Микробиологическая диагностика. Материалом для исследования служат мокрота, ликвор, гной из свищей, пунктаты невскрытых очагов размягчения
Материалом для исследования служат мокрота, ликвор, гной из свищей, пунктаты невскрытых очагов размягчения, соскобы с грануляций, биопсия тканей.
Для диагностики используют бактериоско-пический, бактериологический, серологический и аллергологический методы.
Обычно диагноз ставят бактериоскопичес-ки по обнаружению в нативном исследуемом материале друз актиномицетов, имеющих вид мелких желтоватых или серовато-белых зернышек с зеленоватым отливом. Под малым увеличением видны образования округлой формы с бесструктурным центром и периферией радиального строения; под большим увеличением в центре видны сплетения тонких гиф с пигментироваными зернами, по периферии от этого клубка мицелия отходят радиально в виде лучей гифы с колбовидны-ми утолщениями на концах. По Граму споры окрашиваются в темно-фиолетовый, мицелий — в фиолетовый, а друзы — в розовый цвет. По Цилю—Нельсону мицелий окрашивается в синий, а споры — в красный цвет.
Окончательный диагноз устанавливают на основании выделения возбудителя. Для подавления роста сопутствующей микрофлоры гной и мокроту перед посевом центрифугируют в растворе пенициллина и стрептомицина, затем отмывают изотоническим раствором NaCl для удаления антибиотиков. Засевают на питательные среды (сахарный агар, среда Сабуро и др.) и культивируют в, аэробных и
анаэробных условиях. Выделяют и идентифицируют чистую культуру по общепринятой схеме. У выделенных культур определяют способность сворачивать и пептонизировать молоко — признак, характерный для актиномицетов. Выделение анаэробных видов подтверждает диагноз актиномикоза.
Для серодиагностики ставят РСК с актино-лизатом. Реакция недостаточно специфична, поскольку положительные результаты могут отмечаться при раке легкого и тяжелых нагно-ительных процессах. Применение в качестве АГ вместо актинолизата внеклеточных белков актиномицетов повышает чувствительность РСК. Этот же АГ можно использовать и для постановки РИГА.
Аллергическую пробу проводят с актино-лизатом. Диагностическое значение имеют лишь положительные и резкоположительные пробы. При висцеральном актиномикозе аллергическая проба часто отрицательная.
Лечение. Удовлетворительных результатов можно достичь применением пенициллина, тетрациклина, эритромицина, клиндамицина.
Профилактика. Специфическая профилактика не разработана. Не Специфическая профилактика направлена на повышение иммунного статуса
16.7.4. Нокардии (род Nocardia)
Нокардии впервые были выделены Нокаром в 1888 г.; Эппингер описал поражения легких и абсцессы мозга у человека, вызванные но-кардиями.
Морфология. На ранних стадиях роста образуют относительно развитый мицелий, растущий по поверхности и проникающий в глубь среды. Клетки — прямые или изогнутые с частым ветвлением. В первые часы роста мицелий не септированный и все сплетение одноклеточное. Диаметр нитей 0,3—1,3 мкм. С возрастом в нитях образуются септы, и мицелий фрагментируется на отдельные палочковидные или кокковидные элементы, которые размножаются бинарным делением или почкованием. В старых культурах можно обнаружить многоклеточные нити, образующиеся в результате неполного разделения фрагментирующегося мицелия. Образуют конидии. Отношение к окраске по Граму вариабельное; в патологи-
ческом материале представлены грамположи-тельными короткими ветвящимися нитями и дифтероидными элементами; в старых культурах можно обнаружить грамотрицательные диссоциированные элементы. Относительно кислотоустойчивы, окрашиваются по Цилю— Нельсону. По форме мицелия и времени его диссоциации делятся на 3 группы:
1-я группа — мицелий ограниченный, не образует конидий, диссоциирует через 12— 14 ч инкубации; в старых культурах обычны короткие палочки и кокковидные формы.
