АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Половая дифференцировка

Прочитайте:
  1. F52 Половая дисфункция; не обусловленная органическим расстройством или заболеванием
  2. II. Дифференцировка типа боли и выбор обезболивающей терапии
  3. VII. Половая система.
  4. Дифференцировка B–лимфоцитов
  5. Дифференцировка T–лимфоцитов
  6. Дифференцировка лимфоцитов на кластеры дифференциации
  7. Дифференцировка Т-лимфоцитов.
  8. Женская половая система
  9. Женская половая система
  10. Женская половая система

Генетический пол

Генетический пол определяется половыми хро­мосомами.

При оплодотворении яйцеклетки сперматозо­идом, который содержит гаплоидный набор с X-или Y-хромосомой, эмбрион получает женский (46,XX) или мужской (46,XY) набор хромосом. На Y-хромосоме локализуется ген, характеризу­ющийся высокой консервативностью [так назы­ваемая область Y-хромосомы, детерминирующая



 


 



 


 


Рис. 7-1 Схема биосинтеза половых гормонов.

пол (SRY — Sex-determinierende Region des Y-Chromosoms)!, или фактор, детерминирующий развитие яичек (TDF — Testis-determinierende Faktor) (Sinclair et al., 1990).

Гонадный пол

В течение первых нескольких недель эмбрио­нального развития гонады обоего пола бывают индифферентными и бипотентными. Под влия­нием TDF на 7-й неделе после зачатия зачатки гонад дифференцируются в яички. При отсут­ствии TDF (SRY) с 10-й недели начинается диф-ференцировка гонад в яичники.

Развитие яичников начинается на 10-й неделе после зачатия. На 14-й неделе в яичниках уже можно различить примордиальные фолликулы. До самого рождения яйцеклетки подвергаются редукционно­му делению, которое прерывается в профазе. Мей-оз яйцеклетки завершается лишь непосредственно перед овуляцией. Большая часть овогоний, общее количество которых достигает 6—7 млн, к 20-й не­деле атрезируется. К моменту рождения девочки у нее остается 1 млн овогоний, к моменту наступле­ния менархе — 400 000. Лишь 400 яйцеклеток под­вергаются овуляции (Baker, 1963).


Соматический пол

У эмбрионов вначале развиваются два парных половых протока, которые дают начало мужским или женским половым органам: вольфовы и мюл-леровы протоки. При отсутствии яичек вольфовы протоки подвергаются обратному развитию, а из мюллеровых протоков развиваются матка, маточ­ные трубы и проксимальный отдел влагалища. Наружные половые органы из индифферентных зачатков дифференцируются по женскому типу (урогенитальный синус, урогенитальный бугорок), если не подвергаются вирилизирующему дей­ствию андрогенов. Наличия функционирующих яичников для этого не нужно, необходимо толь­ко отсутствие яичек.

В противоположность этому, дифференциров-ка по мужскому типу всегда представляет собой активный процесс. Яички плода продуцируют тестостерон и антимюллеров гормон. Под влия­нием антимюллерова гормона, который выраба­тывается клетками Сертоли, происходит обрат­ное развитие мюллеровых протоков (Josso, 1975), в то время как высокая локальная концентрация стимулирует развитие вольфовых протоков (Siiteri u. Wilson, 1974). Из вольфовых протоков образу­ются придатки яичек, семявыносящие протоки и



 


 


семенные пузырьки. Из устьев вольфовых про­токов в урогенитальном синусе образуются про­статическая и мембранозная части уретры.

Наружные половые органы в течение первых нескольких недель эмбрионального развития так­же индифферентны и бипотентны. При наличии яичек под влиянием тестостерона, вырабатывае­мого клетками Лейдига, происходит слияние урет­ральных и губно-мошоночных складок, из кото­рых образуются пещеристые тела полового члена и мошонка. На 12-й неделе после зачатия разви­тие и образование мошонки завершается. Нару­шение андрогенного влияния в течение этого периода всегда приводит к развитию половых органов по промежуточному типу. После 12-й недели андрогены уже неспособны вызвать сра­щение губно-мошоночных складок, если оно к этому времени не было завершено.

Отсутствие у девочек яичек становится при­чиной обратного развития вольфовых протоков. Слияние мюллеровых протоков начинается с 6-й недели после зачатия. Из их краниального отде-


ла образуются маточные трубы, каудальные от­делы сливаются, образуя маточно-влагалищный канал. Этот зачаток связывается с эпителием уро-генитального синуса, из которого формируется влагалище (O'Rahilly, 1977) (рис. 7-2).

Психический пол

Многочисленные эксперименты на животных показали, что как у низших млекопитающих, так и у приматов гормоны в критические фазы раз­вития оказывают решающее влияние на цикли­ческую (женскую) или тоническую (мужскую) секрецию гонадотропинов, на мужской и женс­кий тип полового поведения и половой димор­физм развития головного мозга.

У людей знания добываются в процессе на­блюдения за «экспериментами» самой природы. Большинство клинических исследований, каса­ющихся гормональных нарушений в период раз­вития, выполнены на пациентках с АГС. У них


Рис. 7-2. Схема нормальной половой дифференцировки.



 


 


были описаны мужской тип поведения («девоч­ки с мальчишеским озорством»), би- или гомо­сексуальная ориентация (Erhardt, 1979; Erhardt u. Meyer/Bahlburg, 1981; Money et al., 1984), однако в исследованиях некоторых авторов эти данные не подтвердились (Muller et al., 1982).

Девочки, матери которых во время беременнос­ти лечились гестагенными препаратами с андро-генным действием, обнаруживали мужской тип поведения (Money u. Erhardt, 1972). С другой сто­роны, гестагенные препараты, сходные по своему действию с прогестероном, препятствовали маску­линизирующему эффекту андрогенов и эстрогенов.

В отличие от АГС, при полной резистентности к андрогенам (синдром тестикулярной феминиза­ции) андрогенное влияние in utero отсутствует. Половая идентификация, а также тип поведения при этом женские (Masica et al., 1971). Уровень тестостерона в сыворотке крови этих пациенток соответствует верхней границе нормы для муж­чин, и возможна беспрепятственная ароматиза­ция его с превращением в эстрогены.

