 |
|
АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология |
Визначення стану системи фагоцитозуІснує декілька методів визначення фагоцитарної активності нейтрофілів. Суть одного з них полягає в тому, що виділені нейтрофіли змішують з рівною кількістю суспензії грибків кандида в присутності АВ-сироватки. Клітини поміщають в тер-мостат при 37 °С на 1 годину. Після інкубації лейкоцити руйнують 2,5 % розчином дезоксихолату натрію і фарбують 0,01 % розчином метиленової синьки. Підрахо-вують кількість вбитих клітин грибів. При іншому способі 0,1 мл крові хворого наносять на знежирене покривне скельце і витримують у вологій камері при 37 °С 45 хв, після чого згусток, що утворився, видаляють пінцетом. Покривне скельце з фіксованими на ньому ней-трофілами промивають в розчині Хенкса, наносять визначену кількість культури стафілокока або кишечної палички і знову інкубують у вологій камері 30 хв. Після чого скельце промивають у розчині Хенкса, препарат висушують, фіксують і фар-бують за Романовським–Гімзою. Облік фагоцитарної активності проводять, визна-чаючи відсоток нейтрофілів із фагоцитованими бактеріями (фагоцитарне число) і кількість поглинутих мікробів з розрахунку на один нейтрофіл (фагоцитарний індекс). У кожному препараті підраховують не менше 200 клітин. Бактерицидна активність фагоцитів в основному обумовлена ферментним набором клітини. То м у непрямі показники порушення бактерицидної активності можна одержати шляхом визначення різних клітинних ферментів, які характери-зують окисні процеси (пероксидаза, кисла і лужна фосфатаза тощо). З цією метою часто використовують реакцію відновлення нітросинього тетразолію у кольоровій цитохімічній реакції. Результати визначення дають можливість оцінити генерацію формазану за появою синього забарвлення. Аналогічний результат дають люмінесцентні спо-соби реєстрації утворення метаболічно активних форм кисню і вільних радикалів методами реєстрації хемолюмінесценції, яка підсилюється люмінофорами. Розділ 9. Імунологічні методи діагностики інфекційних захворювань Існують і інші методи, які дозволяють аналізувати автоматично кількісно в окремих клітинах відновлення нітросинього тетразолію з допомогою цитофото-метра, сполученого з мікроскопом, аналізаторів відеозображення тощо. Рухливість фагоцитів (лейкоцитів або моноцитів) досліджують за величи-ною спонтанної міграції із капілярів, а також за зміною міграції в присутності хемотаксичних агентів. Найбільш об’єктивним методом оцінки бактерицидної активності фагоцитів є використання бактерій, мічених радіоактивними ізотопа-ми, з наступним радіоактивним обліком зруйнованих бактерій. Визначають також кількість нейтрофілів, що несуть на собі Fс, С3 рецептори та ін. (в реакції ЕА і ЕАС-розеткоутворення). Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 866 | Нарушение авторских прав |