АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Дослідження мікрофлори повітря

В атмосферному повітрі можуть знаходитись десятки й сотні видів сапрофіт-них мікроорганізмів. Серед них регулярно виявляють стафілококи, мікрококи, сарцини, спороносні палички, актиноміцети, віруси. Вони потрапляють у повітря з грунту, води, рослин, тварин, харчових продуктів і відходів деяких виробництв. Мікрофлору атмосферного повітря досліджують рідко, в основному, за несприят-ливих епідеміологічних ситуацій. У повітрі закритих приміщень, особливо лікар-няних, поряд із нешкідливими сапрофітами можуть виявляти й патогенні мікро-організми: збудники дифтерії, скарлатини, менінгіту, коклюшу, туберкульозу, віруси грипу, парагрипу, кору та ін. Санітарно-показовими бактеріями для повітря закри-тих приміщень є золотисті стафілококи, альфа- і бета-гемолітичні стрептококи.

Для повсякденної санітарно-гігієнічної оцінки повітря лікарняних приміщень визначають такі показники:

1. Загальна кількість мікробів у 1 м³ повітря.

2. Кількість у 1 м³ санітарно-показових бактерій.

За цими показниками визначають ступінь бактерійного забруднення повітря-ного середовища. Виявлення золотистих стафілококів і гемолітичних стрептококів вище допустимих нормативів свідчить про епідеміологічне неблагополуччя дослі-джуваного об’єкта.

Бактеріологічні лабораторії санітарно-епідеміологічних станцій у планово-му порядку проводять мікробіологічні дослідження таких приміщень як операційні, реанімаційні й перев’язувальні відділення хірургічних і дитячих стаціонарів, по-логових будинків, станцій переливання крові, аптек, дитячих садків, ясел, шкіл, кінотеатрів тощо.

При проведенні мікробіологічних досліджень повітря використовують седи-ментаційний, аспіраційний і фільтраційний методи.

Седиментаційний метод Коха. Цей метод оснований на принципі осадження мікробів. Дві чашки Петрі з МПА або спеціальним агаром для гемолітичних стреп-

Частина І. Загальна мікробіологія

тококів (середовище Гарро) чи жовтково-сольовим агаром (ЖСА) для золотистих стафілококів відкривають і встановлюють на горизонтальній поверхні в місці взяття проби. Залежно від мікробного забруднення повітря експозиція чашок продов-жується від 5-10 хв, при великій кількості бактерій, до 20-40 хв – при малій. Чаш-ки закривають, інкубують 24 год при 37 °С і ще добу при кімнатній температурі. Для визначення загального мікробного числа повітря в 1м³ підраховують кількість всіх колоній на МПА в обох чашках і знаходять середнє арифметичне. За даними Омелянського на поверхню в 100 см² за 5 хв осідає стільки бактерій, скільки їх міститься в 10 дм³ повітря. Наприклад, на чашці з агаром після 5 хв експозиції виросло 33 колонії. Площа стандартної чашки Петрі складає біля 66 см². На 100 см² агару виросло б 33 × 100: 66 = 50 колоній, тобто та кількість мікробів, що міститься в 10 дм³ повітря. Отже, в 1 м³ їх буде 50 х 1000: 10 = 5000.

Ретельна перевірка багатьох показників, вирахуваних за формулою Омелянсь-кого, виявила, що вони втричі менші від чисел, отриманих більш точними метода-ми дослідження мікрофлори повітря за допомогою спеціальних апаратів. У зв’яз-ку з цим метод Коха використовують для орієнтовного визначення мікробного забруднення, але він дає хороші результати при порівняльному дослідженні мікро-флори різних лікарняних приміщень.

При перегляді чашок Петрі з елективними середовищами звертають увагу на колонії, характерні для бактерій, що ростуть саме на даному живильному середо-вищі. Наприклад, на агарі Гарро підраховують колонії альфа- і бета-гемолітичних стрептококів, на ЖСА – колонії золотистих стафілококів. Типові колонії мікро-скопують, виділяють чисті культури, ідентифікують їх до виду і лише після цього вираховують кількість тих чи інших видів бактерій. Це роблять тоді, коли визна-чають седіментаційним методом кількість санітарно-показових мікроорганізмів у 1 м³ повітря.