Пациентки с недостаточностью 5а-редуктазы рождаются с наружными половыми органами, развитыми по женскому типу, и развиваются как девочки. В пубертатном периоде у них отмечает­ся выраженная вирилизация. В группе таких па­циенток из Доминиканской Республики в пубер­татном периоде большинство изменили половую роль и половую идентичность (Imperato-McGinley et al., 1979). Мнение о том, что эти наблюдения подтверждают решающее значение биологичес­ких (гормональных) факторов в половой иденти­фикации, оспаривается Rubin et al. (1981). Со­гласно этим авторам, в изменении половой идентичности пациенток, которые наблюдались Imperato-McGinley et al., решающую роль сыгра­ли социокультурные условия в Доминиканской Республике, так как в сравнимой группе пациен­ток в США ни одна из них не перестала причис­лять себя к женскому полу, несмотря на вирили­зацию в пубертатном периоде.

Из сказанного выше следует, что повышенный уровень андрогенов во внутриутробном периоде у пациенток с АГС, несмотря на вирилизирующее действие на развитие половых органов, по-види­мому, не оказывает существенного влияния на по­ловую идентификацию и психосексуальную ори­ентацию (Erhardt, 1979; Erhardt et al., 1968; Money u. Schwarty, 1977). Половая идентификация, по-видимому, в значительной степени зависит от по­ловой роли, в которой ребенок растет. Амбивален­тная самоидентификация, вероятно, наблюдается


в тех случаях, когда родители в воспитании ребен­ка не придерживаются строго определенной роле­вой линии (Faiman u. Winter, 1974). Большинство исследователей основными в развитии половой идентификации считают либо врожденные, либо приобретенные факторы, в то время как речь идет скорее о взаимодействии гормональных и психо­социальных факторов (Rubin et al., 1981).

7.3. Нарушение половой дифференцировки

Нарушение половой дифференцировки может произойти на любой ее стадии. В зависимости от характера нарушения, степени его выраженности и стадии, на которой оно происходит, возможен ши­рокий спектр патологических изменений — от не­значительных отклонений, не имеющих клиничес­кого значения, до различной степени выраженности амбивалентности или полного изменения сомати­ческого пола по отношению к генетическому.

Истинный гермафродитизм, при котором у па­циента имеются как яички, так и яичники, встреча­ется редко. Чаще речь идет о пациентах с генетичес­ки детерминированным мужским полом, имеющих яички (и у которых при генетическом исследовании идентифицируют TDS), у которых маскулинизация недостаточно выражена (ложный мужской герма­фродитизм), или о пациентках с генетически детер­минированным женским полом, у которых, несмотря на функционирующие яичники, отмечается вири­лизация (ложный женский гермафродитизм).

Ложный мужской гермафродитизм

При ложном мужском гермафродитизме па­циенты имеют генетически детерминирован­ный мужской пол (при генетическом иссле­довании у них выявляют TDS), яички, но недостаточно маскулинизированные внутрен­ние и/или наружные половые органы.

Выраженность клинических проявлений широ­ко варьирует — от гениталий, развитых полностью по женскому типу, и множества вариантов амбива­лентных гениталий до внешне нормальных мужс­ких гениталий с гипоспадией. Недостаточность вирилизации детей с генетически детерминирован­ным мужским полом классифицируют в соответ­ствии с данными, приведенными в табл. 7-1 и на рис. 7-3 (Sinnecker et al, 1985; Sinnecker et al., 1996).



 


 


Таблица 7-1. Классификация фенотипов при ложном мужском гермафродитизме (Sinnecker et al., 1997)

 

Тип Фенотип Клинические проявления
  Мужской Нарушение сперматогенеза и/или нарушение вирилизации в пубер­татном периоде
  Преимуще­ственно мужской Изолированная гипоспадия и/или микропенис Гипоспадия высокой степени, раз­деленная мошонка
  Амбива­лентный Микропенис, напоминающий кли­тор, разделенная мошонка, напо­минающая половые губы, про-межностно-мошоночная гипоспа­дия или урогенитальный синус с коротким, слепо заканчивающим­ся влагалищем
  Преимуще­ственно женский Гипертрофия клитора и/или сра­щение половых губ, урогениталь­ный синус с коротким, слепо за­канчивающимся влагалищем
  Женский Отсутствие признаков вирилиза­ции до наступления пубертатного периода В пубертатном периоде: вирили­зация, обусловленная недостаточ­ностью 5а-редуктазы, феминиза­ция, обусловленная дефектом анд-рогенных рецепторов

Выделяют следующие причины недостаточной вирилизации:

• Функциональная недостаточность яичек у пло­да (дисгенезия гонад).

• Утрата какой-либо функции яичек, которые в остальном развиты нормально (дефект биосин­теза тестостерона, гипоплазия клеток Лейдига).

• Неспособность тканей реагировать на тестос­терон, вырабатываемый нормально развиты­ми яичками (резистентность к андрогенным гормонам, недостаточность 5а-редуктазы).


Нарушения развития половых желез и хромосомные нарушения

Нарушение развития яичек бывает обусловле­но в основном хромосомными аберрациями, од­нако в некоторых случаях причину его устано­вить не удается. В зависимости от степени нарушения дифференцировки, а также от того, нарушено развитие одного или обоих яичек, по­ловые органы индивидуума могут быть развиты по женскому типу, амбивалентно или по мужс­кому типу. В половине случаев в основе дисгене-зии гонад лежит мозаицизм 45,X-/46,XY (Ferguson-Smith, 1965). Более чем у половины этих пациентов наружные половые органы развиты по женскому типу и имеются признаки вирилиза­ции. Причиной этих отклонений считают струк­турные изменения Y-хромосомы в анафазе (Madan et al., 1979).

В отличие от отмеченной выше аномалии, при дисгенезии гонад у пациентов с кариотипом 46,XY структурные изменения в Y-хромосоме отсутству­ют. Этиология некоторых заболеваний, проявля­ющихся различными аномалиями развития, ус­тановлена: мутации гена WT1 обнаруживаются при синдромах Дени—Драша и WAGR (Mueller, 1949), при синдроме Смита—Лемли—Опица от­мечается недостаточность дегидрохолестерин-С7-редуктазы, которая является причиной повыше­ния уровня 7-дегидрохолестерина в сыворотке крови (Tint et al., 1995). Дисгенезию гонад может вызвать также удвоение локуса DSS на Хр21 и мутации гена SOX9 на 17q21, в этих случаях она сочетается с кампомелической дисплазией (Wag­ner et al., 1949).