2-я группа — мицелий ограниченный, не образует конидий, диссоциирует через 20 ч инкубации; в старых культурах преобладают длинные фрагменты мицелия.
3-я группа — мицелий обильный, с редкими конидиями; в старых культурах преобладают длинные ветвящиеся нити.
Культуральные свойства. Хорошо растут на простых питательных средах (МПА, МПБ, среда Сабуро и др.). Температурный оптимум-роста — 28—37 °С. На жидких средах образуют тонкую прозрачную пленку, напоминающую растекшуюся каплю жира; постепенно приобретает кремово-желтый цвет. Возможен придонный рост в виде комочковваты или плотных зерен. На плотных средах через 48—72 ч образуют мелкие гладкие влажные колонии тестоватой консистенции. Через 72 ч поверхность колоний становится исчерченной, на
10—14 сутки принимают вид с приподнятым и извитым центром и фестончатыми краями. Продуцируют пигменты от кремового до красного цвета, которые диффундируют в питательную среду. Бактерии 1-й группы образуют мягкие, пастообразные и слизистые колонии; 2-й группы — пастообразные или маслянистые; 3-й группы — сухие кожистые колонии.
Биохимическая активность. Достаточно высокая. Основные дифференциальные признаки нокардий представлены в табл. 16.33.
Экологическая ниша. Повсеместно распространены в почве и на разлагающихся органических субстратах. Не являются представителями нормальной микрофлоры организма человека, хотя их иногда выделяют от клинически здоровых людей. Устойчивость в окружающей среде высокая.
Чувствительность к антимикробным препаратам. Чувствительны к гентамицину и лево-мицетину, к действию обычно применяемых антисептиков и дезинфектантов.
Эпидемиология. Источник инфекции — почва. Механизм передачи — контактный, путь передачи — раневой. Возможна также аэрогенная передача возбудителя воздушно-капельным или воздушно-пылевым путями, а также передача алиментарным путем с кон-таминированной пищей через поврежденные слизистые оболочки ЖКТ. Восприимчивость к нокардиям, как ко всем УПМ, низкая у лиц
с нормальным иммунным статусом и повышенная у иммунокомпромиссных хозяев.
Патогенез. Вызывают оппортунистическую инфекцию.
Возбудитель захватывается альвеолярными макрофагами, в цитоплазме которых он сохраняет жизнеспособность, блокируя слияние фагосомы с лизосо-мами и ингибируя синтез лизосомальных ферментов. Персистенция возбудителя ведет к развитию воспаления с формированием множественных сливных абсцессов и гранулем. Инфекции подкожной клетчатки развиваются при попадании в рану возбудителя и характеризуются развитием гнойного воспаления. У иммунодефицитных лиц возможно развитие диссе-минированных инфекций.
Клиника. Нокардиозы — оппортунистические инфекции человека, вызываемые нокар-диями, которые характеризуются преимущественным поражением легких и подкожной клетчатки с развитием гнойно-гранулематоз-ного воспаления.
Относятся к редким заболеваниям. Ежегодно в мире регистрируют 1,5—2,0 тыс. случаев заболевания, более половины из которых — у лиц с иммунодефицитами. Основные формы поражений — легочные и подкожные нокардиозы. Наиболее распространены легочные поражения, вызванные Nocardia asteroides, и подкожные поражения вызванные Nocardia brasiliensis.
При легочных поражениях в паренхиме легких формируются множественные сливные абсцессы и гранулемы. В воспалительный процесс часто вовле-
каются органы средостения, мягкие ткани грудной клетки и др. Особую опасность заболевание представляет для лиц с иммунодефицитами, у которых часто развиваются диссеминированные инфекции, сопровождающиеся поражением ЦНС, менингеальными явлениями, парезами и параличами. При диссеми-нированных формах возможны поражения кожных покровов, лимфатических узлов, печени и почек.
Инфекции подкожной клетчатки характеризуются развитием неглубоких пустул в месте проникновения возбудителя. При прогрессировании болезни образуются абсцессы и гранулемы, которые напоминают кожный актиномикоз.
