АкушерствоАнатомияАнестезиологияВакцинопрофилактикаВалеологияВетеринарияГигиенаЗаболеванияИммунологияКардиологияНеврологияНефрологияОнкологияОториноларингологияОфтальмологияПаразитологияПедиатрияПервая помощьПсихиатрияПульмонологияРеанимацияРевматологияСтоматологияТерапияТоксикологияТравматологияУрологияФармакологияФармацевтикаФизиотерапияФтизиатрияХирургияЭндокринологияЭпидемиология

Растворимые факторы T–клеток и контроль продукции IgE

Важным этапом на этом пути явились исследования группы K. Ishizaka (1968, 1985, 1989). На основании результатов экспериментальных исследований на грызунах ими была предложена общая схема регуляции образования IgE АТ, в которой ведущая роль отводилась растворимым факторам T–клеток, обладающим высоким сродством к иммуноглобулину E (IgE–связывающей активностью) (рис. 14). В результате антигенного воздействия примированные T–клетки (Lytl+, Lyt2+) или макрофаги становятся источником образования интерфероноподобного продукта, вызывающего в других T–клетках продукцию IgE–связывающих факторов. Эти не примированные Аг T–клетки имеют на своей поверхности Fc–Рц (FcP+ клетки) и маркёры, соответствующиеLytl+ клеткам. Одна и та же Lytl+ T–клетка способна, по-видимому, продуцировать IgE–связывающие факторы с разной физиологической направленностью. Одни из этих факторов усиливают образование IgE (IgE–усиливающий фактор, IgE–УФ), а другие тормозят (IgE–тормозящий фактор, IgE–ТФ). Оба IgE–связывающих фактора являются гликопротеидами со сходной величиной мол. массы порядка 15 кД. Усиливающее или тормозящее действие IgE–связывающих факторов зависит от степени гликозилирования (насыщения углеводными остатками) молекулы. IgE–УФ является высокогликозилированным, содержит богатый маннозой олигосахарид и потому имеет высокое сродство к лентил лектину и конканавалину А. IgE–ТФ, напротив, такую активность по отношению к лектинам не проявляет. Точкой приложения действия этих факторов является, по-видимому, несущая поверхностный IgE B–клетка памяти. Факторы регулируют дифференцировку этих клеток вIgE–секретирующие плазматические клетки (IgE–УФ) или тормозят продукцию IgE (IgE–ТФ) плазматическими клетками.

Рис. 14. Регуляция образования IgE АТ растворимыми факторами T–клеток (схема). Ал — аллерген; Τ — T–клетка; В — B–клетка; Мф — макрофаг; IgE–УФ — IgE–усиливающий фактор; IgE–ТФ —IgE–тормозящий фактор; ФУГ — фактор, усиливающий гликозилирование; ФТГ — фактор, тормозящий гликозилирование.

Гликозилирование IgE–связывающего фактора находится под контролем других T–лимфоцитов, которые, возможно, будучи примированы Аг, выделяют факторы, контролирующие гликозилированиеIgE–связывающего фактора в Lytl+, FcP+ непримированной Аг T–клетке.

Фактор, усиливающий гликозилирование — это, по-видимому, фермент, подобный калликреину. Переваривание этим ферментом субстрата в T–клетке приводит к образованию кининоподобного продукта, который и усиливает гликозилирование IgE–связывающего фактора посредством активации фосфолипазы.

Фактор, тормозящий гликозилирование, представляет собою, вероятно, фрагмент фосфорилированного липомодулина (макрокортина) с молекулярной массой 15 кД, тормозящий активность фосфолипазы и за счёт этого угнетающий гликозилирование молекулы IgE–связывающего фактора.

Таким образом, природа и биологическая активность IgE–связывающих факторов, образуемых одной и той же T–клеткой, определяются соотношением между факторами, усиливающими или тормозящими гликозилирование, которые индуцируют накопление IgE–усиливающего или IgE–тормозящего факторов. В свою очередь, соотношение IgE–УФ и IgE–ТФ определя поддержание продукции IgE АТ на том или ином уровне.

У человека IgE–связывающие факторы также, по-видимому, могут образовываться T–клетками (Ishizaka, 1989; Katz, 1986), однако эти факторы отличны от специально рассматриваемых IgE–связывающих факторов, продуктов B–клеток, имеющих Fc(e) Рц.

T–клеточные IgE–связывающие факторы человека способны регулировать синтез IgE B–клетками атопических больных. Получена T–клеточная гибридома человека, продуцирующая IgE–УФ. Этот IgE–УФ обладает аффинностью по отношению к лентил лектину и конканавалину А, что свидетельствует о присутствии в IgE–УФ N–связанных олигосахаров и поэтому — об аналогии с IgE–УФ животных. IgE–УФ был получен из T–клеточной гибридомы при инкубации её в присутствии IgE и брадикинина. Добавление очищенного IgE–УФ человека к B–клеткам атопических больных повышало в несколько раз продукцию ими IgE. Из той же самой гибридомы, но в присутствии IgE и липокортинов, получен был и IgE–ТФ. Этот фактор имел аффинность к лектину арахиса. Усиленный in vitro с помощью IgE–УФ синтез IgE тормозится при добавлении в клеточную культуру IgE–ТФ.

