 |
|
АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология |
Індикаторна гемолітична системаЕРИТРОЦИТИ БАРАНА (АНТИГЕН) ГЕМОЛІТИЧНА СИРОВАТКА (АНТИТІЛО) Комплемента немає – зв’язався з дослідною системою. Без комплемента гемоліз еритроцитів неможливий. Рис. 54. Схема реакції зв’язування комплемента. Для сероідентифікації використовують стандартні діагностичні сироватки відомого титру. Для серологічної діагностики досліджувану сироватку прогріва-ють при 56 °С протягом 30 хв, для інактивації власного комплементу, а потім готу-ють ряд послідовних розведень для визначення титру антитіл. Антигенами мо-жуть бути бактеріальні клітини, віруси, білкові або полісахаридні речовини, екст-ракти органів і тканин. Комплемент представлено свіжою або ліофілізованою сироваткою гвінейсь-ко ї свинки, яку розводять 1:10. Гемолітичну сироватку використовують у потрійно-му титрі, а з еритроцитів барана готують 3 % суспензію в ізотонічному розчині хлориду натрію. Підготовка реагентів. Промисловість випускає стандартні гемолітичні си-роватки з відомим титром, який вказаний на етикетці. Але при довготривалому зберіганні з метою перевірки його гемолітичні сироватки перед основним дослі-дом титрують (табл. 24). У ряді пробірок в об’ємі 0,5 мл готують послідовні роз-ведення гемолізину до титру. У кожну пробірку вносять по 0,5 мл 3 % зависі ерит-роцитів, по 0,5 мл комплементу у розведенні 1:10 і по 0,5 мл фізіологічного розчи-ну. Пробірки ставлять у термостат при 37 °С на 1 годину. При відсутності гемолізу в контролі оцінюють його ступінь у дослідних пробірках за трьохплюсовою систе-мою: повний гемоліз (+++), частковий гемоліз (++ або +), відсутність гемолізу (–). За титр гемолітичної сироватки приймають те найбільше її розведення, яке в присутності комплементу викликає повний гемоліз еритроцитів. В РЗК беруть робочу дозу гемолітичної сироватки у потрійному титрі. Якщо титр сироватки складав 1:1800, то робочою дозою буде 1:600. Розділ 9. Імунологічні методи діагностики інфекційних захворювань
Дата добавления: 2015-09-03 | Просмотры: 794 | Нарушение авторских прав |