Иммунитет изучен недостаточно.
Микробиологическая диагностика. Материалом для исследования служат мокрота, гной, биоптаты тканей. Для диагностики используют бактериоскопический и бактериологический методы. Обычно диагноз ставят бактериоско-пически по обнаружению в исследуемом материале несептированных гиф. Окончательный диагноз устанавливают на основании выделения возбудителя.
Лечение. Удовлетворительных результатов можно достичь, применяя сульфаниламиды или их комбинации с гентамицином или ле-вомицетином.
Профилактика. Специфическая профилактика не разработана. Неспецифическая профилактика направлена на повышение иммунного статуса.
16.7.5. Бифидобактерии, эубактерии, пропионибактерии, гарднереллы, мобилункусы
16.7.5.1. Бифидобактерии (род Bifidobacterium)
Морфология. Род Bifidobacterium образован полиморфными палочками размером 0,5/l,3x1,5/8 мкм; также встречаются утолщенные на концах или ветвящиеся клетки, располагающиеся в мазках по одиночке, парами, в виде палисада или V-образно, что делает их похожими на дифтероиды. По Граму окрашиваются неравномерно; неподвижны.
Культуральные свойства. Облигатные анаэробы, некоторые виды могут расти в капно-фильных условиях. Не растут при рН ниже 4,5 и выше 8,5, оптимум рН — 6,0; температурный оптимум роста — 37-40 °С. Хорошо растут на обычных мясопептонных, сахарных средах, но нуждаются во внесении в среду витаминов; лучше растут на печеночном отваре с добавлением лактозы. При выращивании по методу Перетца образуют плотные чечеви-
цеобразные S-формы колоний и «мохнатые» R-формы колоний.
Биохимическая активность. Большинство видов ферментирует с образованием кислот, преимущественно уксусной и молочной, глюкозу, лактозу, сахарозу и маннит. Основные дифференциальные признаки бифидобактерий представлены в табл. 16.34.
Факторы патогенности. Не проявляют патогенных свойств.
Экологическая ниша. Доминируют в толстой кишке, будучи ее основной пристеночной и просветной микрофлорой. Присутствуют в кишечнике на протяжении всей жизни человека, у детей составляют от 90 до 98 % всех микробов кишечника в зависимости от возраста. В норме количество бифидобактерий у грудных детей составляет 10-10 КОЕ/г фекалий, у детей старшего возраста и у взрослых — 10—10 КОЕ/г. Бифидобактерии являются также представителями вагинальной микрофлоры, где обнаруживаются в количестве 10 КОЕ/мл вагинального содержимого.
Устойчивость в окружающей среде. При попадании на воздух мгновенно погибают.
Чувствительность к антимикробным препаратам. Чувствительны к действию обычно применяемых антисептиков и дезинфектантов.
16.7.5.2. Эубактерии (род Eubacterium) Морфология. Грамположительные неспоро- образующие палочки, подвижные или непод вижные. Типовой вид — Eubacterium foedans.
Культуральные свойства. Облигатные анаэробы. Штаммы варьируют по чувствительности к кислороду, некоторые могут расти только в восстановленных средах. Температурный оптимум роста — 37 °С; оптимум рН — 7,0.
Биохимическая активность. Хемооргано-трофы; сахарокластические и несахароклас-тические. Из углеводов или пептона образуют смеси органических кислот, часто с большим количеством масляной, уксусной или муравьиной кислот; не образуют пропионовую, молочную, янтарную, уксусную кислоты. Каталазу не образуют, гиппурат не гидролизуют.
Экологическая ниша. Встречаются в полостях человека и животных, в почве.
Чувствительность к антимикробным препаратам. Чувствительны к действию обычно применяемых антисептиков и дезинфектантов.
