет не изучен, так как больной обычно погибает. Введение людям, укушенным бешеным животным, инактивированной антирабической вакцины вызывает выработку антител, интерферонов и активацию клеточного иммунитета. Дата добавления: 2015-08-26 | Просмотры: 2101 | Нарушение авторских прав |