Неполная (смешанная) дисгенезия гонад

Изменения в яичках при нарушении их диффе­ренцировки могут быть выражены в различной сте­пени, одинаково с обеих сторон или быть асим-


 


Рис. 7-3. Классификация фенотипов при ложном мужском гермафродитизме (Sinnecker et al„ 1996, 1997).



 



Рис. 7-4. Неполная дисгенезия гонад (по­раженная область при тех или иных на­рушениях окрашена в красный цвет или затушевана)


метричными. Они могут затрагивать одно яичко при нормально развитом другом, оба яичка в различ­ной степени вплоть до полной дисгенезии обоих яичек, которые при этом имеют вид соединитель­нотканных тяжей, расположенных в позиции яич­ников (стрековые гонады). Такое разнообразие мор­фологических вариантов обусловливает различную степень функциональных нарушений. Недостаточ­ная секреция тестостерона и антимюллерова гор­мона приводит к недостаточной стимуляции воль-фова протока на стороне поражения и гипоплазии семенных пузырьков, семявыносящего протока и придатка яичка. Недостаточная секреция также на­рушает обратное развитие мюллерова протока на стороне поражения, что обусловливает персистен-цию образующихся из него анатомических струк­тур (маточная труба, матка, проксимальный отдел влагалища) с различной степенью их дисплазии (рис. 7-4).

Клиническая картина

Клиническая картина охватывает женский, амбивалентный и мужской фенотипы и все мно-


гообразие промежуточных форм. Потеря функ­ции дисгенетичным яичком обычно одинаково влияет на секрецию тестостерона и антимюлле­рова гормона. Если секреция нарушена настоль­ко, что приводит к недостаточной маскулиниза­ции наружных половых органов и развитию их по промежуточному или женскому типу, то обыч­но наблюдается персистенция анатомических структур, образующихся из мюллеровых прото­ков (маточные трубы, матка, проксимальный от­дел влагалища). Эта важная особенность дисге­незии гонад, клинические проявления которой столь разнообразны, позволяет отличить ее от других причин ложного мужского гермафроди­тизма (рис. 7-5).

Диагностика

Заподозрить неполную дисгенезию гонад сле­дует в тех случаях, когда у пациента с гениталия­ми промежуточного типа имеется матка и либо пальпируются гонады (это всегда яички), либо при генетическом анализе обнаруживают Y-хро­мосому.


 


Кариотип обычно бывает 46,XY, 45,X/46,XY, 45,X/47,XYY или подобный этому. Наружные половые органы развиты по женскому (отмеча­ется гипертрофия клитора), промежуточному или мужскому типу. Отмечается различная сте­пень дифференцировки вольфовых протоков и соответственно обратного развития мюллеровых протоков. Гонады представлены соединительно­тканными тяжами (стрековые) либо дисгенетич-ные или одно яичко дисгенетично, а другое раз­вито нормально (смешанная дисгенезия гонад). Половое созревание не наступает или отмечает­ся вирилизация. Если появляется гинекомас­тия, ее причиной обычно бывает гонадобласто-ма, продуцирующая эстрадиол. Концентрация гонадотропинов (ЛГ, ФСГ) в плазме крови со 2-го года жизни повышена, тестостерона — сни­жена.

Лечение

При решении вопроса, какой пол следует выб­рать для растущего ребенка, исходят из того, при каком поле скорее всего следует рассчитывать на нормальную функцию наружных половых орга-


нов. Это определяют в зависимости от анатоми­ческих особенностей, возможности хирургичес­кой коррекции и культурного уровня семейного окружения ребенка.

Если ребенок будет воспитываться как девоч­ка, яички следует удалить. Оставление их таит в себе двоякую опасность. Во-первых, остаточная функция яичек обусловит гетеросексуальное (муж­ское) течение пубертатного периода. Во-вторых, дисгенетичные гонады, клетки которых содержат Y-хромосому, часто малигнизируются. Такая пред­расположенность к развитию гонадобластомы объясняется присутствием на Y-хромосоме в так называемом гонадобластомном локусе гена GBY (Tsuchiya, 1995). Риск злокачественного перерож­дения в 10-летнем возрасте составляет 2%, в 20-летнем — 16%, в 30-летнем — 27,5% (Manuel et al., 1976). Обычно развивается гонадобластома или герминома. В период, соответствующий пубертат­ному, детям проводят заместительную терапию эстрогенами и гестагенами.

Полная (чистая) дисгенезия гонад

При полной, или чистой, дисгенезии гонад отмечается фиброзное их перерождение (стреко­вые гонады). Дети имеют кариотип 46,XY или 46,XX. Дисгенезия гонад при кариотипе 46,XY в 10% случаев бывает обусловлена мутацией гена SRY (Ferguson-Smith u. Goodfellow, 1995). В ос­тальных случаях причиной дисгенезии, по-види­мому, бывают мутации аутосомных генов диф­ференцировки.

Клиническая картина

При полной дисгенезии гонад отмечается нор­мальный женский фенотип (внутренние и наруж­ные половые органы развиты нормально, по жен­скому типу). Схематически это показано на рис. 7-6. У большинства этих пациенток отсутствуют признаки полового созревания в пубертатном периоде и отмечается первичная аменорея. У па­циенток с кариотипом 46,XY (синдром Суайера) чаще наблюдается гипертрофия клитора. Риск злокачественного перерождения стрековых гонад, клетки которых содержат Y-хромосому, такой же, как при смешанной дисгенезии гонад. Однако злокачественное перерождение дисгенетичных гонад, не содержащих Y-хромосому, является ред­костью (см. рис. 7-6 и 7-7).



 


 


Рис. 7-6. Полная дисгенезия гонад (пора­женная область при тех или иных нару­шениях окрашена в красный цвет или затушевана)



Рис. 7-7. Пациентка с дисгенезиеи гонад и кариотипом 46.XY (Sinnecker et ot 1982).



 


 


Диагностика

Диагноз полной дисгенезии гонад ставят на основании отсутствия признаков полового созре­вания и гипогонадотропного гипогонадизма у па­циентки с нормальным мужским или женским набором хромосом. При УЗИ яичники у них не идентифицируются, в остальном наружные и внут­ренние половые органы развиты нормально, по женскому типу.