16.7.5.3. Пропионибактерии (род Propionibacterium)
Морфология. Грамположительные неспорооб-разующие неподвижные палочки. Плеоморфные, дифтероидные или булавовидные с одним концом округленным и другим — конусообразным или заостренным, окрашивающимся менее интенсивно. Клетки могут быть кокковидными, удлиненными, раздвоенными и даже разветвленными; располагаются по одиночке, парами, в виде латинских букв V и Y, короткими цепочками или группами в виде «китайских иероглифов». Типовой вид — Propionibacterium freudenreichii.
Культуральные свойства. От анаэробных до аэротолерантных. Большинство штаммов наиболее быстро растет в анаэробных условиях, многие штаммы хорошо растут в бульоне с пептоном, дрожжевым экстрактом и глюкозой в глубоких пробирках при свободном доступе воздуха, когда использованы большие количества инокулюма. Твин-80 стимулирует рост. Большинство штаммов растет в глюкозном
бульоне с 20 % желчи или 6,5 % NaCl. Колонии могут быть белого, серого, розового, красного, желтого или оранжевого цвета. Температурный оптимум роста — 30—37 °С, но могут расти в диапазоне температур 25—45 °С; оптимум рН — 7,0. Содержание ГЦ в ДНК рода — 59—66 мол.%.
Биохимическая активность. Хемоорганотрофы; ме-таболизируют углеводы, пептон, пируват или лактат. Продукты брожения включают комбинации пропио-новой и уксусной кислот и часто меньшие количества изовалериановой, муравьиной, янтарной или молочной кислот и С02. Ферментируют глюкозу до кислоты. Большинство штаммов образует аммиак из белка. Гиппурат не гидролизуют; нейтральный красный не восстанавливают.
Экологическая ниша. Кожа человека, пищеварительный тракт человека и животных; встречаются в молочных продуктах.
Чувствительность к антимикробным препаратам. Чувствительны к действию обычно применяемых антисептиков и дезинфектантов.
16.7.5.4. Гарднереллы (род Gardnerella)
Гарднереллы являются возбудителями ва-гиноза, антропонозной оппортунистической инфекции, вызываемой Gardnerella vaginalis в ассоциации с облигатными анаэробами, передаваемой половым путем, которая характеризуется поражением влагалища, повышением количества резко водянистых гомогенных выделений из влагалища с резким неприятным «рыбным» запахом.
Gardnerella vaginalis относится к роду Gardnerella; ранее эти микроорганизмы относились к роду Haemophillus, но независимость от Х- и V-факторов роста побудили выделить их в самостоятельный вид.
Морфология. Мелкие палочки или кокко-бациллы размером 1/2х0,3/0,6 мкм, часто образуют скопления, имеют метахроматические гранулы, выявляемые окраской по Нейссеру. Иногда образуют суданофильные включения. В мазках клетки располагаются по одиночке или парами, иногда наблюдается расположение в виде палисада или латинской буквы V, что более характерно для коринебактерий. Грамвариабельны: молодые 8—12-часовые культуры окрашиваются грамотрицательно, а культуры, выращенные на оптимальной среде, грамположительны. Структура клеточной
стенки с признаками грамположительных бактерий: в ее составе присутствуют треонин, триптофан, лизин, глутаминовая и ас-парагиновая кислоты, однако арабиноза (что характерно для коринебактерий), тейхоевые и диаминопимелиновая кислоты отсутствуют. По составу жирных кислот превалируют гексадекановая, октадеценовая и октадека-новая, однако гидроксилированные жирные кислоты, характерные для грамотрицатель-ных бактерий, отсутствуют. Капсул и жгутиков не имеют, спор не образуют.