К сказанному следует добавить, что у больных гипер–IgE–синдромом и атопическим дерматитом показано присутствие в периферической крови T–клеток, которые способны продуцировать IgE–УФ, обладающий IgE–связывающей активностью.

Взаимоотношения, складывающиеся между лимфоидными клетками в процессе продукции Ig–АТ, не ограничиваются описанными механизмами. В последующем были получены новые сведения при изучении индукции синтеза IgE–клетками периферической крови человека. Существенный прорыв в расшифровке механизма запуска и регуляции продукции IgE человека был сделан в течение 80-х годов и базировался на фактическом экспериментальном материале, накопленном, главным образом, несколькими исследовательскими группами (Delespesse et al., 1989; Maggi et al., 1992;Parronchi et al., 1990; Romagnani, 1990; Romagnani et al., 1988; Stadler, 1991; Vercelli, Geha, 1991; Vercelli et al., 1989).

In vitro синтез IgE и необходимость интерлейкина 4

Первоначальные многократные попытки воспроизведения синтеза IgE–клетками крови человека показали, что такой синтез неосуществим при использовании клеток здорового донора. С другой стороны, у некоторых атопических больных во время или вскоре после естественной интенсивной экспозиции аллергеном обнаруживаются B–клетки, способные спонтанно синтезировать IgE invitro. Спонтанно синтезирующие IgE B–клетки несут поверхностный IgE (sIgE, от Surface), но не sIgM. Синтез IgE in vitro чаще воспроизводится на клетках больных с повышенной чувствительностью к домашней пыли, чем больных, чувствительных к пыльце растений, в период цветения. Наиболее постоянно синтез IgE in vitro воспроизводится при чувствительности к широкому спектру аллергенов, т.е. создаётся впечатление, что чем больше по дозе и продолжительности воздействие аллергенов, тем чаще удаётся воспроизвести синтез IgE in vitro.

Первое удачное воспроизведение синтеза IgE in vitro B–клетками здоровых лиц было получено при помощи использования T–клеточных клонов. Аллореактивный T–клеточный клон вызывал пролиферацию B–клеток, полученных от того же донора, и стимулировал одновременно продукцию всех классов иммуноглобулинов, в том числе и IgE. Этот клон индуцировал синтез IgE в культурахB–клеток другого здорового донора или атопических больных. Это указывало на то, что использованные клетки обладали соответствующими аллоантигенами. К сожалению, такая модель индукции in vitro синтеза IgE очень сложна, так как она может быть воспроизведена с B–клетками лишь ограниченного числа доноров. Для преодоления этих трудностей были получены T–клеточные клоны стимуляцией отдельных T–клеток фитогемагглютинином с поддержанием их роста последующим добавлением ИЛ–2. После активации фитогемагглютинином 18% T–клеточных клонов приобретали хелперную активность по отношению к синтезу in vitro IgE (равно как и IgM, и IgG) B–клетками всех обследованных доноров.

Хелперная активность проявлялась не только у T–клеточных клонов, но и у надосадочных жидкостей культур этих клеток. Последнее однозначно свидетельствовало о том, что эффект индукции синтеза IgE связан с каким-то растворимым посредником (медиатором). Далее оказалось, что хелперная активность надосадочных жидкостей угнетается в присутствии человеческого рекомбинантного ИФН–g, а в самой надосадочной жидкости был обнаружен иммуноферментным методом ИЛ–4. Между способностью T–клеточных клонов вызывать синтез IgE и высвобождать в культуральную среду ИЛ–4 существовал чёткий параллелизм, а добавление к мононуклеарным клеткам анти–ИЛ–4 АТ угнетало синтез IgE, вызванный не только рекомбинантным ИЛ–4, но и активными T–клеточными клонами или их надосадочными жидкостями. Синтез же IgG, вызванный надосадочными жидкостями T–клеточных клонов, лишь незначительно тормозился анти–ИЛ–4 АТ.

Что же касается участия ИФН–g, то он оказывает обратное ИЛ–4 действие на синтез IgE. Между IgE–индуцирующей активностью T–клеточных клонов и их способностью высвобождать ИФН–gсуществовали обратно пропорциональные отношения.

Таким образом, был сделан очень важный шаг, позволивший установить решающее значение продукта T–клеточных клонов — ИЛ–4 — в запуске синтеза IgE и, соответственно, связанных с ним аллергических АТ.

Дата добавления: 2014-12-12 | Просмотры: 857 | Нарушение авторских прав