Лечение

Лечение заключается в заместительной терапии эстрогенами и гестагенами, назначаемой в возра­сте, соответствующем пубертатному периоду. В связи с высоким риском злокачественного пе­рерождения стрековые гонады у пациенток с ка-риотипом 46,XY следует удалить в ранние сроки (Sinnecker et al., 1982). Механизмы развития лож­ного мужского гермафродитизма приведены на рис. 7-8.


Нарушение биосинтеза тестостерона Этиология и патогенез

О нарушении биосинтеза тестостерона свидетель­ствует недостаточная вирилизация у лиц с генетичес­ки мужским полом и выраженным в различной сте­пени женским фенотипом. Поскольку выработка антимюллерова гормона не нарушена, то, в отличие от дисгенезии гонад, происходит полная регрессия мюллеровьгх протоков. Нарушение следующих трех звеньев может вызвать нарушение биосинтеза глю-кокортикоидных и половых гормонов:

• Недостаточность СОРБ.

• Недостаточность Зв-гидросистероиддегидроге-назы типа 2.

• Недостаточность СУР17-(17а-гидроксилазы-

17,20-лиазы).

Недостаточность следующих двух ферментов вызывает нарушение биосинтеза только половых гормонов:. СУР17-(17,20-лиазы).

• 17(3-гидроксистероиддегидрогеназы типа 3.


 


Рис. 7-8. Механизмы развития ложного мужского гермафродитизма (поражен­ная область при тех или иных наруше­ниях окрашена в красный цвет или за­тушевана).



 


 



 


Рис. 7-9. Схема биосинтеза стероидных гормонов при недостаточности СОРБ,


Недостаточность СОРБ

Холестерин переносится с помощью СОРБ с наружной поверхности митохондриальной мембраны на внутреннюю, где при участии фермента CYP11A1 (цитохром P450scc) исполь­зуется в качестве субстрата для биосинтеза сте­роидных гормонов (Bose et al., 1996). Недоста­точность СОРБ вызывает нарушение синтеза всех стероидных гормонов в равной мере. Кли­нически это проявляется симптомами недоста­точности глюко- и минералокортикоидов и по­ловых гормонов.

Клиническая картина

Ребенок имеет женский или амбивалентный фенотип. Влагалище заканчивается слепо, произ­водные мюллеровых протоков отсутствуют. Воль-фовы протоки находятся в рудиментарном состо­янии. Тяжелая недостаточность коркового веще­ства надпочечников, если ее не диагностировать и не лечить своевременно, быстро приводит к смер­ти. Все выжившие к настоящему времени дети росли как девочки. В пубертатном периоде воз­можны легкие проявления вирилизации (рис. 7-9 и 7-10).


Диагностика

Диагностическое значение имеют очень низ­кий уровень всех стероидных гормонов в плаз­ме крови (глюкокортикоидов, минералокорти­коидов, половых гормонов) и повышенный уро-

Рис. 7-10. Пациентка (кариотип 46,XY) с нарушением биосинтеза стероидов в надпочечниках и половых железах. Обращает на себя внимание бронзовый цвет кожи.



 


 


вень АКТГ, ренина, иногда — гонадотропинов, гиперплазия надпочечников со смещением по­чек в каудальном направлении при УЗИ и ги-перпигментированная кожа, имеющая бронзо­вый цвет. Стимуляция АКТГ не вызывает по­вышения уровня кортизола в плазме крови. Диагностика должна включать также анализ ДНК.

Лечение

Жизненно необходима заместительная тера­пия минерало- и глюкокортикоидами. Во избе­жание вирилизации в пубертатном периоде го­нады желательно удалить до его наступления. В пубертатном периоде назначают эстрогены. Для индуцирования роста волос на лобке назна­чают малые дозы тестостерона.

Недостаточность ЗЬ-гидроксистероиддетидрогеназы

Этиология и патогенез

При недостаточности Зр-гидроксистероидде-гидрогеназы происходит блокирование биосин­теза стероидных гормонов на ранней его стадии, в результате возникает недостаточность как глю-ко- и минералокортикоидов, так и половых гор­монов. В основе заболевания лежит мутация гена HSD3B2, кодирующего фермент Зр-гидроксисте-роиддегидрогеназа-А4 5-изомеразу типа 2, который находится в основном в надпочечниках и поло­вых железах.

Клиническая картина

Клинические проявления отличаются боль­шим разнообразием. Отмечаются амбивалентные гениталии с микропенисом, гипоспадия, непол­ное сращение губно-мошоночных складок, пер-систенция урогенитального синуса, слепо за­канчивающееся влагалище и в зависимости от степени недостаточности фермента — выражен­ные в различной степени симптомы недостаточ­ности коркового вещества надпочечников. Внут­ренние половые органы развиты нормально, по мужскому типу, производные мюллеровых про­токов отсутствуют. В пубертатном периоде от­мечаются незначительная вирилизация и гине­комастия.


Диагностика

Для заболевания характерна повышенная кон­центрация 17р-гидроксипрегненолона и дегид-роэпиандростерона. Поскольку концентрация этих гормонов может быть повышенной и у здо­ровых новорожденных, целесообразно провести стимуляционную пробу с АКТГ и ХГ. Диагнос­тика включает также анализ ДНК.

Лечение

Назначают заместительную терапию глюко­кортикоидами, а также минералокортикоидами (в зависимости от степени недостаточности Зв-гидроксистероиддегидрогеназы). В пубертатном периоде проводят заместительную терапию по­ловыми гормонами. При микропенисе начина­ют раннюю терапию тестостероном (Chung et al., 1987).

Недостаточность фермента СУР-(17а-гидроксилазы-17,20-лиазы)

Фермент CYP (цитохром Р450с17) катализирует гидроксилирование прегненолона и прогестерона в 17а положении (гидроксилазная активность) и от­щепление боковой цепи от образовавшегося 17а-гидроксилированного субстрата (17,20-лиазная ак­тивность). Несмотря на то что этот фермент коди­руется одним геном (Conte et al., 1994), активность его может нарушаться по-разному. Так, возможно нарушение одновременно гидроксилазной и 17,20-лиазной активности или изолированное нарушение одной из них. В зависимости от этого клиническая картина проявляется симптомами недостаточности 17а-гидроксилазы-17,20-лиазы или изолированной недостаточности 17,20-лиазной активности.