Культуральные свойства. Факультативные анаэробы, капнофилы. Требовательны к питательным средам, на простых питательных средах не растут или дают слабый рост на кровяном агаре. Растут на сложных питательных средах с добавлением гемина и НАД. Требуют наличия в среде биотина, фолиевой кислоты, ниацина, тиамина и рибофлавина, а также пуринов и пиримидинов, рост стимулируют ферментируемые углеводы и некоторые пептоны. Гемолитические свойства вариабельны: не гемолизируют эритроциты барана, слабо гемолизируют эритроциты лошади. На средах с кровью донора образуют очень мелкие (0,25—0,44 мм в диаметре) колонии с зоной а- или (3-гемолиза, при дальнейшем культивировании среда приобретает шоколадный цвет. Для культивирования применяют среду КДС-1 (казеин, дрожжи, сыворотка) или V-агар (vaginalis). На плотных питательных средах через 24—48 ч образуют мелкие круглые выпуклые гомогенные гладкие бесцветные колонии. При дальнейшем культивировании колонии достигают 1 мм в диаметре, становятся тусклыми и матовыми. В жидких средах дают равномерное помутнение и осадок. Температурный оптимум роста — 35— 37 "С, но могут расти в диапазоне температур 25-42 "С; оптимум рН — 4,0. Содержание ГЦ в ДНК рода - 42-43 мол.%.
Биохимические активность. Хемооргано-трофы. Метаболизм бродильного типа, главный продукт брожения — уксусная кислота; некоторые штаммы способны образовывать молочную, янтарную и муравьиную кислоты. Ферментативная активность низкая: каталазу и оксидазу не образует, разлагает гиппурат, гидролизует крахмал, расщепляет мальтозу
до кислоты. Некоторые штаммы расщепляют глюкозу.
Антигенная структура. В РП выделяют 7 серогрупп гарднерелл. Общий антиген, представляющий гликопептид, определяют в развернутой РА и ИФА. В РИФ выявлены общие антигены с Candida albicans.
Факторы патогенности. Некоторые штаммы гарднерелл продуцируют нейроминидазу, разрушающую гликопротеиды слизистой оболочки влагалища.
Устойчивость в окружающей среде. Невысокая. Гарднереллы чувствительны к метронида-золу и триметоприму, к действию обычно применяемых антисептиков и дезинфектантов.
Эпидемиология. Источник инфекции — больной человек. Механизм передачи — контактный, путь передачи — половой. Восприимчивость к гарднереллам, как ко всем УПМ, низкая улиц с нормальным иммунным статусом и повышенная у иммунокомпро-миссных хозяев. Распространен гарднереллез повсеместно, чаще болеют женщины репродуктивного возраста.
Патогенез. Экологической нишей является влагалище. Гарднереллы вызывают у женщин бактериальные вагиниты, особенно при нарушениях микробиоценоза влагалища (при дис-биозах) в результате антибиотикотерапии или других причин. Предрасполагающими факторами служат сахарный диабет, беременность, применение гормональных противозачаточных средств, менопауза, эндокринные нарушения, приводящие к дисбалансу эстрогена и прогестерона в организме. Все это приводит к изменению рН и концентрации сахара на слизистой влагалища, в результате чего гарднереллы в ассоциации с анаэробами, такими как бактероиды, пептострептококки и моби-лункусы, вызывают вагинит. Ни один из этих микроорганизмов в отдельности вагинита не вызывает. Поскольку в ассоциации с гардне-реллами выделяются самые разные виды не-спорообразующих анаэробов, то эти вагиниты получили название неспецифических.
Клиника. Характеризуется образованием пенистых влагалищных выделений белого или серого цвета с резким неприятным «рыбным» запахом, обусловленным образованием аномальных аминов. Признаки воспаления отсутствуют. У мужчин, как правило,
развивается балонит, неспецифический уретрит или воспалительные процессы полового члена, протекающие сочетание с вагинитом у женщины — полового партнера. Бактериальный вагинит может приводить к тяжелым последствиям, таким как преждевременные роды, снижение массы тела новорожденных, преждевременный разрыв оболочек, воспалительные заболевания органов малого таза, патологические маточные кровотечения. До 1/3 женщин, предъявляющих различные жалобы на неприятные ощущения в области влагалища, страдают бактериальным вагинитом.
Иммунитет. После перенесенного заболевания не формируется. Рецидивы обусловлены нарушениями иммунного статуса, в частности дисбиозом влагалища с нарушением колонизационной резистентности.
