АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Реакція імунофлуоресценції (РІФ)

Позитивні результати реакцій аглютинації, преципітації, лізису, РЗК й інших спостерігають тільки при оптимальному співвідношенні реагентів. Якщо ця умова не виконується, зафіксувати видимий позитивний результат не завжди вдається.

Чутливість імунологічних реакцій значно зростає завдяки використанню міче-них реагентів, наприклад, антитіл, ко н ’югованих з флуохромом. При зв’язуванні таких імуноглобулінів з антигеном в люмінесцентному мікроскопі спостерігають світіння об’єктів (бактерій, вірусів, клітин), покритих міченими антитілами. Імуно-флуоресцентним методом можна також визначати антитіла в сироватці хворого, на поверхні клітин і тканин. У цьому випадку використовують мічені флуоресцеї-ном сироватки проти глобулінів людини (антиглобулінові), якими обробляють ком-плекс антиген-антитіло. Внаслідок цього він під дією ультрафіолетових променів починає світитись зеленим світлом.

У першому випадку говорять про прямий, у другому – про непрямий імуно-флуоресцентний метод (рис. 55).

Імунофлуоресцентні методи вживаються для виявлення аутоантитіл до тка-нинних і клітинних антигенів. Використовуючи зрізи тканин, на предметному склі можна виявити антитіла до декількох різних антигенів.

З допомогою імунофлуоресцентних методів можна ідентифікувати окремі клітини в суспензії клітин з допомогою виявлення антигенів на поверхні живих клітин. Для цього суспензію живих клітин, які бу л и попередньо пофарбовані флуо-ресцентними барвниками, пропускають через спеціальний прилад (цитофлуори-метр), який заміряє інтенсивність світіння кожної клітини в різних областях спектра і потім розділяє клітини за параметрами світіння.

Частина ІІ. Імунологія

ПРЯМИЙ МЕТОД

Флуоресцуюче антитіло

/і

Антиген

фіксований

на слайді

НЕПРЯМИЙ МЕТОД

Флуоресцуючий анти-імуноглобулін

Антитіло

Антиген

фіксований

на слайді

/ \ Фіксоване

П Q антитіло

Рис. 55. Реакція імунофлуоресценції (прямий і непрямий методи).

Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 1981 | Нарушение авторских прав