Недостаточность 17а-гидроксилазной активнос­ти приводит к нарушению синтеза глюкокортикои-дов и половых гормонов. Повышенное образование 11-дезоксикортикостерона и кортикостерона вызы­вает артериальную гипертензию, гиперкалиемию и подавление активности ренина плазмы. Недостаточ­ность бывает выражена в различной степени, что и определяет клинические проявления.

Клиническая картина

Для заболевания характерно разнообразие клинических вариантов. Больные могут иметь



 


 


генетически детерминированный мужской пол при женском фенотипе со слепо заканчиваю­щимся влагалищем, различные варианты амби­валентных половых органов или мужской фе­нотип в сочетании с микропенисом и гипоспа-дией. Производные вольфовых протоков гипопластичны, производные мюллеровых про­токов отсутствуют. В пубертатном периоде воз­можны вирилизация и гинекомастия. Минера-локортикоидный эффект высоких концентра­ций дезоксикортикостерона и кортикостерона вызывает задержку натрия и воды, потерю ка­лия, увеличение объема циркулирующей плаз­мы, артериальную гипертензию с гипоренине-мией и алкалозом.

Диагностика

Характерна повышенная концентрация в плаз­ме АКТГ, 11 -дезоксикортикостерона, кортикос­терона и прогестерона и пониженная концентра­ция альдостерона, 17а-гидроксипрогестерона, кортизола и половых гормонов. Отмечаются так­же гипоренинемическая артериальная гипертен-зия и гипокалиемический алкалоз.

Лечение

Заместительная терапия глюкокортикоидами приводит к нормализации артериального давле­ния и уровня калия в сыворотке крови. Половые гормоны назначают в пубертатном периоде. Из-за возможности вирилизации у лиц с генетичес­ки детерминированным мужским полом до на­ступления пубертатного периода яички желатель­но удалить.

Изолированная недостаточность CYP-(17,20-лиазы)

Недостаточность 17,20-лиазной активности фермента CYP17 (цитохром Р450с17) приводит к нарушению превращения 17а-гидроксипрег-ненолона и 17а-гидроксипрогестерона в андро-генные гормоны дегидроэпиандростерон и анд-ростендион.

Клиническая картина

Фенотип лиц с генетически детерминирован­ным мужским полом может быть женским со слепо заканчивающимся влагалищем, амбивален-


тным или преимущественно мужским. Вольфо-вы протоки дифференцированы нормально или гипопластичны, производные мюллеровых про­токов отсутствуют. В пубертатном периоде от­сутствуют вторичные половые признаки или по­являются легкие симптомы вирилизации.

Диагностика

Диагностическое значение имеют повышен­ная концентрация С21 -стероидов 17а-гидроксип-рогестерона и 17а-гидроксипрегненолона, сни­женная концентрация С19-стероидов дегидроэ-пиандростерона и андростендиона, а также тестостерона и эстрадиола. При стимуляции АКТГ или ХГ отношение С21-стероиды/С|9-сте-роиды значительно повышается.

Лечение

Заместительную терапию половыми гормона­ми проводят в пубертатном периоде. При гене­тически детерминированном мужском поле у па­циента, который рос и воспитывался как девочка, до наступления пубертатного периода яички сле­дует удалить, чтобы избежать вирилизации.

Недостаточность 17Ь-гидроксистероиддегидрогеназы

Из 5 изоферментов 17в-ГСД наибольшее зна­чение для дифференцировки по мужскому типу имеет экспрессирующийся в яичках фермент 17в-ГСД типа 3, который катализирует последнюю ступень биосинтеза половых гормонов. На этой ступени происходит превращение дегидроэпи-андростерона в А5-андростендиол, андростенди­она в тестостерон и эстрона в 17в-эстрадиол. Не­достаточность тестостерона приводит к полно­му отсутствию маскулинизации у плода мужского пола во внутриутробном периоде. Однако в пубертатном периоде в результате экстрагланду-лярного превращения имеющегося в избытке ан­дростендиона в тестостерон другими изофермен-тами 17р-ГСД происходит выраженная вирили­зация.

Клиническая картина

В большинстве случаев лица с генетически де­терминированным мужским полом имеют женс­кие наружные половые органы со слепо заканчи-



 


 


вающимся влагалищем, иногда отмечаются лег­кие симптомы вирилизации. Вольфовы протоки дифференцированы, производные мюллеровых протоков отсутствуют. В пубертатном периоде происходит выраженная вирилизация с ломкой голоса и увеличением клитора. Иногда отмечает­ся гинекомастия. Как и при недостаточности 5а-редуктазы, описаны случаи изменения женс­кой половой роли на мужскую при начавшейся вирилизации.

Диагностика

Начиная с пубертатного периода повышается концентрация андростендиона и эстрона в плаз­ме крови, концентрация тестостерона и эстради-ола снижается. В препубертатном периоде необ­ходима стимуляция ХГ, она приводит к выражен­ному увеличению отношения андростендион/ тестостерон и эстрон/эстрадиол. Диагностика включает в себя также анализ ДНК, в частности гена HSD17B3.

Лечение

У лиц с генетически детерминированным мужс­ким полом, которые росли и воспитывались как де-


вочки, следует удалить яички до наступления пу­бертатного периода. При амбивалентных половых органах может встать вопрос о мужской половой ориентации. В таких случаях в детском возрасте про­водят терапию тестостероном для увеличения раз­меров полового члена, которую дополняют хирур­гической коррекцией, направленной на маскулини­зацию половых органов. В пубертатном периоде следует назначить заместительную терапию тесто­стероном для достижения полной маскулинизации и предупреждения гинекомастии (рис. 7-11 и 7-12).

Гипоплазия клеток Лейдига

Редкой причиной ложного мужского гермафро­дитизма является отсутствие чувствительности кле­ток Лейдига к ХГ и ЛГ (агенезия или гипоплазия клеток Лейдига).

Этиология и патогенез

Гипоплазия или агенезия клеток Лейдига объяс­няется недостаточностью рецепторов, которая де­лает эти клетки нечувствительными к влиянию ХГ и ЛГ (Themmen u. Branner, 1996). Недоста­точная выработка тестостерона приводит к недо-


Рис. 7-11. Схема нарушения биосинтеза стероидных гормонов при недостаточности 17(3-ГСД.



 


 


Рис. 7-12. Пациентка с недостаточностью 17(3-ГСД.

