Лабораторная диагностика лептоспироза
Для лабораторной диагностики лептоспироза пользуются следующими методами исследования:
· бактериоскопическим
· биологическим
· серологическим
Материал для исследования (табл. 3). В течение первой недели болезни лептоспиры находятся в крови. С 1-го по 5-й день болезни производят посевы крови, заражение лабораторных животных и микроскопию цитратной крови. На 5-15-й день болезни в сыворотках крови больных появляются агглютинины и лизины, которые определяются с помощью РМА. В течение 2-й недели болезни лептоспиры накапливаются в почках и начинают выделяться с мочой. С 10-16-го дня болезни проводят исследование мочи, ликвора, паренхиматозных органов на присутствие лептоспир методом микроскопии.
Таблица 3
Лабораторная диагностика лептоспироза. Взятие материала.
Период болезни
| Материал
| Метод исследования
| с 1 по 5-й день
| Кровь
| Бактериологический (посевы)
|
| Кровь с добавлением антикоагулянта* (два объема крови и 1 объем 1,5% р-ра лимоннокислого натрия, смесь отстаивают при комнатной температуре 2 ч.)
| Бактериоскопический (микроскопия в темном поле)
| на 5-15 день
| Сыворотка крови - 0,5 мл
(парные сыворотки с интервалом 7-10 дней)
| Серологическая реакция микроагглютинации (РМА)
| с 10-16-го дня
| Моча (средняя порция), ликвор
|
| * в этих условиях лептоспиры остаются жизнеспособными до 11 суток.
Оценка диагностической значимости полученных результатов представлена в табл. 4.
Таблица 4
Оценка диагностической значимости полученных результатов
Метод
| Сроки выдачи результатов, их оценка
| Бактериоскопический
| В тот же день
| Серологический
| На следующий день от момента поступления пробы в лабораторию
В случаях спорадических заболеваний:
Обнаружение нарастания титров антител даже в не высоких разведениях (1:10 – 1:100) является абсолютным доказательством наличия заболевания.
При вспышках лептоспироза:
Достаточно однократного исследования (диагностический титр 1:100 и выше).
| Бактериологический
| При отсутствии роста в течение 3-х месяцев посевы считаются отрицательными.
| Бактериоскопия. Из-за того, что лептоспиры с трудом воспринимают окраску, все наблюдения производят с живыми возбудителями в темном поле. Для исследования готовят препараты «раздавленная капля». Бактериоскопия крови и мочи в темном поле часто дает ошибочные результаты, и в настоящее время ее использование нецелесообразно.
Выделение возбудителя. Для выделения культур лептоспир кровь, мочу, спинномозговую жидкость засеивают в количестве 5-20 капель в 3-5 пробирках с питательной средой (желательно у постели больного) или дистиллированной водой. Самой простой питательной средой является 10% раствор сыворотки кролика в дистиллированной воде с рН 7,2-7,4. Для выявления роста лептоспир через 10 дней от момента посева из каждой пробирки или ампулы готовят препарат «раздавленная капля» и микроскопируют в темном поле. Выделение лептоспир требует до 2 нед., но это важно, так как только таким путем может быть идентифицирован серотип возбудителя. Посев мочи менее надежен.
Биологическая проба. С целью выделения лептоспир с успехом можно использовать введение материала золотистым молодым хомякам, морским свинкам и кроликам сосункам. Наблюдения за зараженными животными не отличаются от таковых за животными, зараженными другими возбудителями.
Серологический метод. Серологический метод диагностики является наиболее простым, общедоступным и быстрым. Как уже упоминалось, агглютинины в сыворотке крови при лептоспирозе обнаруживаются с 3-го-5-го дня болезни. Титры их достигают максимума чаще на 14-17-й день с момента заболевания, а затем постепенно снижаются. Агглютинины в сыворотке крови переболевших лептоспирозом сохраняются длительное время (годами и десятками лет).
Окончательный диагноз лептоспироза ставится при выявлении лептоспир в крови, ликворе или моче, нарастании титра специфических антител в реакции микроагглютинации (РМА) или обнаружении IgM (ИФА на полимерных мембранах).
Дата добавления: 2015-01-12 | Просмотры: 1222 | Нарушение авторских прав
1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 | 34 | 35 | 36 | 37 | 38 | 39 | 40 | 41 | 42 | 43 | 44 | 45 | 46 | 47 | 48 | 49 | 50 | 51 | 52 | 53 | 54 | 55 | 56 | 57 | 58 | 59 | 60 | 61 | 62 | 63 | 64 | 65 | 66 | 67 | 68 | 69 | 70 | 71 | 72 | 73 | 74 | 75 | 76 | 77 | 78 | 79 | 80 | 81 | 82 | 83 | 84 | 85 | 86 | 87 | 88 | 89 | 90 | 91 | 92 | 93 | 94 | 95 | 96 | 97 | 98 | 99 | 100 | 101 | 102 | 103 | 104 | 105 | 106 | 107 | 108 | 109 | 110 | 111 | 112 | 113 | 114 | 115 | 116 | 117 | 118 | 119 | 120 |
|