Аспіраційний метод Кротова. Він грунтується на ударній дії повітряного струменя об поверхню живильного середовища й прилипанні до нього бактерій. Дослідження проводять за допомогою апарата Кротова (рис. 26), який може влов-

лювати високодисперсні фази мікробного аерозолю.

Апарат складається з пристрою для
відбору проб повітря, ротаметра, який регу-
лює швидкість і кількість всмоктуваного
повітря та електродвигуна. Прилад включа-
ють у електромережу, знімають кришку, на
спеціальний диск закріплюють відкриту
чашку Петрі з живильним середовищем. Ру-
кою надають їй інерційного руху за годин-
никовою стрілкою, закривають кришку апа-
рата і включають двигун. Чашка обертаєть-
ся з постійною швидкістю 60 об/хв. Повітря
_{Рис. 26. Апарат Кротова.} із заданою швидкістю втягується через кли-

Роз ді л 5. Екологія мікроорганізмів

ноподібну щілину плексигласової пластини, що закриває чашку Петрі з агаром. При цьому частинки аерозолю з мікроорганізмами рівномірно прилипають до живильного середовища. При дослідженні загального мікробного числа пропус-кають, як правило, 100 дм³ повітря зі швидкістю 25 дм³/хв. Якщо визначають кількість індикаторних бактерій (золотисті стафілококи, альфа- і бета-гемолітичні стрептококи) об’єм досліджуваного повітря збільшують до 300-500 дм³. Після взяття проби чашку з посівом повітря знімають, закривають її й інкубують 18-24 год при 37 °С і ще 24 год при кімнатній температурі.

Розрахунок загального мікробного числа проводять за формулою:

a ×1000
X=,

V

де а – кількість колоній, що виросли в чашці Петрі,

V– об’єм пропущеного через прибор повітря в дм³,

1000 – заданий об’єм повітря для визначення ЗМЧ. Приклад розрахунку: через прилад пропущено 100 дм³ повітря; число колоній, що виросли – 370. Отже, кількість мікроорганізмів у 1 м³ повітря буд е дорівнювати:

370×1000
X= =3700.

Фільтраційний метод. Для його використання запропоновані спеціальні прилади: Дяконова, Речменського, Кіктенко, ПАБ-1, ПОВ-1 та ін. Принцип їх дії зводиться до пропускання певного об’єму повітря через рідину в приладі (або фільтр) з наступним висівом мірної кількості її на живильні середовища. При засто-суванні фільтрів їх накладають на щільне живильне середовище. Підраховують число колоній, що виросли, та проводять відповідні перерахунки на ве сь об’єм рідини в приладі й визначають число мікроорганізмів у 1 м³ повітря.

За допомогою цього методу можна провести дослідження повітря на при-сутність і тих патогенних мікроорганізмів, які не культивуються на живильних середовищах. Рідину, що поглинула бактерійні аерозолі повітря, можна викорис-тати для зараження лабораторних тварин або проведення спеціальних бактеріо-логічних та вірусологічних досліджень.

Безпосереднє виявлення патогенних і умовно-патогенних мікроорганізмів (стафілококи, стрептококи, псевдомонади, інші грамнегативні бактерії), які вик-ликають шпитальні інфекції, проводять при аналізі повітря хірургічних, акушерсь-ко-гінекологічних та інших стаціонарів.

При виникненні внутрішньолікарняних інфекцій, спричинених стафілокока-ми, проводять дослідження на виявлення джерела й шляхів їх розповсюдження. При цьому визначають ідентичність культур, виділених із повітря, інших об’єктів оточуючого середовища, а також від хворих і медичного персоналу за допомогою фаготипування.

Державні стандарти для оцінки санітарно-бактеріологічних показників по-вітря ще нерозроблені. Запропоновані лише тимчасові положення про допустиме нормування мікробного забруднення окремих лікарняних та інших приміщень.

Частина І. Загальна мікробіологія

Так, у повітрі операційних, родильних залів, реанімаційних, перев’язувальних і процедурних загальна кількість бактерій в 1 м³ до роботи не повинна перебільшу-вати 500, після роботи – 1000; кількість S.aureus не більше 4, а гемолітичних стреп-тококів взагалі не повинно бути. У повітрі лікарняних палат взимку ЗМЧ не по-винно перевищувати 3500, S.aureus – до 24, а гемолітичних стрептококів не більше 24. Влітку ці показники не повинні перевищувати відповідно 5000, 52 і 36.

Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 2266 | Нарушение авторских прав