статочной маскулинизации плода мужского пола во внутриутробном периоде. Поскольку, в отли­чие от дисгенезии гонад, клетки Сертоли сохра­нены и нормально функционируют, т. е. проду­цируют антимюллеров гормон, то у лиц с этой патологией производные мюллеровых протоков отсутствуют. У некоторых пациентов вольфовы протоки бывают дифференцированы, несмотря на недостаточную маскулинизацию наружных поло­вых органов. Это, по-видимому, объясняется па-ракринной секрецией тестостерона, которого до­статочно для локального действия: индуцирования дифференцировки вольфовых протоков. Однако концентрация тестостерона в плазме остается слишком низкой, чтобы вызвать достаточную маскулинизацию наружных половых органов. Клинические проявления недостаточности тесто­стерона соответствуют характеру нарушений его биосинтеза.

Клиническая картина

Наружные половые органы обычно развиты по женскому типу со слепо заканчивающимся влага­лищем и легкими признаками вирилизации, но могут быть также амбивалентными или развиты по мужскому типу. Отмечаются развитые в раз­личной степени производные вольфовых прото­ков, производные мюллеровых протоков отсутству-


ют. Признаки полового созревания в пубертатном периоде не появляются.

Диагностика

Уровень тестостерона в плазме низкий, однако в препубертатном периоде он не имеет диагнос­тического значения. После стимуляции ХГ про­исходит небольшое повышение уровня тестосте­рона, но без повышения уровня его предшествен­ников, которое наблюдается при нарушении его биосинтеза. Связывание ХГ и ЛГ с рецепторами клеток Лейдига незначительное.

Лечение

Выбор пола определяется по степени маску­линизации. Заместительную терапию половыми гормонами проводят ко времени наступления пубертатного периода.

Недостаточность стероид-5а-редуктазы типа 2

Новаковский и Ленц в 1961 г. впервые опи­сали форму ложного гермафродитизма, насле­дуемую по аутосомно-рецессивному типу. Они назвали ее псевдовагинальной перинеоскроталь-ной гипоспадией (Nowakowski u. Lenz, 1961). В дальнейшем Императо-Магинли и соавт. (Imperato-McGinley et al., 1974) показали, что в основе этого заболевания лежит недостаточность стероид-5а-редуктазы типа 2, кодируемой геном SRD5A2.

Этиология и патогенез

Превращение тестостерона в биологически более активный дигидротестостерон происходит при участии фермента стероид-5а-редуктазы типа 2, кодируемого геном SRD5A2 (Andersson et al., 1991). Известны различные дефекты этого фермента. Чаще речь идет об уменьшении срод­ства к тестостерону и тем самым снижении ак­тивности фермента (Moore et al., 1975). К дру­гим дефектам относятся изменения, приводящие к уменьшению стабильности фермента и его сродства к кофактору NADPH (Leshin et al., 1978). Во всех случаях нарушается превращение тестостерона в дигидротестостерон в тканях. Это проявляется в недостаточной маскулинизации наружных половых органов. Развитие вольфо-вых протоков, находящееся исключительно под



 


 


влиянием паракриннои секреции тестостерона, а также регрессия мюллеровых протоков не на­рушены. В пубертатном периоде происходит вы­раженная вирилизация, несмотря на сохраняю­щуюся недостаточность 5ос-редуктазы. Секреция эстрадиола нормальная, гинекомастия не наблю­дается.

Клиническая картина

У детей с генетически детерминированным мужским полом недостаточность стероид-5а-ре-дуктазы типа 2 вызывает выраженное в различ­ной степени нарушение маскулинизации. Кли­нически это может проявиться внешне нор­мальными наружными половыми органами, развитыми по мужскому типу, различными ва­риантами амбивалентных половых органов, а также полностью женским фенотипом. Яички бывают расположены в паховых каналах, губно-мошоночных складках или мошонке. Производ­ные вольфовых протоков полностью развиты (придатки яичек, семявыносящие протоки и се­менные пузырьки). Семявыносящие протоки иногда открываются во влагалище. Производные мюллеровых протоков отсутствуют (Sinnecker et al., 1996; Walsh, 1974).

В пубертатном периоде на фоне нормального повышения уровня тестостерона отмечается вы­раженная вирилизация с ломкой голоса и уве­личением размеров полового члена без появле­ния гинекомастии.

Диагностика

В детском возрасте определение концентра­ции гормонов в сыворотке крови диагностичес­кого значения не имеет. После стимуляции ХГ отмечается существенное повышение отноше­ния тестостерон/дигидротестостерон (Hiori et al., 1996). Снижение активности фермента мож­но выявить и в культуре фибробластов, полу­ченных из кожи половых органов (Pinsky et al., 1978). Анализ гена SRD5A2 позволяет подтвер­дить диагноз даже при минимальной недоста­точности фермента (Hiori et al., 1996; Sinnecker et al., 1996).

Лечение

Дети, у которых половой член выражен, не­смотря на малые размеры, должны воспитывать­ся как мальчики. Раннее лечение дигидротесто-


стероном способствует увеличению размеров по­лового члена и облегчает хирургическую коррек­цию гипоспадии. После пубертатного периода также показана терапия высокими дозами тесто­стерона для усиления вирилизации (Price et al., 1984).

У детей, которых воспитывают как девочек, до наступления пубертатного периода следует обязательно удалить яички во избежание вири­лизации. В пубертатном периоде проводят заме­стительную терапию эстрогенными и гестагенны-ми препаратами (рис. 7-13 и 7-14).

Синдром резистентности к андрогенам

Резистентность к андрогенам является вто­рой после дисгенезии гонад причиной ложного мужского гермафродитизма. Несмотря на нор­мальную или даже повышенную концентрацию андрогенов в плазме крови, отмечается недо­статочность андрогенного влияния на ткани. Клинически синдром может проявиться пол­ностью женским фенотипом (тип 5, см. рис. 7-3 и табл. 7-1) при полной резистентности к анд­рогенам (синдром тестикулярной феминиза­ции), различными вариантами амбивалентных гениталий (типы 4—2) или мужским фенотипом, при котором у пациентов отмечаются частич­ная резистентность к андрогенам и бесплодие (тип 1).

Этиология и патогенез

Причиной резистентности к андрогенам яв­ляется недостаточность андрогенных рецепторов.