Микробиологическая диагностика. Материалом для исследования служат мазки из влагалища и шейки матки. Для диагностики используют бактериоскопический и бактериологический методы. Обычно диагноз ставят бактериоскопически по обнаружению ключевых клеток, т. е. клеток эпителия влагалища, покрытых большим количеством грамвариа-бельных бактерий.
Во влажном препарате влагалищных выделений (выделения из влагалища, смешанные в соотношении 1:1 с физиологическим раствором, которые исследовали при сухой микроскопии). На типичной ключевой клетке бактерии прикрепляются к ее краю. Микроскопию проводят без иммерсии при большом увеличении, в препарате не типично наличие большого количества лейкоцитов. Ключевые клетки покрыты огромным количеством тонких палочек или коккобактерий, что придает поверхности клетки зернистый вид и неясность очертаний. Лактобациллы в окрашенных по Граму мазках почти или полностью замещаются профузно растущей бактериальной флорой, состоящей из трихо-монад и анаэробных бактерий.
Кроме того, используют следующие признаки:
1) выделения из влагалища с рН ниже 4,5;
2) повышение количества резко водянистых гомогенных выделений из влагалища, отсутствие лейкоцитоза влагалищных выделений;
3) появление резкого запаха при добавлении к выделениям 10% раствора КОН.
Бактериологическое исследование проводят редко.
Лечение. Используют метронидазол, который обрывает патологический процесс за счет элиминации неспорообразующих анаэробов, входящих в состав микробной ассоциации, необходимой для развития вагинита, однако при этом гибнут и вагинальные лактобациллы, что усугубляет дисбиоз влагалища. Поэтому наряду с метронидазолом назначают вагинальные эубиотики для восстановления нормофлоры влагалища, погибшей при химиотерапии. Иногда используют ампициллин. Не рекомендуется лечить мужчин — партнеров больных женщин, поскольку лечение не влияет на частоту рецидивов.
Профилактика. Специфическая профилактика отсутствует.
16.7.5.5. Мобилункусы (род Mobiluncus)
Морфология. Тонкие изогнутые палочки размером 0,4/0,6x1,2/4,0 мкм, с заостренными концами; располагаются по одиночке либо парами в виде «крыла чайки». Грамвариабельны, могут окрашиваться гра-мотрицательно, но структура клеточной стенки характерна для тенерикутных бактерий. Подвижны, имеют латеральные или субполярно расположенные жгутики. Типовой вид Mobiluncus curtisii.
Биохимическая активность. Хемооргано-трофы. Метаболизм ферментативного типа, каталазаотрицательны, индолотрицательны.
Устойчивость в окружающей среде. При попадании на воздух мгновенно погибают.
Чувствительность к антимикробным препаратам. Чувствительны к действию обычно применяемых антисептиков и дезинфектантов.
Дата добавления: 2015-08-26 | Просмотры: 847 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 | 34 | 35 | 36 | 37 | 38 | 39 | 40 | 41 | 42 | 43 | 44 | 45 | 46 | 47 | 48 | 49 | 50 | 51 | 52 | 53 | 54 | 55 | 56 | 57 | 58 | 59 | 60 | 61 | 62 | 63 | 64 | 65 | 66 | 67 | 68 | 69 | 70 | 71 | 72 | 73 | 74 | 75 | 76 | 77 | 78 | 79 | 80 | 81 | 82 | 83 | 84 | 85 | 86 | 87 | 88 | 89 | 90 | 91 | 92 | 93 | 94 | 95 | 96 | 97 | 98 | 99 | 100 | 101 | 102 | 103 | 104 | 105 | 106 | 107 | 108 | 109 | 110 | 111 | 112 | 113 | 114 | 115 | 116 | 117 | 118 | 119 | 120 | 121 | 122 | 123 | 124 | 125 | 126 | 127 | 128 | 129 | 130 | 131 | 132 | 133 | 134 | 135 | 136 | 137 | 138 | 139 | 140 | 141 | 142 | 143 | 144 | 145 | 146 | 147 | 148 | 149 | 150 |
|