Она может быть обусловлена нарушением свя­зывания андрогенов с рецепторами, транслока­цией комплекса стероидный гормон—рецептор из цитоплазмы в клеточное ядро, димеризацией ре­цепторов и связыванием их с ДНК и последую­щей транскрипцией и трансляцией.

Белок андрогенного рецептора кодируется ге­ном, локализованным на длинном плече Х-хро-мосомы (Xqll-12). Этот белок в С-концевой об­ласти имеет домены, связывающие ДНК и гормон (рис. 7-15).

Почти во всех случаях резистентности к анд­рогенам удается выявить мутации гена, кодиру­ющего андрогенный рецептор. Чаще это точко-вые мутации, затрагивающие одну аминокислоту. В зависимости от локализации мутации рецеп-торная недостаточность проявляется по-разно-


Рис. 7-13. Недостаточность стероид-5а-редуктазы типа 2.


Рис. 7-14. Пациентка (кариотип 46.XY) с недостаточностью 5а-редуктазы (Sinnecker et al„ 1996).


Рис. 7-15. Схематическое изображение гена белка андрогенно-го рецептора и взаимодействия активированного комплекса ан-дрогенный рецептор-дигидротестостерон с ДНК.



 


 


му — от полной утраты активности рецептором (Burstein et al., 1979; Marcelli et al., 1990) до из­менения качества связи с гормоном (McPhaul et al., 1991) или нарушения связывания комплекса стероидный гормон—рецептор с ДНК. Замена од­ного или нескольких оснований кодирующей последовательности гена при нарушенном сплай­синге может привести к преждевременному по­явлению стоп-кодона и утрате рецептором ДНК-и гормонсвязывающего доменов (Hiort et al., 1996; Marcelli et al., 1990; McPhaul et al., 1991). Помимо точковых мутаций, возможны также делеции и инсерции, которые, как правило, вы­зывают полную резистентность к андрогенам. Обычно пациенты с одинаковой мутацией име­ют сходный фенотип, хотя в отдельных случаях фенотипы у больных членов одной семьи могут сильно различаться (рис. 7-16, а и б).

Полная резистентность к андрогенам

Если действие андрогенов полностью блоки­руется, в эмбриональном периоде происходит развитие вольфовых протоков или маскулини-


зация наружных половых органов. Поскольку вы­работка антимюллерова гормона и его действие не нарушаются, происходит полная регрессия мюллеровых протоков. У детей концентрация половых гормонов и гонадотропинов в сыворотке крови низкая и соответствует возрастной норме (Fakhry et al., 1988). В пубертатном периоде в гипоталамо-гипофизарной системе, которая так­же резистентна к андрогенам, увеличивается ам­плитуда и частота пульсирующей секреции ЛГ (Brown et al., 1990), что вызывает повышенную выработку яичками тестостерона (Tsuchiya et al., 1995) и эстрадиола (MacDonald et al., 1979). В результате экстрагландулярной ароматизации накапливающегося в крови тестостерона проис­ходит дальнейшее увеличение концентрации эс­традиола, которое вызывает выраженную феми­низацию.

Клиническая картина

Клиническая картина при полной резистент­ности к андрогенам характеризуется женским фенотипом (см. рис. 7-16, а) при генетически


 




 


Рис. 7-16. Полная резистентность к андрогенам, о - пациентка (кариотип 46.XY) с полной резистентностью к андрогенам типа 5; б- наружные половые органы этой пациентки



 


 


детерминированном мужском поле и хорошо раз­витыми женскими вторичными половыми при­знаками, появляющимися в пубертатном перио­де (тип 5). Вторичное оволосение обычно слабо выражено. Клитор нормальных размеров, малые половые губы недостаточно развиты, влагалище слепо заканчивается. Производные мюллеровых (матка, маточные трубы) и вольфовых протоков отсутствуют. Глубина влагалища обычно доста­точна для нормальной половой жизни. Половая идентификация женская. Частота полной резис­тентности к андрогенам составляет 1 на 20 000 рождений мальчиков (Grumbach u. Conte, 1998). У детей иногда обнаруживают яички в паховых каналах или паховые грыжи. Однако основанием для диагностики синдрома часто становится от­сутствие менструаций, несмотря на появление признаков полового созревания.

Диагностика

Характерные клиническая картина и гормо­нальный профиль — феминизация, первичная аменорея, слепо заканчивающееся влагалище, повышенный уровень ЛГ и резко повышенный уровень тестостерона в сыворотке крови в пост­пубертатном периоде — позволяют поставить пра­вильный диагноз.

До наступления пубертатного периода клини­ческая картина и гормональный профиль неин­формативны. Заподозрить синдром позволяют расположенные в паховых областях или в поло­вых губах яички. Иногда яичко обнаруживают во время операции, выполняемой по поводу пахо­вой грыжи. В таких случаях для подтверждения диагноза проводят пробу на резистентность к андрогенам и молекулярно-генетический анализ, позволяющий выявить мутации в гене рецептора к андрогенам.

Проба на резистентность к андрогенам основа­на на биологическом эффекте анаболического андрогенного гормона станозолола на концент­рацию СССГ в сыворотке крови. В норме после введения 0,2 мг/кг станозолола в течение 3 дней концентрация СССГ в сыворотке крови через 5—8 дней снижается наполовину. У пациентов с полной резистентностью к андрогенам (тип 5) такого снижения не происходит, а при частич­ной резистентности к андрогенам концентрация СССГ снижается в различной степени в зависи­мости от недостаточности маскулинизации, но это снижение выражено в меньшей степени, чем в норме (Sinnecker u. Kohler, 1989; Sinnecker et


Рис. 7-17. Проба на резистентность к андрогенам (Sinnecker et al„ 1997). Снижение концентрации СССГ в сыворотке крови че­рез 3 дня после введения станозолола (0,2 мг/кг) выражено в про­центах от исходного значения у пациентов с резистентностью к андрогенам (типы 2-5) и у пациентов контрольной группы с раз­личными аномалиями развития половых органов, но нормальной чувствительностью к андрогенам,

Точками обозначены пациенты, линиями - медианы в каждой груп­пе, Звездочки обозначают степень достоверности различий меж­ду исследованными группами пациентов (н,д, - недостоверно; * - <0,05; ** - <0,01; *** - <0,001; **** - <0,0001).

al., 1997). Результаты пробы на резистентность к андрогенам приведены на рис. 7-17. Эта про­ба позволяет оценить степень резистентности к андрогенам и тем самым дополняет информа­цию, получаемую при структурном анализе ДНК.

Лечение

Лечение полной резистентности к андрогенам не представляет трудностей. Яички следует по возможности сохранить до завершения пубер­татного периода, чтобы обеспечить спонтанное развитие по женскому типу. После пубертатно­го периода их необходимо удалить, так как риск злокачественного их перерождения на третьем десятилетии жизни возрастает до 4—10% (Manuel et al., 1976; Rutgers u. Scully, 1991; Verp u. Simpson, 1987). После гонадэктомии назначают замести­тельную терапию эстрогенами и гестагенами. При неглубоком влагалище его углубляют с по­мощью экспандера.



 


 




 


 


Рис. 7-18. Наружные половые органы пациентки (кариотип 46,XY) с частичной резистентностью к андрогенам (тип 4).

Частичная резистентность к андрогенам

Если биологическое действие андрогенов на­рушено частично, в эмбриональном периоде сти­муляция вольфовых протоков и маскулинизация наружных половых органов оказываются непол­ными. Поскольку выработка антимюллерова гор­мона и его эффект не нарушены, то происходит полная регрессия мюллеровых протоков.

Клиническая картина

В зависимости от степени недостаточности рецепторов андрогенов пациенты имеют преиму­щественно женский фенотип, слепо заканчива­ющееся влагалище и легкие признаки вирилиза­ции (тип 4), различные варианты амбивалентных гениталий (типы 3 и 2) или нормальный мужс­кой фенотип, при котором, однако, страдают бес­плодием, обусловленным азооспермией (тип 1). Фотографии половых органов таких пациентов приведены на рис. 7-18—7-20. В пубертатном пе­риоде из-за частичного эффекта андрогенов, не­смотря на высокую концентрацию тестостерона в сыворотке крови, мужские вторичные половые признаки выражены относительно слабо. С дру­гой стороны, повышенная экстрагландулярная продукция эстрогенов приводит к развитию ги­некомастии.


Рис. 7-19. Наружные половые органы у пациентки (кариотип 46,XY) с частичной резистентностью к андрогенам (тип 3).

Разнообразие клинических форм заболевания велико. Хотя, учитывая Х-сцепленный рецессив­ный тип наследования, в одной и той же семье пациенты должны иметь одинаковый генетичес­кий дефект рецептора, степень маскулинизации у них может быть различной. Разнообразие кли­нических проявлений требует проведения диф-

Рис. 7-20. Наружные половые органы пациента (кариотип 46,XY) с частичной резистентностью к андрогенам (тип 2),



 


 


ференциальной диагностики с другими формами ложного мужского гермафродитизма.

Диагностика

Развитие наружных половых органов отлича­ется значительной вариабельностью. Вольфовы протоки у пациентов либо отсутствуют, либо ги-попластичны или развиты нормально. Производ­ных мюллеровых протоков обычно не бывает. Гормональный профиль до наступления пубер­татного периода неинформативен. После стиму­ляции ХГ уровень тестостерона бывает нормаль­ный, при пробе на резистентность к андрогенам концентрация СССГ снижается в меньшей сте­пени, чем в норме, в отличие от пациентов с полной резистентностью, у которых она не снижается (Sinnecker u. Kohler, 1989; Sinnecker et al., 1997). Различны также биохимические из­менения рецепторов андрогенов, которые часто носят качественный характер. Однако нередко в исследованиях на культуре фибробластов, полу­ченных из кожи половых органов, дефект ре­цепторов выявить не удается (Griffin, 1992). Ана­лиз ДНК позволяет верифицировать диагноз, отличить наследственные формы от новых му­таций и выявить соматический мозаицизм (Hiort et al., 1993; Hiort et al, 1998; Holterhus et al., 1997).

От практиковавшегося ранее пробного лече­ния тестостероном детей, которых можно было воспитывать как девочек, в настоящее время от­казались. У таких детей следует по возможности уменьшить риск дополнительной вирилизации во избежание гипертрофии клитора.

Лечение

Выбор пола для дальнейшего воспитания ре­бенка зависит от того, насколько выражена не­достаточность маскулинизации. Чтобы оценить шансы на достижение достаточной вирилизации лечением высокими дозами тестостерона, прово­дят пробу на резистентность к андрогенам, а при семейной форме заболевания — также пробное лечение кого-нибудь из более старших членов семьи с этим заболеванием (Sinnecker et al., 1997). В пубертатном периоде часто развивается выра­женная гинекомастия. Если предполагается сла­бый ответ на лечение тестостероном, даже при высоких его дозах, ребенка с амбивалентными половыми органами следует воспитывать как де­вочку. Для этого по возможности раньше (в те-


чение первых 2 лет жизни) прибегают к фемини­зации наружных половых органов с помощью пластики вульвы. Пластику преддверия влагали­ща и самого влагалища выполняют в конце пу­бертатного периода или в более поздние сроки (см. ниже). Гонадэктомию следует выполнять по двум соображениям: во-первых, из-за высокого риска злокачественного перерождения, во-вторых, из-за возможности вирилизации в пубертатном периоде. В отличие от полной резистентности к андрогенам, при частичной резистентности яич­ки у детей, которые воспитываются как девочки, следует обязательно удалять до наступления пу­бертатного периода. В пубертатном периоде про­водят заместительную терапию эстрогенами и гестагенами.


Дата добавления: 2014-12-11 | Просмотры: 4117 | Нарушение авторских прав



1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | 13 | 14 | 15 | 16 | 17 | 18 | 19 | 20 | 21 | 22 | 23 | 24 | 25 | 26 | 27 | 28 | 29 | 30 | 31 | 32 | 33 | 34 | 35 | 36 | 37 | 38 | 39 | 40 | 41 | 42 | 43 | 44 | 45 | 46 | 47 | 48 | 49 | 50 | 51 | 52 | 53 | 54 | 55 | 56 | 57 | 58 | 59 | 60 | 61 | 62 | 63 | 64 | 65 | 66 | 67 | 68 | 69 | 70 | 71 | 72 | 73 | 74 | 75 | 76 | 77 | 78 | 79 | 80 |



При использовании материала ссылка на сайт medlec.org обязательна! (0.049 сек.)